¿Qué gamba conoce el principio de hibridación fluorescente in situ?
La hibridación fluorescente in situ (FISH) es una tecnología que utiliza señales de fluorescencia no radiactivas para detectar muestras de hibridación in situ. Combina la alta sensibilidad y seguridad de las señales de fluorescencia con la intuición de las señales de fluorescencia y la alta precisión de la hibridación in situ. Mediante la hibridación in situ de sondas de ADN marcadas con fluorescencia y el ADN de la muestra que se va a analizar, las señales fluorescentes se identifican y cuentan bajo un microscopio de fluorescencia, detectando y diagnosticando anomalías cromosómicas o genéticas en células y muestras de tejido, y proporcionando información para varios relacionados con genes Proporcionar una base precisa para la clasificación, predicción y pronóstico de enfermedades. Desde que Pinkel y Heiles introdujeron la tecnología FISH en el campo de la detección de cromosomas a finales de la década de 1980, la tecnología FISH se ha utilizado ampliamente en el diagnóstico clínico y la investigación científica, mostrando ventajas obvias en comparación con algunas tecnologías tradicionales.
En comparación con la inmunohistoquímica (IHC) tradicional, FISH tiene buena estabilidad y reproducibilidad. Actualmente, la inmunohistoquímica se utiliza ampliamente en el diagnóstico clínico de tumores y otros campos. El objeto de detección de la inmunohistoquímica son las proteínas relacionadas con enfermedades. Dado que la expresión de proteínas y su conformación se ven muy afectadas por diversos factores (como ácidos, bases y desnaturalizantes), la estabilidad de las condiciones de detección es crucial para los resultados de la detección. Además, el juicio sobre los resultados de las pruebas inmunohistoquímicas depende del juicio subjetivo de los resultados del desarrollo del color por parte del evaluador. Para algunos resultados positivos débiles, diferentes probadores son propensos a tener inconsistencias. Todos los factores anteriores pueden afectar el diagnóstico final de la enfermedad por parte del médico. La hibridación fluorescente in situ (FISH) se utiliza para detectar ADN en las células. La densa estructura de doble hélice permite que el ADN permanezca intacto después de millones de años. La estructura es estable y no se ve afectada fácilmente por las condiciones ambientales, lo que proporciona una buena base para la estabilidad de los peces. Además, la determinación de los resultados de la hibridación in situ de fluorescencia se basa en el juicio del color de la fluorescencia y el recuento de señales para cuantificar objetivamente los resultados de la detección. Con la ayuda de los sistemas operativos FISH correspondientes (como el hibridizador Hybrit de Abbott-Vysis y el sistema de pretratamiento de muestras VP2000) y los sistemas de imágenes de cromosomas (como CytoVision de AI), toda la operación FISH se automatiza, minimizando el número de operadores y los factores subjetivos de detección para asegurar la exactitud de los resultados.
La PCR es una tecnología de diagnóstico genético muy utilizada en los últimos años, con las ventajas de una alta sensibilidad y un funcionamiento sencillo. Sin embargo, la tecnología de diagnóstico por PCR tiene una alta proporción de falsos negativos y falsos positivos. La misma muestra sólo puede analizarse una vez y los resultados experimentales no pueden repetirse. Con el desarrollo continuo de la tecnología de sondas, la sensibilidad de FISH se ha acercado o alcanzado el nivel de la PCR, lo que puede compensar las limitaciones de la tecnología de PCR. La tecnología FISH no solo tiene proporciones extremadamente bajas de falsos positivos y falsos negativos (tomando como ejemplo la sonda de diagnóstico prenatal de Abbott-Vysis, la tasa de precisión llega al 99,9% en 29.000 casos), sino que también puede realizar múltiples operaciones FISH en la misma muestra. , el uso de sondas fluorescentes de diferentes colores puede detectar anomalías de múltiples cromosomas o genes al mismo tiempo, lo que ahorra mucho tiempo de detección. Además, FISH también se puede utilizar para diagnosticar anomalías en el número de cromosomas o genes específicos, así como eliminaciones, translocaciones y reordenamientos de segmentos específicos.