¿Cuáles son los requisitos de diseño para un laboratorio de amplificación genética?

Los experimentos de amplificación genética, también llamados experimentos de PCR, se caracterizan por un aumento significativo en trazas de ADN. La PCR es un método convencional para la investigación y los experimentos en biología molecular. Se utiliza ampliamente en diversos campos de la biología, como la detección del SIDA, la hepatitis B, las enfermedades epidémicas aviares, la detección y el diagnóstico de oncogenes, las huellas dactilares de ADN, la identificación individual y las pruebas de paternidad. evidencia forense, cuarentena animal y vegetal, alimentación animal, cosméticos, pruebas de higiene alimentaria, cultivos genéticamente modificados y pruebas de microorganismos genéticamente modificados, etc.

1. La distribución del laboratorio de PCR

En principio, el laboratorio de PCR se divide en cuatro áreas de trabajo independientes: área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos de amplificación. Área., con pasillos dedicados. Se debe establecer una sala de amortiguamiento en cada área de trabajo y se debe instalar un dispositivo de enclavamiento entre el área de trabajo y la sala de amortiguamiento. Las áreas de trabajo con diferentes funciones deben estar separadas e independientes. Cada área de trabajo debe tener una señalización clara y no pueden estar conectadas directamente. Si están estrechamente conectados, puede que sea necesario instalar una ventana de entrega de artículos. Las dos primeras regiones son regiones de preamplificación y las dos últimas regiones son regiones de posamplificación y deben estar estrictamente separadas. Los materiales experimentales, reactivos, papel de registro, bolígrafos y materiales de limpieza solo pueden fluir desde el área de preamplificación al área de posamplificación, es decir, desde el área de preparación de reactivos al área de preparación de muestras, al área de amplificación y al producto de amplificación. área de análisis y no se puede revertir el flujo. El flujo de aire en el laboratorio también debe fluir desde el área de preamplificación al área de posamplificación y no puede fluir en la dirección opuesta. Se deben instalar lámparas UV en la parte superior de cada área de trabajo, con una longitud de onda de 254 nm, y una lámpara UV de 40 W instalada cada 20 metros cuadrados.

2. Funciones y equipamiento principal de cada área del laboratorio

1. Área de preparación de reactivos: utilizada principalmente para la preparación de reactivos, envasado y preparación de la mezcla de reacción principal. Los reactivos y materiales utilizados para la preparación de muestras deben transportarse directamente a esta área y no a través de otras áreas. En esta área se deben almacenar las materias primas para los reactivos y en esta área se deben formular los reactivos requeridos. Los principales equipos de esta área incluyen balanzas, refrigeradores, centrífugas, muestreadores, osciladores, etc.

No existen requisitos estrictos para el control de la presión del flujo de aire en esta área.

2. Área de preparación de muestras: se utiliza principalmente para la conservación de muestras, extracción de ácidos nucleicos (ARN, ADN), conservación, adición de tubos de reacción de amplificación y medición de la síntesis de ADN. Los principales equipos de esta área incluyen refrigeradores, cabinas de seguridad biológica, centrífugas, muestreadores, osciladores, baños maría a temperatura constante, etc.

Se requiere que el gradiente de presión en esta área sea positivo en relación con las áreas adyacentes para evitar que la contaminación por aerosoles ingrese a esta área desde áreas adyacentes.

3. Área de amplificación: utilizada principalmente para la amplificación de ADN. Además, en esta área también se puede realizar la adición de la plantilla de ADN preparada (del área de preparación de muestras) y la preparación de la mezcla de reacción principal (del área de preparación de reactivos) a la mezcla de reacción. Los principales equipos de esta área incluyen: amplificadores, refrigeradores, centrífugas, muestreadores, etc.

Se requiere que el gradiente de presión en esta área sea negativo en relación con las áreas adyacentes para evitar fugas de aerosoles desde esta área.

4. Campo de análisis de productos de amplificación: determinación de productos de amplificación. El principal equipamiento de esta área incluye lectores de microplacas, lavadoras, inyectores de muestras, baños maría, etc.

El gradiente de presión en esta área requiere una presión negativa en relación con las áreas adyacentes para evitar que los productos de amplificación se difundan desde esta área a otras áreas.

3. Sistema de ventilación del laboratorio de PCR