¿Cuáles son las características fisiológicas de las células animales en condiciones de cultivo?
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El cultivo celular se refiere al crecimiento de células fuera del cuerpo. Las células animales ya no forman individuos durante el individuo. proceso de cultivo celular.
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Concepto
El cultivo de células animales (cultivo de células animales) consiste en eliminar tejidos relevantes del cuerpo animal, dispersado en células individuales (usando tripsina o colagenasa) y luego colocado en un medio adecuado para permitir que estas células crezcan y proliferen.
Introducción
1. Componentes del líquido de cultivo de células animales: Los nutrientes necesarios para el cultivo celular in vitro son básicamente los mismos que los del cuerpo, como azúcar, aminoácidos e inorgánicos. sales, factores promotores del crecimiento, oligoelementos, etc. Un medio que mezcla estrictamente las sustancias mencionadas anteriormente que necesitan las células según su tipo y cantidad requerida se denomina medio sintético. Debido a que todavía quedan algunos componentes en el ambiente interno de las células animales, es necesario agregar suero animal para proporcionar un ambiente similar al del cuerpo. Por tanto, cuando se utilizan medios de cultivo sintéticos, suele ser necesario añadir algunos ingredientes naturales como suero y plasma. [1]
2. Características del medio de cultivo de células animales: medio de cultivo líquido, que suele contener suero animal.
3. Condiciones para el cultivo de células animales:
① Ambiente estéril y no tóxico: esterilice el medio de cultivo y todos los recipientes de cultivo, generalmente agregue una cierta cantidad de antibióticos al medio de cultivo. , Prevenir la contaminación. Además, el medio de cultivo debe cambiarse periódicamente para eliminar los metabolitos y evitar que la acumulación de metabolitos celulares cause daño a las propias células.
② Nutrientes: sustancias inorgánicas (sales inorgánicas, oligoelementos, etc.) y sustancias orgánicas (azúcar, aminoácidos, factores promotores del crecimiento, etc.).
Suero y plasma , pero el suero y el plasma no son un nutriente.
③Temperatura y valor de pH (36,5±0,5℃℃, 7,2 ~ 7,4)
④Entorno de gas (gas mezclado de 95% aire y 5CO2)
Entre ellos , Se utiliza gas 5CO2 para mantener estable el valor del pH de la solución de cultivo.
3. Proceso básico
Obtener órganos y tejidos a partir de embriones de animales o animales jóvenes. El material se corta en pedazos, se trata (digiere) con tripsina (o colagenasa) para formar células individuales dispersas y las células tratadas se transfieren al medio de cultivo para preparar una suspensión celular de una determinada concentración. Las células dispersas en la suspensión se adherirán rápidamente a la pared de la botella y se convertirán en adherencias celulares. Cuando las células adherentes se dividen y crecen en contacto entre sí, las células dejarán de dividirse y proliferar, y se producirá la inhibición del contacto. En este punto, es necesario tripsinizar nuevamente las células inhibidas por contacto. Luego prepare una suspensión celular de una determinada concentración. Además, el cultivo primario es el cultivo de células y tejidos que se realiza inmediatamente después de su extracción del cuerpo. Cuando las células crecen y migran de animales y plantas, forman un halo de crecimiento y aumentan en número, los científicos realizan entonces un subcultivo, es decir, dividen las células cultivadas primarias en varias porciones y las inoculan en varias porciones de medio de cultivo para permitirles continuar. crecer y proliferar. Las células con propiedades especiales obtenidas de cultivos primarios o líneas celulares mediante determinados métodos de selección o purificación se denominan líneas celulares. Cuando se cultivan durante más de 50 generaciones, la mayoría de las células envejecen y mueren, pero algunas células han cambiado su material genético y tienen las características de paso ilimitado, es decir, se han vuelto cancerosas. Las células en este momento se llaman líneas celulares.