¿Cómo utilizar Haima XF para análisis?

Antes de comenzar el ensayo XF, se sembraron células en los pocillos de la microplaca de cultivo celular XF. En el análisis se utilizaron medios libres de bicarbonato. Se pueden agregar hasta cuatro medicamentos a los orificios de dosificación de la tarjeta de sonda analítica para una dosificación automática durante el análisis. Primero, la tarjeta de sonda analítica se coloca en el analizador para calibrar automáticamente el sensor óptico. Luego, inserte la placa de cultivo celular en el instrumento.

Por lo general, las tasas de OCR y ECAR de referencia (basal) se miden tres o cuatro veces antes de agregar inhibidores, agonistas, sustratos o compuestos a través del puerto de alimentación. OCR se informa en pmol/min y ECAR se informa en mph/min. Luego, los compuestos precargados en el puerto de dosificación de la placa de sonda se añaden neumáticamente de forma secuencial al medio de cultivo de cada pocillo. Después de una mezcla lenta, se midieron varias veces OCR y ECAR.

La medición de Seapocampal XF es un método de medición no destructivo, por lo que la tasa metabólica de la misma población celular se puede medir repetidamente cuando se añaden secuencialmente cuatro fármacos diferentes a cada pocillo.

El tiempo total de análisis es generalmente de 60 a 90 minutos. Una vez finalizado el análisis XF, se pueden realizar otros tipos de análisis biológicos, como la viabilidad celular, en la misma placa. Para mantener las funciones fisiológicas celulares normales, se utiliza un sistema de control de temperatura para mantener el entorno celular a 37 °C (u otra temperatura preestablecida).