¿Qué impacto tienen las mordazas especiales para ratas y las mordazas experimentales para ratas en los experimentos?
El establecimiento de un modelo animal de cistitis en ratas es útil para desarrollar diversos fármacos bioquímicos, hierbas medicinales chinas, tratar la cistitis y observar los posibles efectos adversos de estos fármacos. La reacción fue profunda. En este estudio, se estableció un modelo animal de cistitis infecciosa en ratas SD hembra mediante la implantación de cuerpos extraños humanos en la vejiga y la instilación de una solución de Escherichia coli. El informe sigue.
1 Datos y métodos
1.1 Materiales y grupo experimental: 63 ratas SD adultas hembras, peso individual (170) g, enjauladas, con libre acceso a agua divididas aleatoriamente en tres grupos; , 21 ratas en cada grupo: grupo experimental (una infusión de cuerpo extraño humano Escherichia coli implantada en la vejiga), grupo de infusión de Escherichia coli y grupo de infusión de solución salina normal. Al comienzo del experimento, no hubo diferencias significativas en el peso corporal de las ratas en cada grupo (P gt0,05). Se usó solución DH5α E. coli (108-9 UFC/100 ul) para la instilación en la vejiga.
1.2 Establecimiento del modelo animal: A las ratas del grupo experimental se les inyectó por vía intraperitoneal una solución de 2 piridinabarbital sódico (cloral 10 hidrato, la proporción es 0,3 ml/100 g) 0,3 ~ 0,52 m, y se examinó el orificio de la uretra. inyectado con etanol 70 y esterilizado con tintura de yodo, 1 diámetro. En el otro extremo del filamento, coloque un catéter de polietileno con una longitud de 6 a 8 mm y un diámetro de 3 mm, luego coloque el tubo de empuje, empuje el catéter hacia la vejiga a lo largo del alambre guía y déjelo, y sáquelo. el cable guía, vacíe la orina en la vejiga, inhale 0,5 ml de solución de E. coli en la vejiga a través del tubo de empuje y luego extraiga el tubo de empuje. Después de que el método de anestesia fuera el mismo, se insertaron tubos de inyección (tubos PE50) de diferentes longitudes en las vejigas de ratas en el grupo de infusión de E. coli y en el grupo de infusión de solución salina normal. Después de vaciar la orina, 0. Inyecte 5 ml de solución de Escherichia coli y 0,5 ml de solución salina fisiológica respectivamente, y repita el método tipo P una y tres veces. En las mismas condiciones, los animales se criaron libremente.
Indicadores de observación: Las ratas fueron sacrificadas después de 1,3 días, se abrió la cavidad abdominal, se sacó y abrió la vejiga y el grupo experimental observó si había algún residuo del catéter de cuerpo extraño y la pared interna del mismo. la vejiga se untó con un hisopo de algodón esterilizado para cultivo bacteriano y se cortó parte del tejido de la vejiga, se tiñó con hematoxilina-eosina (tinción HE), se realizaron secciones patológicas y se observó si la mucosa de la vejiga era intrínseca debajo del primer músculo.
1.4 Métodos estadísticos: Los datos se analizaron utilizando el software SPSS 17.0. Los datos de medición se expresaron como desviación estándar media (S del suelo), utilizando la prueba f. Los datos de conteo se expresaron como tasas, utilizando la prueba X, P.
p>Resultados
2.1 Comparación del peso corporal de las ratas y la tasa de mortalidad al final del modelado: Al final del experimento, no hubo muertes en cada grupo y sí No hubo diferencias significativas en el peso corporal de las ratas en cada grupo (P gt0,05). Un paciente del grupo experimental se quitó solo el catéter vesical.
2.2 Comparación entre cortes patológicos convencionales: A través de la observación del corte patológico, 18 casos en el grupo experimental desarrollaron cistitis infecciosa, con evidente edema y engrosamiento de la mucosa, infiltración de una gran cantidad de células inflamatorias mononucleares en la mucosa. y estroma y hemorroides acumuladas, los capilares estaban congestionados y sangraban; 6 casos en el grupo de infusión de E. coli tuvieron infiltración de células inflamatorias en la lámina propia de la mucosa de la vejiga, y el grado de la enfermedad fue menos grave que el del grupo experimental. En el grupo de solución salina normal, excepto en 3 casos con infiltración leve de células inflamatorias en la lámina propia, el resto del epitelio de la mucosa vesical era básicamente normal. Hubo 65438 ± 08 casos de cistitis en el grupo experimental, lo que fue significativamente diferente del grupo de infusión de E. coli (6 casos) y del grupo de infusión de solución salina normal (3 casos) (P <0,065438 ± 0,01).
2.3 Comparación de los resultados del cultivo de E. coli entre diferentes grupos: 16 casos de cultivo de E. coli en el grupo experimental fueron positivos en la vejiga en comparación con el grupo de infusión de E. coli (8 casos) y el grupo. grupo de infusión de solución salina normal (1 caso), la diferencia fue estadísticamente significativa (P <0,01).
3 Discusión
En la actualidad existen dos modelos animales de cistitis en rata: estéril e infecciosa. Los métodos más utilizados incluyen inyección intraperitoneal, instilación intravesical e intervención quirúrgica. La diferencia es que el fármaco actúa de forma global y local, y los modelos de cistitis establecidos por varios métodos tienen sus propias ventajas y desventajas.
Los modelos animales de cistitis estéril suelen producirse mediante inyección intraperitoneal. Sencillo de operar. La inyección intraperitoneal de solución de ciclofosfamida una vez cada tres días tiene una alta tasa de éxito en el modelado.
La tasa de éxito del modelado después de tres dosis fue del 90%, pero la condición de las ratas era mala y la tasa de mortalidad pudo alcanzar el 80% después de 5 días de modelado. Esto está relacionado con la toxicidad sistémica de la ciclofosfamida en las ratas. La inyección intraperitoneal es absorbida por el peritoneo y sus metabolitos actúan sobre la vejiga y varios órganos de todo el cuerpo, provocando sobreestimulación de la vejiga y otros daños a los órganos. Puede usarse para investigaciones de patología y etiología de la motilidad de la vejiga a corto plazo o in vitro.
La instilación intravesical puede establecer modelos de cistitis aséptica o infecciosa, y el proceso es ligeramente complicado. Los agentes de perfusión más utilizados incluyen ciclofosfamida, sulfato de protamina y Escherichia coli. Después de la anestesia, el fármaco se infundió desde la uretra de la rata hasta la vejiga. Durante el proceso de anestesia, el fármaco actúa directamente sobre el tejido de la vejiga, lo que permite que permanezca en la vejiga y mantenga una alta concentración, con poco impacto en otros órganos. Sin embargo, dado que las ratas se despiertan y orinan solas después de 2 a 3 horas de anestesia, la tasa de éxito del modelado es baja (alrededor de 50).
Generalmente existen dos tipos de modelos de cistitis infecciosa producidos por métodos quirúrgicos: ① Incisión en la cavidad abdominal para exponer la vejiga y mayor incisión de la vejiga o sutura del cuello de la vejiga según las necesidades experimentales. La tasa de éxito de este modelo es 100, pero la tasa de mortalidad de ratas con infección secundaria puede alcanzar 70 1R 5 a 7 días después de la cirugía ② El modelo de cistitis infecciosa se establece mediante intervención transuretral; HeeYoun Kim et al. de Corea del Sur informaron que el modelo de uretritis se estableció insertando una lámina de goma en la uretra y fijándola a la pared vaginal con suturas. El erudito japonés Yuichi Kurosaka y otros implantaron un tubo de polietileno en espiral de 2 cm de largo en la vejiga de ratas para establecer un modelo de cistitis infecciosa. Sin embargo, en el experimento se descubrió que la uretra de las ratas hembra mide 2 cm de largo, tiene un diámetro delgado y está curvada en espiral. Es muy difícil de implantar, es fácil dañar la uretra y es difícil de promover.
Este conjunto de experimentos está mejorado sobre la base de Kuro Osaka Yuichi. El método es el siguiente: se anestesian las ratas mediante inyección intraperitoneal de 0,3 ~ 0,05 mg/l. 5 ml de solución de pentobarbital sódico 2, empape una guía de metal blando de cabeza redonda con un diámetro de 65438 ± 0,4 mm en glicerina estéril, insértela en la vejiga de la rata a través de la uretra y cubra el otro extremo de la guía con una longitud de 6 ~ 8 mm , un catéter de polietileno con un diámetro de 2 mm, y luego coloque un tubo de empuje (diámetro 3 mm), empuje el catéter dentro de la vejiga a lo largo del alambre guía y déjelo, saque el alambre guía, vacíe la vejiga de orina e inhale 0,5 ml de la solución de coli de la jeringa y luego extraiga el tubo de empuje para completar el proceso de modelado.
En este experimento, a 21 ratas hembra se les implantaron catéteres urinarios humanos en la vejiga a través de la uretra. El procedimiento quirúrgico fue sencillo y ninguna rata murió después del modelado. Las ratas fueron sacrificadas 12 días después y el examen patológico reveló 18 casos de cistitis, con una tasa de incidencia de 85,7. En comparación con los 6 casos del grupo de infusión de E. coli y los 3 casos del grupo de infusión de solución salina normal, la diferencia fue estadísticamente significativa (P <0,01) no desarrolló cistitis debido a la descarga del catéter y los otros 2 casos tuvieron causas desconocidas; .
El mecanismo de la cistitis infecciosa se analiza de la siguiente manera: Escherichia coli inyectada a través de la uretra se adhiere a la superficie del catéter, formando lesiones infecciosas persistentes: placas. A medida que el catéter se mueve en la vejiga, irrita y daña la mucosa de la vejiga, lo que resulta en un modelo de cistitis infecciosa.
En este experimento, el proceso de implantación de un catéter humano es relativamente sencillo. Sólo se necesita una inyección de solución de E. coli para lograr una alta tasa de éxito. Este experimento proporciona un método experimental simple y factible para la producción a gran escala de modelos animales de cistitis infecciosa.