¿Qué es exactamente la inestabilidad de los microsatélites? ¿Cómo detectarlo?
Entonces, ¿qué es exactamente MSI/MMR? ¿A qué pacientes se les debe hacer la prueba? Este artículo intenta responder a esta pregunta.
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¿Qué es MSI/MMR?
Los microsatélites son secuencias de ADN con unidades simples que se repiten.
MSI (inestabilidad de microsatélites): "Inestabilidad de microsatélites"
La longitud de los microsatélites causada por la inserción o eliminación de unidades repetidas en tumores en comparación con el tejido normal Cualquier cambio en conducirá a la aparición de nuevos alelos microsatélites.
MMR (Reparación de Mismatch): "Reparación de Mismatch"
Los miembros del sistema incluyen MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2. Durante la replicación del ADN, ocasionalmente se producen pequeños desajustes en el ADN, y estas proteínas pueden reconocer estos errores, que luego cortan y sintetizan nuevas cadenas para su reparación.
El genoma completo tiene más de 100.000 regiones cortas repetidas en tándem llamadas "microsatélites", que son propensas a deslizamientos y errores durante el proceso de replicación y, por lo tanto, dependen en gran medida del sistema MMR para su reparación.
Cuando las cuatro proteínas anteriores son anormales, causará MMR deficiente (dMMR) y no se pueden encontrar ni modificar errores de replicación de microsatélites, lo que lleva a MSI difusa. Aunque la mayoría de los microsatélites están ubicados en regiones no codificantes, las mutaciones mal ubicadas pueden provocar mutaciones por desplazamiento del marco de lectura, lo que provoca anomalías en los genes relacionados con los tumores y, por lo tanto, induce cáncer.
MSI-high (MSI-H) juega un papel decisivo en unos 15 CRC. Además, MSI-H también puede causar tumores como cáncer de endometrio, cáncer de ovario y cáncer gástrico.
El DMMR es común en dos situaciones:
Las mutaciones embrionarias en el gen MMR se denominan síndrome de Lynch, y suele ocurrir en grupos genéticos de tumores malignos en una familia.
De esto podemos ver que dMMR es clínicamente equivalente a MSI-H, pero en algunos casos, dMMR y MSI-H no se pueden detectar al mismo tiempo.
Por ejemplo, la dMMR causada por mutaciones de MSH6 tiene una baja incidencia de MSI y puede no cumplir con los criterios de diagnóstico para los tumores MSI-H positivos que ocasionalmente provienen de proteínas de la vía MMR que no se han descubierto; hasta ahora. Por lo tanto, aunque los dos exámenes tienen una alta tasa de coincidencia y a menudo se confunden clínicamente, no son absolutamente equivalentes [4].
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Métodos de detección de MSI/MMR
En la actualidad, dos métodos se utilizan principalmente para detectar MSI/MMR en la práctica clínica: la inmunohistoquímica (IHC) detección de proteína anormal MMR o detección de MSI por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La secuenciación de próxima generación (NGS) es un nuevo método de detección que ha surgido en los últimos años.
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Células ciliadas internas
La tinción IHC es el método más utilizado para analizar la expresión de la proteína MMR. Detecta principalmente cuatro proteínas MMR conocidas (MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2), y la expresión positiva se localiza en el núcleo:
Si ≥ 1 de las cuatro proteínas no se expresa, el tumor puede ser MSI -H[5 ];
Las cuatro proteínas fueron positivas para pMMR (función de reparación completa de errores de coincidencia).
La IHC es barata y fácil de realizar, pero puede pasar por alto algunas anomalías causadas por otras proteínas MMR y es posible que todo el tumor se califique de manera inconsistente debido a la heterogeneidad del tumor.
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Reacción en cadena de la polimerasa
La PCR suele detectar BAT25, BAT26, D2S123, D5S346 y D17S250.
MSI superior a 30 (más de 2 de 5 loci) es MSI-H.
Menos de 30 (1 locus) se considera microsatélite de baja inestabilidad (MSI-L);
La ausencia de inestabilidad es la estabilidad de microsatélites (MSS) [6].
La PCR es el estándar de oro para la detección y puede evaluar de manera más objetiva la actividad del dMMR funcional, pero requiere altas condiciones de laboratorio y es relativamente costosa.
En general, la detección por IHC y PCR de MSI/MMR tiene buena sensibilidad y especificidad, y los dos métodos son muy consistentes (>95) [7].
三
Aspiración por sonda nasogástrica
En los últimos años, la secuenciación de la región objetivo (grupo NGS), la secuenciación del exoma completo (WES) y la secuenciación del genoma completo (WGS) La plataforma de secuenciación de segunda generación se ha aplicado a la detección de MSI.
NGS es adecuado para pacientes que requieren la detección simultánea de genes impulsores de tumores y/o mutaciones genéticas relacionadas con el tratamiento.
Las pautas de la NCCN recomiendan que las pruebas MSI/MMR solo se realicen en laboratorios clínicos certificados por CLIA.
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La importancia de MSI/MMR
MSI/MMR es de gran importancia para el diagnóstico, pronóstico y selección de opciones de tratamiento para diversos tumores.
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Detección del síndrome de Lynch
Como se mencionó anteriormente, el síndrome de Lynch es causado por mutaciones de la línea germinal MMR que hacen que las personas sean susceptibles al CCR, en el útero. Tumores malignos como cáncer de membrana. Para los pacientes que tienen antecedentes familiares de los tumores mencionados anteriormente o que padecen tumores de aparición temprana, es necesario hacerse pruebas de detección a sí mismos y a sus familias para detectar el síndrome de Lynch, lo que puede reducir significativamente la morbilidad y mortalidad de los tumores.
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Juicio de pronóstico
MSI puede reflejar el pronóstico. El pronóstico del cáncer colorrectal MSI depende del estadio. MSI-H es un buen indicador de pronóstico en el CCR en estadio II [8], mientras que solo 4 de CCR metastásico (mCRC) son MSI-H, pero el pronóstico de los pacientes con estos tumores no mejora, especialmente aquellos con mutaciones BRAFV600E [9 ].
Tres
Tratamiento guía
MSI puede guiar el tratamiento posterior. MSI-H tiene un buen pronóstico en el CCR en estadio II y es insensible al fluorouracilo [10]. Por lo tanto, las pautas de la NCCN y las pautas de CSCO para el diagnóstico y tratamiento del cáncer colorrectal recomiendan la prueba MSI/MMR para todos los cánceres colorrectales en etapa II y no recomiendan la quimioterapia adyuvante para pacientes con MSI-H.
Excepto la quimioterapia , MSI también puede reflejar la respuesta de los pacientes con CCRm a los fármacos dirigidos. El análisis molecular del estudio CALGB/SWAOG 80405 encontró que los pacientes con MSI-H se beneficiaron de bevacizumab en lugar de cetuximab, y el riesgo de muerte después de recibir bevacizumab fue un 87% menor que con cetuximab [11]. Por supuesto, se necesita más investigación para confirmar esto.
MMR/MSI también puede predecir la eficacia de la inmunoterapia. Los tumores MSI-H/dMMR tienen muchas mutaciones, son ampliamente inmunogénicos y responden bien a los inhibidores de PD-1/PD-L1.
En el estudio KEYNOTE-177, los pacientes con cáncer colorrectal avanzado con MSI-H/dMMR fueron aleatorizados a pembrolizumab o quimioterapia. La mediana de la supervivencia libre de enfermedad de los dos grupos fue de 65.438 ± 06,5 meses y 8,2 meses respectivamente, y la diferencia fue significativa [65.438 ± 05]. Con base en este resultado, el 29 de junio de este año, la FDA aprobó pabolizumab como indicación para el tratamiento de primera línea de pacientes con cáncer colorrectal avanzado MSI-H/dMMR.
En el estudio KEYNOTE-016, la ORR de los pacientes con CCR MSI-H/dMMR que recibieron pembrolizumab en segunda línea o líneas superiores fue de 36, y la ORR de otros tipos de tumores fue de 46. Por lo tanto, en 2017, la FDA aprobó el medicamento K para pacientes con CCR avanzado MSI-H/dMMR después de quimioterapia estándar y para pacientes con tumores sólidos metastásicos MSI-H/dMMR después del fracaso del tratamiento [12].
Otro fármaco inmunológico, navuzumab, también logró una tasa de respuesta de 32 en pacientes con CCRm MSI-H/dMMR multirresistente. Ese mismo año, también se aprobaron medicamentos de Clase O para el tratamiento progresivo de pacientes con CCR con MSI-H/dMMR utilizando fluorouracilo, oxaliplatino e irinotecán [13].
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La evidencia existente muestra que además de detectar el riesgo genético de los tumores y guiar el tratamiento de tumores como el CCR, las pruebas MSI/MMR también pueden identificar a todos los pacientes que puedan tener El estado de dMMR beneficia a los pacientes con cáncer, por lo que se está convirtiendo cada vez más en un biomarcador pantumoral digno de atención.
Planificación: GoEun
Referencia
13 Overman MJ et al. Nivolumab en cáncer colorrectal metastásico con deficiencia en la reparación de errores de coincidencia del ADN o alta inestabilidad de microsatélites Uso en pacientes (CheckMate) 142): un estudio de fase 2, multicéntrico y abierto. Oncología de Lancet. 2017;18(9):1182-1191
14 Pautas de diagnóstico y tratamiento del cáncer colorrectal de CSCO, edición 2020
15 ASCO 2020