Investigación sobre las aplicaciones de las células madre
Las células diferenciadas a menudo pierden por completo la capacidad de volver a diferenciarse debido a su alto grado de diferenciación. Dichas células eventualmente envejecerán y morirán. Sin embargo, durante el desarrollo de los animales, algunas células indiferenciadas permanecerán en el cuerpo y estas células son células madre. El envejecimiento de las células madre es un factor importante en el envejecimiento del cuerpo o del ser humano. Por lo tanto, trasplantar (o inyectar) células madre humanas es de gran importancia para prevenir el envejecimiento humano. Las células madre, también conocidas como células de origen y células pluripotentes, son un tipo de células con potencial de autorrenovación y diferenciación. Se puede decir que el cuerpo animal logra la renovación celular mediante la división de células madre, asegurando así el crecimiento y desarrollo continuo del cuerpo animal.
Las células madre se pueden dividir en dos tipos según su potencial de diferenciación: células madre totipotentes y células madre tisulares. El primero puede diferenciarse y desarrollarse hasta convertirse en un individuo animal completo, y el segundo es la célula origen de uno o más tejidos y órganos. Las células madre embrionarias humanas pueden convertirse en seres humanos completos, por lo que son células madre totipotentes.
Ya en el siglo XIX, los biólogos del desarrollo sabían que un óvulo se divide rápidamente después de la fertilización. Primero, un óvulo fertilizado se divide en dos células y luego continúa dividiéndose hasta que se divide en una masa celular de 16 a 32 células, llamada mórula. En este momento, si las células que forman la mórula se separan y se implantan en el útero de la madre, cada célula puede convertirse en un embrión completo. Este tipo de célula es una célula madre embrionaria, que es una célula madre totipotente. Las células madre de tejido se pueden obtener de la médula ósea, el cordón umbilical, la placenta y la grasa. Todo el mundo tiene unas células madre en su cuerpo que le acompañan durante toda su vida. Sin embargo, cuanto más envejece una persona, menos células madre tiene. Para compensar la falta de células madre, algunos científicos sugieren recolectar células madre de embriones o fetos, así como de otros animales. Realizar formación e investigación. Las células madre se utilizan ampliamente en muchos campos de la medicina. Los científicos han podido identificar, aislar, purificar, expandir y cultivar células madre embrionarias humanas in vitro, y utilizar dichas células madre como "semillas" para cultivar algunos tejidos y órganos humanos. La aplicación clínica generalizada de las células madre y sus tejidos y órganos derivados producirá una nueva tecnología médica, que consistirá en reconstruir tejidos y órganos normales o incluso jóvenes del cuerpo humano, permitiendo a las personas reemplazarse con células madre propias o de otras personas. Nuevos tejidos y órganos derivados de células madre. Tejidos y órganos enfermos o envejecidos. Si una persona mayor puede utilizar sus propias células madre conservadas o las de otros y sus tejidos y órganos derivados durante la infancia o la adolescencia, su esperanza de vida puede prolongarse significativamente. En 1999, la revista estadounidense "Science" clasificó la investigación con células madre entre los diez mayores logros científicos del mundo, por delante de la secuenciación del genoma humano y la tecnología de clonación.
El Hospital Universitario Nacional y el Hospital Central de Singapur curaron a un niño que padecía talasemia mayor debido a herencia familiar mediante un trasplante de células madre de sangre de cordón umbilical. Este es el primer caso en el mundo de trasplante de células madre de sangre de cordón umbilical no relacionadas. y el paciente se recuperó de la cirugía. Los médicos creen que el trasplante de células madre de la sangre del cordón umbilical no es complicado, al igual que realizar transfusiones de sangre a los pacientes. Debido a las propiedades inherentes de la sangre del cordón umbilical, el trasplante con células madre de sangre del cordón umbilical es más eficaz que el uso de médula ósea. El trasplante de células madre hematopoyéticas se ha convertido gradualmente en un medio importante para tratar la leucemia y diversas enfermedades, como la disfunción del sistema hematopoyético y del sistema inmunológico causada por la radioterapia y la quimioterapia de diversos tumores malignos. Los científicos predicen que se espera que la sustitución de las células nerviosas dañadas por células madre neurales permita a los pacientes paralizados con lesiones de la médula espinal volver a levantarse en un futuro próximo; se espera que los pacientes con ceguera, enfermedad de Parkinson, SIDA, enfermedad de Alzheimer, infarto de miocardio y diabetes; recibir trasplantes de células madre. Recuperarse con ayuda.
En comparación con las células madre embrionarias, las células madre adultas solo pueden desarrollarse en más de 20 tipos de tejidos y órganos, mientras que las células madre embrionarias pueden desarrollarse en casi todos los tejidos y órganos.
Sin embargo, si se extraen células madre de un embrión, éste muere. Por lo tanto, las cuestiones éticas se han convertido en uno de los mayores problemas en la investigación con células madre embrionarias. El gobierno de Estados Unidos se opone claramente a la destrucción de nuevos embriones para obtener células madre embrionarias, y la Cámara de Representantes de Estados Unidos incluso ha propuesto un proyecto de ley para prohibir completamente la investigación sobre clonación de células madre embrionarias. Algunos científicos americanos lo han criticado duramente. Creen que el uso de células madre en la investigación médica tiene un enorme potencial para aliviar el sufrimiento de los pacientes. Si se desperdicia una oportunidad tan buena, las consecuencias serán trágicas.
Las ciencias de la vida son una de las disciplinas de más rápido crecimiento en el siglo XX y se han convertido en el campo más llamativo de las ciencias naturales. En 1957, Donal Thomas, de la Universidad de Washington, descubrió que la disfunción hematopoyética podía tratarse mediante el trasplante de médula ósea normal a los pacientes. El descubrimiento de esta técnica le valió a Doña Thomas el Premio Nobel.
Esta tecnología fue rápidamente reconocida en todo el mundo y se convirtió en el principal medio para tratar la leucemia y otras enfermedades. El descubrimiento y la aplicación de la tecnología de trasplante de células madre hematopoyéticas ha brindado nuevas esperanzas a los seres humanos para superar las enfermedades.
1999 Petersen et al. descubrieron que las células madre del hígado y algunas células del hígado pueden derivar parcialmente de la médula ósea o estar relacionadas con ella. Verificaron esta idea a través de los siguientes experimentos: (1) trasplantaron la médula ósea de una rata macho a una rata hembra singénica que recibió dosis letales de irradiación y utilizaron sondas de ADN para detectar si había cromosoma Y masculino. ⑵ Se usaron como receptoras ratas Lewis que expresaban el antígeno L21-6 del antígeno de histocompatibilidad II, y se usaron ratas Brown-Norway que no expresaban L21-6 como donantes de trasplante de hígado completo para identificar células positivas para L21-6 de fuentes extrahepáticas. el hígado trasplantado. Descubrieron que las señales del cromosoma Y se detectaron en el hígado 13 días después del trasplante de médula ósea, cuando las células ovaladas comenzaron a diferenciarse en células hepáticas. Si las células ovaladas diferenciadas en hepatocitos fueran del hígado, ninguna célula del hígado expresaría señales positivas del cromosoma Y, pero los resultados mostraron que algunas células del hígado expresaban señales obvias del cromosoma Y, lo que indica que se derivaban de células de donantes de médula ósea. De manera similar, después del trasplante de hígado completo, se encontró que había células claramente positivas para L21-6 en el hígado trasplantado, lo que indica que algunas células ovaladas provenían del exterior del hígado, mientras que las del interior del hígado eran negativas para L21-6. Los experimentos han demostrado que la médula ósea contiene células madre que pueden diferenciarse en células hepáticas y que algunas células ovaladas pueden provenir de la médula ósea.
Las células prehepáticas de la médula ósea se pueden utilizar para el tratamiento de trasplante de insuficiencia hepática sin considerar la compatibilidad de los antígenos de histocompatibilidad, porque las células de la médula ósea del propio paciente se pueden utilizar para el trasplante. Las células de la médula ósea tienen las siguientes ventajas: ① Se pueden preparar células de la médula ósea ricas en células madre. ⑵ La promoción de la transducción genética puede aumentar los hepatocitos derivados de la médula ósea. ⑶ Los hepatocitos derivados de la médula ósea se pueden usar en hígados bioartificiales. Además, el HGF también se puede usar para tratar la cirrosis promoviendo la diferenciación de los prehepatocitos, incluidas las células madre de la médula ósea; El autotrasplante de células madre de médula ósea para tratar la lesión hepática proporcionará un nuevo enfoque para el tratamiento de las enfermedades hepáticas. El principio básico del tratamiento de enfermedades con células madre es reparar las células de los tejidos dañados, reemplazar las funciones de las células dañadas y estimular la función de regeneración de las propias células del cuerpo.
Enfermedades respiratorias
La inmunoterapia con células madre autólogas trata asma, bronquitis, enfisema, cor pulmonale, etc.
La inmunoterapia con células madre repara las células del tejido dañadas mediante la regulación de las citoquinas y luego inhibe la proliferación y la respuesta inmune de las células dañadas a través de interacciones célula-célula, desempeñando así el papel de reconstrucción inmune. Eliminar fundamentalmente la patogénesis del asma. Estos tratamientos son conceptualmente completamente diferentes de los tratamientos tradicionales, que se centran en tratar enfermedades respiratorias como el asma mediante la reparación de las células inmunitarias del cuerpo. El Hospital de la Amistad Jinghua de Beijing ha demostrado clínicamente mediante la medicina moderna que la inmunoterapia con células madre tiene un efecto terapéutico significativo sobre los síntomas del asma como la tos, la flema y la opresión en el pecho. Tiene las ventajas de un efecto curativo rápido, un tratamiento corto y dificultad en la recurrencia, superando las deficiencias anteriores de "tratamiento eficaz pero recurrencia después de la abstinencia del fármaco". Las células madre antiasma cultivadas especialmente en laboratorios de cultivo celular pueden mejorar la inmunidad de los pacientes, relajar los músculos lisos, promover el metabolismo en el cuerpo, reparar daños al sistema respiratorio, activar la regeneración de las células pulmonares, regular integralmente el bazo, los pulmones y los riñones, activar los pulmones. La regeneración celular y la reparación de la función de ventilación pulmonar, mejoran la función pulmonar, proporcionan suficiente suministro de oxígeno a los pulmones, reparan completamente la mucosa de los pulmones y las vías respiratorias y restauran la capacidad de descarga de aguas residuales de los cilios. Después de más de 100 casos clínicos, la tasa de curación puede alcanzar el 98%. Actualmente es el método de tratamiento más ideal y estándar para tratar el asma y la bronquitis. Posteriormente, se puede combinar con la medicina tradicional china para controlar la afección durante mucho tiempo.
Tratamiento de la enfermedad renal
El principio del trasplante de células madre en el tratamiento de la enfermedad renal: debido a que las células madre tienen una proliferación ilimitada y un potencial de diferenciación multidireccional, tienen las características de hematopoyéticas. apoyo, regulación inmune y autorreplicación. Puede servir como una célula "semilla" ideal para reparar daños en tejidos y órganos causados por lesiones. La investigación básica ha descubierto que las células madre pueden diferenciarse en células intrínsecas renales, células parenquimatosas renales, etc. Por lo tanto, el trasplante de células madre tiene un buen efecto de reparación y reconstrucción de la función renal.
Características y ventajas de las células madre en el tratamiento de la enfermedad renal Las células madre tienen una gran capacidad de proliferación y un potencial de diferenciación multidireccional, y pueden proliferar y diferenciarse para producir una gran cantidad de descendencia. Baja inmunogenicidad. Debido a que las células están en su estado original y no se pueden identificar fácilmente, no hay rechazo inmunológico ni problemas de coincidencia del tipo de sangre. El paso prolongado no cambia las características biológicas. La capacidad de diferenciarse en células intrínsecas renales, células musculares, hepatocitos, osteoblastos, condrocitos y otras células. Precisamente por estas propiedades y ventajas inmunológicas, las células madre tienen amplias perspectivas de aplicación clínica en el tratamiento de enfermedades renales.
Tratamiento de la parálisis cerebral
Poco a poco se va conociendo el trasplante de células madre para tratar la parálisis cerebral en niños. El trasplante de células madre para tratar la parálisis cerebral en niños se basa en el potencial de las células para autorrenovarse y diferenciarse en neuronas, astrocitos y oligodendrocitos. Las neuronas diferenciadas después del trasplante de células pueden reponer las neuronas faltantes y promover la función neuronal del tejido cerebral de los niños. La diferenciación y función celular, la restauración del crecimiento y desarrollo normales de los nervios craneales, la mejora de la disfunción cognitiva del cerebro y la prestación de más oportunidades para una mayor rehabilitación de los niños con parálisis cerebral siempre han sido los tratamientos más avanzados y eficaces. Y cuanto más joven es la edad, más fuerte es la capacidad compensatoria y mayor es la posibilidad de tratamiento. La intervención y el tratamiento tempranos son las únicas formas de evitar que los niños con parálisis cerebral queden discapacitados.
1. Autorrenovación: Las células madre pueden dividirse simétrica y asimétricamente, manteniendo así la estabilidad del conjunto de células madre.
Múltiple potencial de diferenciación: Las células madre pueden diferenciarse en neuronas, astrocitos y oligodendrocitos. Baja inmunogenicidad: las células madre son células primitivas indiferenciadas que no expresan antígenos de células maduras y no son reconocidas por el sistema inmunológico.
3. Buena fusión de tejidos: puede integrarse bien con el tejido nervioso del huésped y sobrevivir en el cuerpo del huésped durante mucho tiempo.
Tratar el autismo
Las células madre de la sangre del cordón umbilical y las células madre mesenquimales del cordón umbilical tienen la función de regulación inmune y mejora de la microcirculación cerebral. Las células madre pueden regular la función inmune del cuerpo, estimular la formación de nuevos vasos sanguíneos a través de su propia diferenciación y secreción de citoquinas y neuropéptidos, mejorar el estado isquémico e hipóxico del cerebro y activar y reparar las células nerviosas dañadas en el cerebro. El trasplante combinado de células mononucleares de la sangre del cordón umbilical y células madre mesenquimales del cordón umbilical puede ayudar a mejorar la comunicación lingüística y las capacidades de interacción social de los niños. La enfermedad hepática autoinmune es un tipo especial de enfermedad hepática crónica causada por una reacción autoinmune. En el pasado, la enfermedad hepática autoinmune se consideraba rara. Debido a la comprensión cada vez más profunda de este tipo de enfermedad y la introducción y mejora de métodos de examen inmunológico relevantes, el número de pacientes con enfermedad hepática autoinmune en nuestro país continúa aumentando. Las enfermedades hepáticas autoinmunes clínicas comunes incluyen hepatitis autoinmune, cirrosis biliar primaria y colangitis esclerosante primaria. Muchos pacientes con enfermedades hepáticas autoinmunes se acompañan de otras enfermedades autoinmunes como el síndrome de Sjogren y la artritis reumatoide.
El equipo de investigación dirigido por el director del Centro de Enfermedades Hepáticas del Hospital 304 de Beijing llevó a cabo una investigación en profundidad sobre la patogénesis, la patogénesis y las estrategias de inmunoterapia de la enfermedad hepática autoinmune. Las conferencias internacionales identificaron las enfermedades autoinmunes del hígado como enfermedades autoinmunes infecciosas no virales. La función reguladora inmunitaria del paciente es defectuosa, lo que hace que el cuerpo reaccione a sus propios antígenos de las células hepáticas. Los tratamientos tradicionales se centran principalmente en preparados inmunológicos y hormonas, pero la terapia inmunosupresora y la terapia de choque hormonal tienen ciertos efectos en la etapa inicial. En la etapa de cirrosis hepática, no solo el efecto terapéutico es insignificante, sino que las reacciones adversas de las hormonas también se agravan significativamente.
Al ser una enfermedad autoinmune con patogénesis similar, ¿se puede tratar con células madre? Después de comunicarse con el reumatólogo, el director Gong decidió utilizar el trasplante de células madre mesenquimales del cordón umbilical. El director Gong dijo que las células madre mesenquimales del cordón umbilical tienen efectos inmunomoduladores y pueden reparar e inmunorregular enfermedades autoinmunes para lograr el propósito de tratar enfermedades como el lupus eritematoso sistémico, el pénfigo y enfermedades similares que ha realizado el Departamento de Reumatología e Inmunología. Artritis reumatoide, esclerodermia, dermatomiositis, etc., con muy buenos resultados.
Perspectivas de aplicación de las células madre embrionarias, clonación animal y clonación terapéutica humana, aplicación en animales transgénicos y preparación de animales quiméricos.
La investigación sobre células madre embrionarias se enfrenta a un problema difícil. Cuando se cultivan células ES in vitro, es necesario seleccionar condiciones de cultivo apropiadas para equilibrar la contradicción entre proliferación y diferenciación. Las células altamente indiferenciadas pueden formar teratomas. La clonación y el trasplante de órganos todavía requieren avances tecnológicos.
Método de aislamiento
Del 65438 al 0998, dos grupos en Estados Unidos cultivaron células madre pluripotentes humanas:
James A. Thomson, Universidad de Wisconsin La investigación El equipo que dirige ha cultivado líneas de células madre a partir de tejido embrionario humano. Líneas celulares. Estas líneas celulares se analizaron en busca de marcadores de superficie celular y actividad enzimática, lo que confirmó que eran células madre totipotentes.
En la actualidad, las principales fuentes de células madre embrionarias son los grupos celulares del blastocisto y las células germinales primordiales de la cresta genital.
Métodos inmunológicos: Existen muchos marcadores especiales en la superficie de las células madre. Utilizando estos marcadores, las células madre se aíslan y purifican a partir de suspensiones de células individuales mediante un separador de células fluorescente.
Método de inmunocirugía: el principio básico de este método es utilizar la impermeabilidad del blastocele a los anticuerpos, eliminar las células del trofoblasto mediante el efecto letal tóxico de la combinación de anticuerpo y complemento, y retener el CIM para el cultivo.
Cultivo de tejidos: se extraen embriones de 4 a 6 días para su cultivo. El trofoblasto crece plano en el fondo del plato de cultivo, mientras que el CIM forma una estructura columnar ovalada. Esta estructura columnar se extrajo con una aguja de vidrio bajo un microscopio y se digirió para su paso.
Método microquirúrgico: el CIM se succiona directamente del blastocisto para su cultivo bajo un microscopio.
Debate ético
Aunque las células madre embrionarias humanas tienen un gran potencial para aplicaciones médicas, han surgido cuestiones éticas en torno a esta investigación. Estas cuestiones incluyen principalmente si la fuente de células madre embrionarias humanas es legal y ética, y si el potencial de aplicación causará problemas éticos y legales. ¿Pueden las células ES obtenidas de embriones humanos fertilizados in vitro convertirse en adultos en las condiciones adecuadas? ¿Qué pasa si las células madre provienen de una mujer embarazada que voluntariamente interrumpió su embarazo? ¿Es ético matar embriones humanos para obtener células ES? ¿Pueden las buenas intenciones justificar los malos medios? ¿Es apropiado utilizar células de embriones abortados espontáneamente o inesperadamente? Algunas personas creen que recolectar células madre embrionarias de embriones humanos no es ético porque la vida humana no se valora y los embriones humanos son una forma de vida. Por muy noble que sea el propósito, destruir embriones humanos es impensable. Algunos argumentan que esto es ético porque los científicos no están matando las células, sino simplemente cambiando su destino. A algunas personas les preocupa que, para obtener más líneas celulares, las empresas financien la fertilización in vitro para obtener blastocistos y el aborto artificial para obtener tejido fetal. Sugieren que se debería fomentar la investigación con células madre adultas y abandonar la investigación con células madre embrionarias.
Si las células madre embrionarias y las células germinales embrionarias se pueden comprar y vender como líneas celulares, ¿es ético que los científicos las utilicen? ¿Qué tipo de investigación es aceptable? ¿Se permitirá a los científicos cultivar tejidos y órganos individuales para estudiar procesos de desarrollo o crear trasplantes médicos? Ahora que se acepta que se pueden implantar genes humanos en células animales, ¿es ético implantar células madre embrionarias humanas en embriones de ganado para crear quimeras con las que obtener órganos humanos para trasplantes? ¿Es ético modificar los genes de las células es de embriones genéticamente defectuosos para que puedan seguir desarrollándose hasta convertirse en individuos sanos? Si las organizaciones populares alternativas fueran fácilmente accesibles, ¿viviría más gente de manera irresponsable y participaría en actividades de alto riesgo? Estas preguntas son difíciles de responder de manera simple, por lo que debemos examinar cuidadosamente las cuestiones éticas, sociales, legales, médicas, teológicas y morales involucradas en la investigación con células madre de embriones humanos.
Considerando que la ley estadounidense prohíbe el uso de fondos gubernamentales para financiar investigaciones con embriones humanos, el profesor Womars, director de los Institutos Nacionales de Salud (NIH), ha consultado al Departamento de Salud y Bienestar de Estados Unidos (DHHS), el departamento gubernamental a cargo de los NIH. El DHHS decidió en 1998 12: “La ley del Congreso de los EE. UU. que prohíbe la investigación con embriones humanos no se aplica a la investigación con células madre embrionarias porque, según las definiciones actuales, las células madre embrionarias no son iguales a los embriones” y, además, “las células madre embrionarias no pueden considerarse embriones humanos porque no tiene la capacidad de convertirse en un individuo por sí solo después de ser implantado en el útero". Por lo tanto, el DHHS puede financiar la investigación sobre células madre embrionarias pluripotentes. En cuanto a las células germinales embrionarias humanas, debido a que las células germinales embrionarias provienen de un feto inactivo, la adquisición y el uso de dichas células cumplen con los requisitos de la ley federal para la investigación de tejido fetal y, por lo tanto, también pueden recibir financiación del DHHS. La gente tuvo reacciones encontradas ante la decisión.
73 científicos estadounidenses famosos (incluidos 67 premios Nobel) firmaron inmediatamente una carta para expresar su apoyo, diciendo que esta decisión es digna de reconocimiento y prospectiva (Science, 1999, Volumen 283: 1849). Es único en la historia de la ciencia que un determinado tipo de investigación haya atraído la atención de tantos premios Nobel. Esto también refleja la importancia y la dificultad de la investigación con células madre embrionarias. Varios grupos académicos influyentes en los Estados Unidos, como la Federación Estadounidense de Sociedades de Biología Experimental, la Sociedad Estadounidense de Biología Celular y la Sociedad Estadounidense de Biología del Desarrollo, también apoyaron la decisión de que los fondos federales podrían financiar la investigación con células madre de embriones humanos. El senador demócrata Tom. Harkin dijo que la decisión allanaría el camino para el descubrimiento científico de nuevos tratamientos para muchas enfermedades y enfatizó que los gobiernos no deberían prohibir la investigación médica. El director de los NIH, Womars, dijo que el futuro de este trabajo de investigación será brillante, pero recordó a los investigadores que todavía es ilegal utilizar fondos federales para obtener nuevas líneas de células madre embrionarias, pero que los científicos pueden utilizar fondos federales para estudiar a Thomson y Gilha especialmente obtenidas en humanos. Líneas de células madre embrionarias.
Sin embargo, algunas personas en el Congreso, iglesias y grupos de derechos humanos se han opuesto a las regulaciones del DHHS sobre la investigación con células madre embrionarias. El católico Doyle Flinger acusó esta disposición de violar gravemente el espíritu de la ley: "Utilizarán fondos privados para destruir embriones y utilizarán fondos federales para realizar experimentos con embriones. En febrero de 1999, 70 miembros de la Cámara de Representantes escribieron una carta a la Asamblea General". El Ministro de Salud y Bienestar de China pidió que se derogue la disposición, diciendo que "viola la letra y el espíritu de la ley federal del gobierno de Estados Unidos que prohíbe la financiación de investigaciones experimentales que destruyen embriones humanos". Judy Brown, presidenta del grupo de derechos humanos Americans for Life, protestó contra el uso de células madre porque provienen de embriones que pueden convertirse en adultos y deberían estar protegidos por la ley estadounidense. El congresista Jay Dickey se opone firmemente a esta regulación e incluso quiere llevar al DHHS a los tribunales. Sostuvo que la ley no permite que se utilicen fondos federales para la investigación con células madre embrionarias y que no eran necesarios cambios. Destacó que "la ciencia debe servir a las personas, no la ciencia para las personas". Los activistas antiaborto están pidiendo al Congreso que intervenga y bloquee dichas investigaciones. Tras escuchar exhaustivamente opiniones de todas partes, los NIH finalmente publicaron los "Principios rectores para la investigación con células madre embrionarias" el 5 de junio + 5 de junio + febrero de 1999 bajo la dirección de NBAC.
Como se puede observar en la tabla, es ilegal obtener nuevas líneas de células madre embrionarias a partir de embriones humanos utilizando el método Thomson, pero se permite la investigación sobre líneas celulares obtenidas a partir de embriones humanos. La obtención, utilización y estudio de líneas celulares derivadas de tejido fetal mediante el método Gearhart es relativamente tolerante. Aunque las regulaciones siguen siendo onerosas, abren la puerta a la investigación con células madre de embriones humanos.
Cabe mencionar que el premio Nobel de 2012, Shinya Yamanaka, permitió regenerar células completamente diferenciadas, como las células de la piel, sin obtener células madre a partir de células embrionarias humanas. La transformación en células madre se hace posible y se convierte en la detección morfológica. de IPS: tamaño pequeño, núcleo grande, relación nucléolo-citoplasma alta, uno o más nucléolos prominentes, eucromatina, menos citoplasma y estructura simple. Cultivo in vitro: las células se disponen muy juntas para formar colonias. La tinción con fosfatasa alcalina mostró que las células eran de color marrón rojizo y los fibroblastos circundantes eran de color amarillo claro. Los límites entre los clones celulares y sus alrededores son obvios, y los límites entre los clones celulares son confusos y diversos, principalmente en forma de islas o nidos. Detección de actividad de fosfatasa alcalina - tinción azul oscuro-púrpura Experimento de diferenciación in vivo: Experimento de diferenciación in vitro de teratoma: cuerpos embrioides simples quísticos o cuerpos embrioides, tipos comunes de células mezcladas entre sí Análisis de cariotipo: cariotipo normal diploide Detección de actividad OCT: marcadores de genes pluripotentes. Detección de productos de expresión génica OCT mediante antisuero OCT y método de inmunofluorescencia indirecta