Red de conocimientos sobre prescripción popular - Conocimientos de oftalmología - ¿Cómo hacer cultivo bacteriano? El cultivo bacteriano es una tecnología que utiliza métodos artificiales para cultivar y reproducir bacterias. La mayoría de las bacterias se pueden cultivar artificialmente inoculándolas en medios de cultivo para permitirles crecer y reproducirse. Las bacterias cultivadas se utilizan para investigación, identificación y aplicaciones. \x0d\Pasos de cultivo específicos: \x0d\ Tome el método de cultivo de bacterias fotosintéticas como ejemplo. El método de cultivo de bacterias fotosintéticas se divide en cuatro pasos: desinfección de recipientes y herramientas, preparación de medios de cultivo, inoculación y manejo del cultivo. \x0d\ (1) Aquí se omite la referencia a la desinfección de contenedores y herramientas. \x0d\(2) Preparación del medio de cultivo\x0d\ 1. Agua de cultivo \ x0d \ Si las bacterias fotosintéticas que se van a cultivar son especies de agua dulce, se puede usar agua destilada para cultivar las bacterias y agua del grifo esterilizada (o agua de pozo) para preparar el cultivo de producción. Si las bacterias fotosintéticas cultivadas son especies de agua de mar, el medio de cultivo debe prepararse con agua de mar natural. Tenga en cuenta que al agregar fósforo al agua de mar, no se puede usar dihidrógenofosfato de potasio, de lo contrario se producirá una gran cantidad de precipitación. \x0d\2. El medio de cultivo esterilizado para cultivo bacteriano debe esterilizarse junto con el recipiente de cultivo en un autoclave. Para cultivos productivos a pequeña escala, la solución de cultivo preparada se puede hervir y esterilizar en una olla de aluminio común o en un matraz Erlenmeyer grande. En la cría productiva a gran escala, el agua filtrada por arena de sedimentación se desinfecta con polvo blanqueador (o líquido blanqueador) antes de su uso. \x0d\3. Preparación del medio Seleccione una formulación de medio adecuada según los requisitos nutricionales del cultivar. Según la fórmula del medio de cultivo, pesar las sustancias requeridas, disolverlas una por una y mezclarlas para formar el medio de cultivo. También puedes hacer primero el licor madre y añadir cierta cantidad en proporción al usarlo. \x0d\ (3) La inoculación debe realizarse inmediatamente después de preparar el medio de inoculación. La cantidad de bacterias fotosintéticas en el cultivo productivo es relativamente alta, generalmente del 20 % al 50 %. Es decir, aunque la proporción entre la solución madre y la solución de cultivo recién preparada es de 1: 4 ~ 1: 1, no puede ser inferior a 20. %, Especialmente es un cultivo en microaire y el volumen de inóculo debe ser mayor; de lo contrario, será difícil para las bacterias fotosintéticas aprovechar la ventaja absoluta en el medio de cultivo y afectar el cultivo. \x0d\ (4) Manejo del cultivo En el proceso de cultivo de bacterias fotosintéticas, el manejo incluye tres aspectos: manejo diario, operación y detección, observación e inspección de las condiciones de crecimiento, y análisis y procesamiento de problemas. \x0d\Manejo y pruebas diarias:\x0d\(1) Agitación y aireación: durante el proceso de cultivo de bacterias fotosintéticas, la aireación o agitación es esencial para ayudar a que las bacterias fotosintéticas precipitadas floten para obtener luz y mantener un buen crecimiento de las células bacterianas. El cultivo anaeróbico a pequeña escala generalmente utiliza la agitación manual del recipiente de cultivo para hacer que las células bacterianas floten, al menos 3 veces al día en ciertos intervalos. En cultivos anaeróbicos a gran escala, el agua se hace circular lentamente utilizando un agitador mecánico o una pequeña bomba para mantener las bacterias en suspensión. La microaerocultura utiliza aireación para ayudar a que las bacterias floten. Debido a que aumenta el contenido de oxígeno disuelto en la solución de cultivo, se inhibe la proliferación de bacterias fotosintéticas y disminuye el rendimiento, por lo que la cantidad de aireación debe controlarse estrictamente. Generalmente se utiliza aireación intermitente regular. El volumen de aireación se controla entre 1 ~ 1,5 l/(L·h) y el contenido de oxígeno disuelto se mantiene por debajo de 1×10-6. \x0d\(2) Ajustar la luz: el cultivo de bacterias fotosintéticas requiere luz continua. En el trabajo de gestión diario, la iluminación debe ajustarse con frecuencia según sea necesario. Se puede cultivar con luz solar durante el día, se necesita iluminación con fuente de luz artificial durante la noche o se puede cultivar completamente con fuente de luz artificial. Las lámparas de yodo tungsteno o las bombillas incandescentes se utilizan habitualmente como fuentes de luz artificial. Diferentes métodos de cultivo requieren diferentes intensidades de luz. Generalmente, la intensidad de la luz para el cultivo debe controlarse entre 2000 y 5000 LX. Si las bacterias fotosintéticas crecen rápidamente y la densidad celular es alta, la intensidad de la luz debe aumentarse a 5000 ~ 10000 LX. La intensidad de la luz se puede ajustar ajustando la distancia entre el recipiente de cultivo y la fuente de luz o utilizando una caja de alimentación controlable. \x0d\(3) Ajustar la temperatura: las bacterias fotosintéticas pueden adaptarse a un amplio rango de temperatura. Un barco puede crecer y reproducirse normalmente dentro del rango de 23 ~ 39 ℃ sin ajustar la temperatura. El cultivo a temperatura normal también se puede ajustar para controlar la temperatura dentro del rango más adecuado para el crecimiento y reproducción de las bacterias fotosintéticas, permitiendo que las bacterias fotosintéticas crezcan mejor. \x0d \(4) Medición y ajuste del valor del pH: durante el proceso de cultivo de bacterias fotosintéticas, se debe prestar atención a los cambios en el valor del pH. Debido a la proliferación de bacterias fotosintéticas, el valor del pH de la solución bacteriana aumenta, lo que significa que las bacterias fotosintéticas se encuentran en la fase de crecimiento exponencial. Sin embargo, cuando el valor del pH excede el rango óptimo para el crecimiento o incluso el rango adaptativo, el crecimiento de las bacterias fotosintéticas alcanza un pico y luego disminuye. Si el valor del pH de la solución bacteriana se puede ajustar a tiempo para mantener el valor del pH dentro del rango óptimo, las bacterias fotosintéticas pueden continuar creciendo y reproduciéndose.
¿Cómo hacer cultivo bacteriano? El cultivo bacteriano es una tecnología que utiliza métodos artificiales para cultivar y reproducir bacterias. La mayoría de las bacterias se pueden cultivar artificialmente inoculándolas en medios de cultivo para permitirles crecer y reproducirse. Las bacterias cultivadas se utilizan para investigación, identificación y aplicaciones. \x0d\Pasos de cultivo específicos: \x0d\ Tome el método de cultivo de bacterias fotosintéticas como ejemplo. El método de cultivo de bacterias fotosintéticas se divide en cuatro pasos: desinfección de recipientes y herramientas, preparación de medios de cultivo, inoculación y manejo del cultivo. \x0d\ (1) Aquí se omite la referencia a la desinfección de contenedores y herramientas. \x0d\(2) Preparación del medio de cultivo\x0d\ 1. Agua de cultivo \ x0d \ Si las bacterias fotosintéticas que se van a cultivar son especies de agua dulce, se puede usar agua destilada para cultivar las bacterias y agua del grifo esterilizada (o agua de pozo) para preparar el cultivo de producción. Si las bacterias fotosintéticas cultivadas son especies de agua de mar, el medio de cultivo debe prepararse con agua de mar natural. Tenga en cuenta que al agregar fósforo al agua de mar, no se puede usar dihidrógenofosfato de potasio, de lo contrario se producirá una gran cantidad de precipitación. \x0d\2. El medio de cultivo esterilizado para cultivo bacteriano debe esterilizarse junto con el recipiente de cultivo en un autoclave. Para cultivos productivos a pequeña escala, la solución de cultivo preparada se puede hervir y esterilizar en una olla de aluminio común o en un matraz Erlenmeyer grande. En la cría productiva a gran escala, el agua filtrada por arena de sedimentación se desinfecta con polvo blanqueador (o líquido blanqueador) antes de su uso. \x0d\3. Preparación del medio Seleccione una formulación de medio adecuada según los requisitos nutricionales del cultivar. Según la fórmula del medio de cultivo, pesar las sustancias requeridas, disolverlas una por una y mezclarlas para formar el medio de cultivo. También puedes hacer primero el licor madre y añadir cierta cantidad en proporción al usarlo. \x0d\ (3) La inoculación debe realizarse inmediatamente después de preparar el medio de inoculación. La cantidad de bacterias fotosintéticas en el cultivo productivo es relativamente alta, generalmente del 20 % al 50 %. Es decir, aunque la proporción entre la solución madre y la solución de cultivo recién preparada es de 1: 4 ~ 1: 1, no puede ser inferior a 20. %, Especialmente es un cultivo en microaire y el volumen de inóculo debe ser mayor; de lo contrario, será difícil para las bacterias fotosintéticas aprovechar la ventaja absoluta en el medio de cultivo y afectar el cultivo. \x0d\ (4) Manejo del cultivo En el proceso de cultivo de bacterias fotosintéticas, el manejo incluye tres aspectos: manejo diario, operación y detección, observación e inspección de las condiciones de crecimiento, y análisis y procesamiento de problemas. \x0d\Manejo y pruebas diarias:\x0d\(1) Agitación y aireación: durante el proceso de cultivo de bacterias fotosintéticas, la aireación o agitación es esencial para ayudar a que las bacterias fotosintéticas precipitadas floten para obtener luz y mantener un buen crecimiento de las células bacterianas. El cultivo anaeróbico a pequeña escala generalmente utiliza la agitación manual del recipiente de cultivo para hacer que las células bacterianas floten, al menos 3 veces al día en ciertos intervalos. En cultivos anaeróbicos a gran escala, el agua se hace circular lentamente utilizando un agitador mecánico o una pequeña bomba para mantener las bacterias en suspensión. La microaerocultura utiliza aireación para ayudar a que las bacterias floten. Debido a que aumenta el contenido de oxígeno disuelto en la solución de cultivo, se inhibe la proliferación de bacterias fotosintéticas y disminuye el rendimiento, por lo que la cantidad de aireación debe controlarse estrictamente. Generalmente se utiliza aireación intermitente regular. El volumen de aireación se controla entre 1 ~ 1,5 l/(L·h) y el contenido de oxígeno disuelto se mantiene por debajo de 1×10-6. \x0d\(2) Ajustar la luz: el cultivo de bacterias fotosintéticas requiere luz continua. En el trabajo de gestión diario, la iluminación debe ajustarse con frecuencia según sea necesario. Se puede cultivar con luz solar durante el día, se necesita iluminación con fuente de luz artificial durante la noche o se puede cultivar completamente con fuente de luz artificial. Las lámparas de yodo tungsteno o las bombillas incandescentes se utilizan habitualmente como fuentes de luz artificial. Diferentes métodos de cultivo requieren diferentes intensidades de luz. Generalmente, la intensidad de la luz para el cultivo debe controlarse entre 2000 y 5000 LX. Si las bacterias fotosintéticas crecen rápidamente y la densidad celular es alta, la intensidad de la luz debe aumentarse a 5000 ~ 10000 LX. La intensidad de la luz se puede ajustar ajustando la distancia entre el recipiente de cultivo y la fuente de luz o utilizando una caja de alimentación controlable. \x0d\(3) Ajustar la temperatura: las bacterias fotosintéticas pueden adaptarse a un amplio rango de temperatura. Un barco puede crecer y reproducirse normalmente dentro del rango de 23 ~ 39 ℃ sin ajustar la temperatura. El cultivo a temperatura normal también se puede ajustar para controlar la temperatura dentro del rango más adecuado para el crecimiento y reproducción de las bacterias fotosintéticas, permitiendo que las bacterias fotosintéticas crezcan mejor. \x0d \(4) Medición y ajuste del valor del pH: durante el proceso de cultivo de bacterias fotosintéticas, se debe prestar atención a los cambios en el valor del pH. Debido a la proliferación de bacterias fotosintéticas, el valor del pH de la solución bacteriana aumenta, lo que significa que las bacterias fotosintéticas se encuentran en la fase de crecimiento exponencial. Sin embargo, cuando el valor del pH excede el rango óptimo para el crecimiento o incluso el rango adaptativo, el crecimiento de las bacterias fotosintéticas alcanza un pico y luego disminuye. Si el valor del pH de la solución bacteriana se puede ajustar a tiempo para mantener el valor del pH dentro del rango óptimo, las bacterias fotosintéticas pueden continuar creciendo y reproduciéndose.
Para extender la fase de crecimiento exponencial de las bacterias fotosintéticas, mejorar la tasa de utilización del medio de cultivo y el rendimiento por unidad de masa de agua, la medición y ajuste del valor del pH es muy importante. La adición de ácido se utiliza para reducir el valor del pH de la solución bacteriana. Están disponibles el ácido acético, el ácido láctico y el ácido clorhídrico, siendo el ácido acético el más utilizado. En el manejo diario, el valor del pH de la solución bacteriana debe medirse todos los días o cada dos días. Cuando el valor del pH supera el rango óptimo, debe ajustarse agregando ácido. Si el valor del pH no se mide y ajusta durante el proceso de cultivo, cuando el crecimiento de las bacterias fotosintéticas alcanza una cierta densidad, el valor del pH también aumentará por encima de 9 y se obstaculizará el crecimiento de las bacterias. Este es el momento de cosechar o ampliar la cultura. Si no se ajusta el valor del pH durante el proceso de cultivo, el rendimiento final será muy bajo.