¿Cuáles son los factores que afectan la tecnología de inmunohistoquímica enzimática?
1. Fijación
El fijador tisular habitualmente utilizado es el formaldehído. Las muestras deben fijarse a tiempo para facilitar la conservación de los antígenos y evitar la difusión de los antígenos en las células del tejido y su pérdida. pérdida de actividad inmune, ¡pero el mejor momento para solucionarlo es! "horas, generalmente no más de" # horas, porque cuanto mayor sea el tiempo de fijación, la sensibilidad de los marcadores inmunohistoquímicos de determinados tejidos y células se reducirá significativamente. La razón es que se formarán enlaces aldehído o grupos carboximetilo durante la fijación del formaldehído y se bloquearán algunos determinantes antigénicos. También entrecruzará proteínas con claras de huevo y también puede bloquear determinantes antigénicos, generando muchos antígenos como $NUMBER, y cuando la respuesta inmune se debilita significativamente o incluso desaparece, el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas no puede obtener resultados correctos. Por lo tanto, para obtener buenos resultados de tinción, algunos antígenos deben repararse con anticipación para una mayor exposición.
2. Reparación del antígeno
Después de la fijación con formaldehído, la deshidratación y la inmersión en cera, los componentes del antígeno en el tejido externo han sido destruidos o sellados. Para restaurar la antigenicidad del tejido y mejorar la sensibilidad del tejido a los anticuerpos, generalmente es necesario reparar el antígeno. Algunas personas utilizan la digestión con proteasa, el tratamiento con microondas o el tratamiento con olla a presión para exponer y desarrollar los componentes del antígeno bloqueado. Utilizamos alta temperatura y alta presión para procesar las rodajas. Bajo ácido débil, alta temperatura y alta presión,
bloquea la visualización del antígeno, mejora la tasa de detección positiva y la intensidad positiva, reduce la coloración del fondo y hace que los resultados positivos sean claramente identificables. Por supuesto, el tiempo de alta presión utilizado por diferentes tejidos y antígenos requiere la selección de tampones de recuperación de antígenos adecuados y sus valores óptimos. tiene un gran impacto en los resultados. ¡Nuestro departamento generalmente usa +/+! 012 3 (El tampón de citrato de sodio (.'-/+) se utiliza como solución de recuperación de antígeno. ¡El tiempo de alta temperatura y alta presión es! +045 tiene el mejor efecto de desarrollo del color y casi no se pela. La práctica ha demostrado que el alto- La tecnología de procesamiento de presión es muy eficaz en inmunohistoquímica. Tiene las ventajas de economía, simplicidad, alta tasa positiva, posicionamiento preciso y tinción clara, y es fácil de promover y aplicar. Almacenamiento y uso correctos. de anticuerpos
Los anticuerpos son tejidos inmunes. Los reactivos y materiales más básicos en química se pueden dividir en anticuerpos primarios y anticuerpos secundarios. Dado que los anticuerpos están hechos de proteínas, el almacenamiento o uso inadecuado no solo causará desperdicio, sino que también causará desperdicio. También dan lugar a resultados falsos negativos cuando los reactivos se deterioran. Los kits 6 y 7 deben almacenarse en un refrigerador de baja temperatura y se debe sacar uno cuando se usen. Para los anticuerpos que no se pueden usar al mismo tiempo, se pueden almacenar en. en el refrigerador número 8, no en el congelador, porque la temperatura allí es inferior a +8. El anticuerpo se congelará y se disolverá rápidamente cuando se use nuevamente, después de varias congelaciones y descongelaciones, el título de anticuerpos disminuirá bruscamente y se volverá ineficaz. que están próximos a su caducidad o caducidad, conviene aumentarlos.
La concentración de trabajo también puede producir resultados correctos y evitar pérdidas y desperdicios.