Introducción a los complejos inmunes circulantes
Contenido 1 Pinyin 2 Referencia en inglés 3 Descripción general 4 Examen médico de los complejos inmunes circulantes 4.1 Nombre del examen 4.2 Clasificación 4.3 Principio de determinación de los complejos inmunes circulantes 4.4 Reactivos 4.5 Métodos de operación 4.6 Valores normales 4.7 Importancia clínica de resultados de laboratorio 4.8 Nota 4.9 Enfermedades relacionadas 1 Pinyin
xún huán miǎn yì fù hé wù 2 Referencia en inglés
inmunoplex circulante, CIC 3 Descripción general
complejo inmunológico IC) o complejo antígeno-anticuerpo es el producto de la combinación de un antígeno y su correspondiente anticuerpo. En circunstancias normales, los antígenos libres del cuerpo se combinan con los anticuerpos correspondientes para formar CI, que pueden ser eliminados por el sistema de defensa del cuerpo. Sin embargo, en algunos casos, el CI formado es beneficioso para el cuerpo. en el cuerpo no se puede eliminar si se elimina a tiempo, puede depositarse localmente, activar el complemento y, con la participación de plaquetas, neutrófilos, etc., provocar una serie de reacciones en cadena que provocan daño tisular y síntomas clínicos, lo cual es llamada enfermedad por complejos inmunes (ICD).
El inmunoplex circulante (CIC) es un tipo de IC soluble de tamaño mediano (8,8~19S) que se forma cuando hay un ligero exceso de antígeno. No puede ser eliminado por los fagocitos ni pasar a través del mismo. El IC se excreta. Los poros de filtración glomerular y pueden permanecer libres en la sangre y otros fluidos corporales durante mucho tiempo. Cuando aumenta la permeabilidad de la pared de los vasos sanguíneos, dichos CI pueden depositarse en la pared capilar en ciertas partes del torrente sanguíneo o incrustarse en el riñón. glomérulo. En la membrana basal bulbar, la activación del complemento conduce a la aparición de ICD. Examinar la presencia de CI en los tejidos o en la circulación es útil para el diagnóstico de determinadas enfermedades, la investigación sobre la patogénesis, la estimación del pronóstico, la observación de la actividad de la enfermedad y el juicio del efecto terapéutico, etc.
Los métodos de detección de CIC se pueden dividir a grandes rasgos en dos categorías: métodos específicos de antígeno y métodos no específicos de antígeno. El primero determina selectivamente la CI que contiene un antígeno específico distinguiendo entre antígeno libre y antígeno unido al anticuerpo. Estos métodos se pueden aplicar en enfermedades en las que se conoce la respuesta inmunopatológica provocada por un determinado antígeno. El método no específico del antígeno no tiene en cuenta la naturaleza del antígeno IC formado y lo detecta basándose en los cambios en las propiedades físicas y biológicas de la molécula de inmunoglobulina después de unirse al antígeno. Sin embargo, las pruebas utilizadas actualmente se ven afectadas por factores como el tipo y subclase de Ig en el complejo, el tamaño del complejo, la proporción de antígeno a anticuerpo y la capacidad de fijar el complemento. Su aplicación en laboratorios clínicos suele ser muy grande. limitado, por lo que muchos laboratorios utilizan varios métodos experimentales diferentes para la detección.
4 Examen médico de complejos inmunes circulantes 4.1 Nombre del examen
Complejos inmunes circulantes 4.2 Clasificación
Examen inmunológico gt Inmunoensayo celular 4.3 Complejos inmunes circulantes Principio de determinación de sustancias
(1) Prueba anticomplemento: si CIC está presente en el suero, puede unirse al C1 endógeno. Calentar el suero analizado a 56°C durante 30 minutos puede destruir el C1 unido y liberar el sitio de unión del complemento. Cuando se añaden suero de cobaya (C1 exógeno) y un sistema indicador (glóbulos rojos de oveja sensibilizados), el CIC puede combinarse con C1 exógeno para inhibir la reacción hemolítica de los glóbulos rojos de oveja sensibilizados. El resultado es que se utilizan 50 células de hemólisis como punto final. Si la actividad hemolítica del tubo de ensayo es más de 1 tubo menor que la del tubo de control, la prueba anticomplemento es positiva, lo que indica la presencia de moléculas de CIC.
(2) Prueba de precipitación con polietilenglicol (PEG): CIC tiene un gran peso molecular y la conformación del antígeno y el anticuerpo que se unen entre sí cambia y es fácil de precipitar del líquido. fase por PEG de baja concentración.
El PEG también puede inhibir la disociación de CIC, promover una mayor polimerización de CIC en agregados más grandes y precipitar. Finalmente, la presencia y el contenido de CIC se pueden medir mediante turbidimetría de transmisión o turbidimetría de dispersión.
(3) Prueba ELISA tipo sándwich SPA: la proteína A (SPA) de Staphylococcus aureus puede unirse al segmento Fc de IgG en complejos inmunes. El suero que se va a analizar se precipita con PEG de baja concentración y luego se agrega al portador de fase sólida recubierto con SPA y luego se hace reaccionar con el SPA marcado con enzima para detectar si hay CIC en la muestra de prueba.
(4) Prueba de unión de colágeno: la conglutina es un componente proteico normal en el suero bovino y puede unirse al fragmento de activación C3 del complemento C3bi en CIC. Cúbralo sobre un portador de fase sólida, únalo al CIC en el suero que se va a analizar, agregue IgG antihumana marcada con enzima y use la solución de sustrato para desarrollar el color, y se puede medir el contenido de CIC. 4.4 Reactivos
Métodos de prueba de isoanticomplemento, unión de colágeno y precipitación de PEG. 4.5 Métodos de operación
Métodos de prueba de isoanticomplemento, unión de colágeno y precipitación de PEG. 4.6 Valor normal
Suero: CIC es negativo (test anticomplemento, test de unión de colágeno). Suero: 4,3±2,0, ≥8,3 se considera positivo para inmunocomplejos (prueba de precipitación con PEG). Suero: <28,4 mg/L (prueba ELISA sándwich SPA). 4.7 Importancia clínica de los resultados de laboratorio
La detección de complejos inmunes es de gran importancia para determinar la actividad de la enfermedad, el efecto del tratamiento, el pronóstico y explorar las causas de la enfermedad. Ciertas enfermedades autoinmunes (como el lupus eritematoso sistémico, la artritis reumatoide, la poliarteritis nudosa, etc.), la nefritis membranoproliferativa, la nefritis post-estreptocócica aguda, las enfermedades infecciosas (como la hepatitis B crónica, la lepra, el dengue, la malaria, etc.) y los tumores. pacientes, se pueden detectar complejos inmunes circulantes en el suero. 4.8 Notas
(1) Prueba anticomplemento: el suero mixto de cobaya se utiliza generalmente después de una dilución de 1:100. Cuando se extrae sangre después de 2 semanas de almacenamiento a -30°C o en verano, la actividad del complemento de los cobayos disminuirá, por lo que se puede titular antes de su uso. Seleccione una dilución de complemento de 0,1 ml que pueda provocar un 50 % de hemólisis; el suero de cobaya no debe congelarse ni descongelarse repetidamente, y cualquier parte no utilizada que se haya descongelado debe desecharse; las muestras de suero que se van a analizar deben estar frescas y libres de bacterias; contaminación y hemólisis. Si no se analiza el mismo día, se debe congelar a -30°C; este método sólo puede detectar CIC que se une al complemento, y cualquier factor anticomplemento puede interferir con los resultados de la prueba.
(2) Prueba de precipitación de PEG: la lipoproteína de baja densidad puede provocar un aumento de la turbidez, por lo que la sangre debe extraerse con el estómago vacío; hipergammaglobulinemia o alto contenido de lípidos en sangre, así como congelación y descongelación repetidas de la sangre. muestras de suero, es fácil causar falsos positivos; este método es rápido y simple, pero tiene poca especificidad y solo es adecuado para detectar muestras de suero.
(3) Prueba ELISA tipo sándwich SPA: la IgG humana polimerizada térmicamente debe almacenarse en alícuotas a -20 °C y no debe congelarse ni descongelarse repetidamente, de lo contrario se despolimerizará fácilmente. Agregar SPA a una concentración final de 5,0 g/l puede estabilizar la IgG humana polimerizada térmicamente; la concentración de PEG afecta la cantidad de precipitación de CIC y debe controlarse estrictamente.
(4) Prueba de unión al gluten: las muestras que no se pueden analizar a tiempo deben almacenarse a -30 °C para evitar la congelación y descongelación repetidas y se deben configurar controles negativos y positivos para cada experimento; las muestras a analizar deben calibrarse de acuerdo con la siguiente fórmula Absorbancia del suero (incluido el suero y las muestras clínicas que investigan el valor de absorbancia promedio del suero humano normal), absorbancia corregida del suero a analizar = absorbancia del suero a analizar/absorbancia de Suero de referencia positivo, este método sólo puede detectar complejos inmunes IgG macromoleculares que se unen al complemento. 4.9 Enfermedades relacionadas