Detección de residuos de cloranfenicol en carne de cerdo

(1) Preparación de la muestra

1 Pese 10 g de la muestra de carne de cerdo que se va a inspeccionar y colóquela en un tubo de centrífuga de 50 ml con tapón;

2. Añadir de 2 a 3 g de sulfato de sodio anhidro y 30 ml de acetato de etilo, homogeneizar durante 1 minuto, centrifugar a 5000 rpm durante 5 minutos y absorber la capa superior de acetato de etilo en una botella de concentración.

3. Añadir 15 ml del residuo repetidamente acetato de etilo.

3. Repetir la extracción del residuo con 15 ml de acetato de etilo y combinar los extractos.

4. Rotar el extracto en un baño de agua a 50 ℃ (o secar con secador; nitrógeno);

5. Repetir la extracción del residuo con 15 mL de acetato de etilo y combinar los extractos

6. acetato y combinar los extractos;

7, el residuo se extrajo repetidamente con 15 ml de acetato de etilo y los extractos se combinaron. Agregue 1 ml de solución de metanol y cloruro de sodio (20 metanol: 4 g/100 ml de solución de cloruro de sodio = 20:80, v/v) y 4 ml de n-hexano, agite bien, transfiera a un tubo de centrífuga tapado de 10 ml y centrifugue. Agregue 1 ml de metanol al tubo, lave el frasco de concentración con 1 ml de solución de metanol-cloruro de sodio y combine las soluciones de lavado en Vortex durante 0,5 min, centrifugue a 3000 rpm durante 3 min; , y luego retirar con una pipeta n-hexano, agregar 4 mL de n-hexano y repetir la operación anterior;

6. Agregar 4 mL de acetato de etilo para extraer la fase acuosa dos veces y luego concentrar. el extracto de la solución de acetato de etilo hasta sequedad a 50oC (o soplando nitrógeno bajo atmósfera). Concentrar hasta sequedad (o secar con nitrógeno) y disolver el residuo en 10 ml de agua.

Nota: Para conocer pasos específicos, consulte GB/T 9695.32-2009 "Determinación del contenido de cloranfenicol en carne y productos cárnicos"

(2) Purificación por extracción en fase sólida

1 Activación: Tome la columna de extracción en fase sólida H2P 60 mg/3 ml (número de pedido: SSH2P063), actívela con 2 ml de metanol y 2 ml de agua.

2. Muestreo: Utilizar 1mL de solución de extracción al tomar el muestreo

3. Elución: 1ml de 20 metanol

4. Elución: 2ml de metanol

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5. Concentración: soplado de nitrógeno, disolución de fase móvil de 1 ml, filtración de membrana de 0,45 μm

(C) Detección de fase líquida

Sefarosa BR-C18, 120?

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Se usó una columna cromatográfica SAGE BR-C18, 120 µm, 5 µm, 4,6 x 250 mm (número de pedido: 102185-4625) para la detección. La fase móvil era 50 metanol. , el caudal fue de 1 ml/min y la longitud de onda de detección fue de 278 nm, el volumen de inyección es de 20 μl.

La columna de extracción en fase sólida H2P puede eliminar la mayoría de las impurezas de la muestra, evitar que las impurezas interfieran con los resultados experimentales y extender la vida útil de la columna de extracción. Alarga la vida útil de la columna de extracción. Las mediciones de recuperación mostraron que la recuperación de cloranfenicol se mantuvo en un nivel alto de 95-105.