¿A qué aspectos se debe prestar atención en la preparación de fármacos bioquímicos?
1. Métodos de preparación de medicamentos bioquímicos Los productos farmacéuticos bioquímicos son el proceso de extracción y purificación de sustancias biológicamente activas de animales, plantas o microorganismos mediante diversos métodos de separación bioquímica sin destruir sus estructuras y funciones. Seis etapas de los productos farmacéuticos bioquímicos: 1. Selección y pretratamiento de materias primas; 2. Disrupción de tejidos y células; 3. Extracción de ingredientes activos de células alteradas para preparar productos crudos; 4. Utilizar diversas tecnologías bioquímicas para refinar las sustancias objetivo a partir de productos crudos; . Secado y almacenamiento; 6. Preparación. Dependiendo de los materiales seleccionados, las etapas anteriores se pueden seleccionar y utilizar de manera flexible en diferentes formulaciones de fármacos bioquímicos.
Existen cinco métodos principales para la separación y purificación de fármacos bioquímicos: 1. Separación basada en diferentes tamaños y formas moleculares, como filtración en gel, ultrafiltración por diálisis, centrifugación en gradiente de densidad, etc. 2. Separar según las propiedades cargadas de las moléculas, como cromatografía de intercambio iónico, electroforesis y enfoque isoeléctrico; 3. Separar según la polaridad y solubilidad de las moléculas, como precipitación en el punto isoeléctrico, sal, precipitación con disolventes orgánicos y distribución en contracorriente. Métodos, etc.; 4. Separación basada en la especificidad del ligando, como la cromatografía de afinidad; 5. Basado en las diferentes propiedades de adsorción de sustancias, como la adsorción selectiva y la cromatografía de adsorción.
2. Puntos clave de la investigación sobre el control de calidad de los medicamentos bioquímicos. Los medicamentos bioquímicos son complejos y diversos, por lo que aquí solo analizamos los medicamentos bioquímicos de múltiples componentes extraídos de órganos.
(1) Fármacos bioquímicos de órganos Los fármacos bioquímicos de órganos se refieren a fármacos bioquímicos derivados de animales, es decir, de tejidos, órganos, glándulas, fluidos corporales, secreciones, placenta, pelo, piel, cuernos y uñas de animales. Medicamentos extraídos de. La mayoría de los ingredientes activos de los fármacos bioquímicos no están claros y la mayoría son sustancias poliméricas. En la actualidad, la mayoría de ellos no pueden producirse mediante métodos sintéticos y algunas sustancias requieren la sinergia de otras sustancias al mismo tiempo para ejercer mejores funciones fisiológicas. Fármacos bioquímicos de órganos principales 1.
Los tejidos y órganos proceden del cerebro: colesterol, cefalina, lecitina, sustancia P y diversas encefalinas, etc. Tálamo: factor liberador de la hormona del crecimiento, factor inhibidor de la hormona del crecimiento, etc. Catéteres cardíacos y arteriales: Citocromo C, Coenzima Q10, Coenzima A, etc. Hígado: ácido ribonucleico, inyección de hígado, extracto de hígado, hidrolizado de hígado, coenzima A, etc. Pulmón: aprotinina, etc. Bazo: inyección de bazo, extracto de hígado y bazo, inyección de desoxinucleotidida sódica; estómago: gastrina y pepsina, etc. Intestino y mucosa intestinal: sustancia P, heparina y otras heparinas (heparina de bajo peso molecular); Ojo: extracto de todo el ojo, como extracto oftálmico y extracto oftálmico Hueso: sulfato de condroitina, sulfato de condroitina A, inyección de péptido óseo, peptona, etc. . Piel: gelatina, gelatina de piel de burro, etc. 2.
Pituitaria adenogénica: hormona adrenocorticotrópica, hormona folículo estimulante, hormona luteinizante, hormona del crecimiento, prolactina, oxitocina, vasopresina, hormona de la hipófisis anterior: insulina, glucagón, tripsina, quimotripsina, quimotripsina cristalizada, tripsina; , inhibidores de proteasa, calicreína (angiotensina), elastasa (elastasa), colagenasa, heparina pancreática, etc. Glándulas salivales: Glándulas salivales, etc. Glándula submandibular: calicreína, etc. Glándula parótida: hormonas de la glándula parótida, etc. Tiroides: calcitonina, tiroxina, extracto desecado de tiroides: timosina (timosina), timopoyetina I y II, factores humorales del timo, etc. Glándula suprarrenal: hormonas suprarrenales, etc. Glándula paratiroides: hormona paratiroidea; ovario: relaxina y factor relajante uterino: hialuronidasa, etc. Glándula pineal: hormonas de la glándula pineal, etc. 3.
Los líquidos y secreciones corporales proceden de la sangre: histidina, lisina, arginina y proteínas hidrolizadas; bezoar artificial, ácido deshidrocólico, ácido quenodesoxicólico, colato de sodio, biliflavina, etc. Orina: uroquinasa y hormona coriónica; 4. Placenta de otras fuentes: extracto de placenta, globulina placentaria y albúmina: cistina, cisteína, lisina y ácido espermático, etc. Pezuñas con cuernos: cuernos de antílope, sustitutos del cuerno de rinoceronte, huevos de fulonina: lisozima, etc.
(2) Debido al complejo origen de los animales (incluidas las especies animales, el estado de salud, el entorno de reproducción, la edad, el momento de la recolección, el método de recolección, etc.), los puntos clave en la investigación y el control de calidad de los órganos medicamentos bioquímicos. ), el proceso de extracción y purificación es sencillo, y el contenido y proporción de sus principios activos variará mucho.
Por lo tanto, la calidad de los productos no puede controlarse completamente mediante estándares de calidad independientes. Es necesario controlar las fuentes y los procesos. La combinación de estándares de calidad puede controlar eficazmente la calidad del producto y garantizar la aplicación clínica. En otras palabras, el objetivo del control de calidad de los medicamentos bioquímicos es garantizar que la calidad del producto sea coherente con la calidad de las muestras de investigación clínica. Esta coherencia de la calidad no puede reflejarse plenamente únicamente en los indicadores de control de calidad de los estándares de calidad (a diferencia de los medicamentos químicos). Debe lograrse mediante un control estricto de las fuentes y los procesos, que es similar a los productos biológicos. 1. El proceso general de investigación de fármacos bioquímicos de órganos debe determinar primero la fuente (materias primas) de los fármacos bioquímicos de órganos, incluidas las especies animales, el estado de salud, el entorno de alimentación (alimentación cerrada), la edad, el tiempo de recolección, el método de recolección, etc., y formular estándares de calidad para las materias primas. Luego estudiar los métodos apropiados de extracción y purificación, incluida la inactivación y verificación de virus de origen animal, determinar el proceso de producción de la solución original (o producto semiacabado) estudiar los ingredientes principales, el contenido, la proporción de los ingredientes principales y otros ingredientes en el producto; solución original (o producto semiacabado), formular estándares de calidad para soluciones en bruto (o productos semiacabados). Se estudió el proceso de prescripción del preparado y finalmente se realizó la preparación (producto terminado) para aplicación clínica y se realizó la investigación de calidad correspondiente para formular el estándar de calidad del producto terminado. 2. Proceso de inactivación y verificación de virus de origen animal Debido a los diferentes tipos de animales de los que se derivan los tejidos, los tipos de virus naturalmente transportados o infectados también serán diferentes. Además, las materias primas animales actuales son poco controlables y los virus de origen animal deben inactivarse o eliminarse, y es necesario verificar el proceso de inactivación o eliminación. Para inactivar o eliminar virus de origen animal, primero debe comprender la situación viral del animal seleccionado, centrándose en los virus que han demostrado ser infecciosos y patógenos para los humanos (como el virus de la fiebre aftosa en ganado vacuno y porcino, y virus de la encefalitis japonesa en cerdos), etc.) y virus que se ha sugerido que están relacionados con enfermedades humanas (como el virus de la diarrea bovina y el virus de la hepatitis E porcina, etc.), y comprender las características biológicas y la sensibilidad del virus. factores físicos y químicos. Verificar el grado de contaminación viral y la carga de materias primas para proporcionar datos de investigación para adoptar las tecnologías de procesamiento correspondientes. Si se sabe que la materia prima está contaminada con un virus que infecta o causa enfermedades en humanos, o si se detectan retrovirus endógenos y otros virus contaminantes específicos de especies, la materia prima debe desecharse y eliminarse adecuadamente. (1) Los métodos de detección de virus incluyen principalmente métodos in vitro (utilizando líneas celulares sensibles de múltiples especies diferentes para la detección de cultivos * * *, muestreo en momentos de cultivo apropiados para detectar virus infecciosos y transmisión ciega durante al menos 3 generaciones). ) y métodos in vivo (cuando no existe un método de detección in vitro confiable, se pueden usar animales apropiados para pruebas de vacunación a ciegas y métodos sensibles para detectar virus infecciosos), pruebas de producción de anticuerpos en animales (para pruebas in vivo e in vitro adecuadas). métodos de prueba, para los virus detectados, se pueden usar diferentes animales para observar la producción de anticuerpos de virus específicos. Las pruebas de producción de anticuerpos son especialmente útiles para detectar virus de roedores) y otros métodos (microscopía electrónica, ELISA, PCR, método RT, etc.). . ). Los métodos de detección de virus deben diseñarse y seleccionarse después de un análisis exhaustivo basado en las características de la variedad y las condiciones de producción específicas. Por lo general, deben tener una base e información de respaldo razonables. (2) Proceso de inactivación/eliminación de virus Intente diseñar un plan de prueba y investigación de inactivación/eliminación de virus razonable relacionado con el proceso de producción real, especialmente los pasos específicos del proceso de producción. El proceso de simulación debe ser estrictamente coherente con el proceso real en términos de parámetros de prueba y condiciones de control. En otras palabras, el proceso de producción simulado debe representar el proceso de producción real en la medida de lo posible; si hay desviaciones inevitables, se debe dar una explicación razonable del posible impacto de los resultados de la prueba; Para conocer los métodos técnicos de inactivación/eliminación de virus, consulte los "Métodos técnicos y pautas de verificación para la eliminación/inactivación de virus de productos sanguíneos". (3) Validación del proceso de inactivación/eliminación de virus El propósito de la validación del proceso de inactivación/eliminación de virus es obtener suficientes datos de investigación experimental para demostrar que el proceso de producción contiene pasos efectivos del proceso de inactivación/eliminación de virus. El principio básico es que el proceso de producción debe incluir pasos eficaces de inactivación/eliminación del virus. Si el proceso de producción no tiene un efecto eficaz de inactivación/eliminación de virus, se deben agregar pasos específicos de inactivación/eliminación de virus al proceso de producción de acuerdo con los diferentes productos. Los fármacos bioquímicos para órganos deben incluir dos pasos de proceso eficaces que puedan complementarse entre sí en términos de mecanismo. Después de años de práctica, generalmente se acepta que se agrega una cantidad conocida de virus vivo indicador a la solución madre simulada o al producto intermedio en diferentes etapas de producción, y luego se determina el grado de reducción en el título de virus después del tratamiento con pasos de proceso o métodos técnicos específicos. se mide cuantitativamente para evaluar el efecto del proceso sobre la inactivación/eliminación del virus.
La validación universal utiliza un virus indicador universal y los resultados de la prueba se utilizan para ilustrar las capacidades de inactivación/eliminación de los pasos del proceso para virus universales y pueden representar capacidades de eliminación similares para virus similares dentro de un rango apropiado. La validación específica utiliza virus específicos (virus contaminados; encontrado) o un virus similar a un virus específico como alternativa. Los resultados de las pruebas se utilizan para ilustrar la capacidad de inactivación/eliminación de los pasos del proceso para virus específicos. El proceso de producción debe tener suficientes capacidades de eliminación de virus. Debido a las diferencias entre virus específicos y virus generales en términos de sensibilidad a factores físicos y químicos, características estructurales del virus, tamaño de partículas de virus, etc., los virus indicadores generales no son comparables ni consistentes con virus específicos o virus similares a virus específicos, y son difíciles de reemplazar entre sí. (4) Selección de virus indicadores Principios para la selección de virus indicadores: los virus indicadores deben ser representativos y razonables y pueden usarse para evaluar correctamente la seguridad viral del proceso de producción. Se deben considerar varios aspectos al seleccionar virus indicadores: 1) Con base en la fuente del virus contaminante durante el proceso de producción, el vínculo y el grado de contaminación, la naturaleza y características patógenas y otros factores prácticos que deben considerarse, combinados con la viabilidad del virus indicador que se puede utilizar para evaluar el efecto de verificación de adquisición y las condiciones de prueba de cultivo relacionadas, intente seleccionar varios virus indicadores con representatividad general y significado de simulación específico. 2) Intentar seleccionar virus que puedan cultivarse hasta obtener títulos elevados y que existan métodos de detección fiables y eficaces. 3) Se deben considerar los riesgos para la salud que el virus indicado puede causar a los operadores y se deben tomar las medidas de protección necesarias, se debe tener en cuenta la seguridad del virus en sí y se deben seguir las normas de gestión nacionales pertinentes; Es un virus contagioso muy virulento y no se puede utilizar. 4) Al seleccionar virus indicadores universales y/o virus indicadores específicos, se deben incluir al menos virus de ARN y ADN, virus con envoltura lipídica y virus sin envoltura lipídica. 5) Centrarse en los virus que pueden aparecer en materias primas de tejidos biológicos u homogeneizados de materias primas de tejidos, y considerar de manera integral las características del proceso de producción, la contaminación viral y la tecnología de inactivación/eliminación. (5) Para evaluar los pasos efectivos del proceso para la inactivación/eliminación de virus, primero debe tener datos experimentales para la verificación de la inactivación/eliminación de virus para confirmar que un paso específico puede inactivar/eliminar virus de manera efectiva durante el proceso de producción. Se debe realizar la evaluación necesaria para cada paso potencialmente efectivo para determinar si tiene el efecto exacto de inactivación/eliminación del virus y determinar los pasos efectivos del proceso. Después de los pasos efectivos del proceso de inactivación/eliminación de virus, no se realizarán operaciones que puedan introducir nueva contaminación (como agregar sustancias de origen animal, etc.) (a menos que se demuestre que la operación elimina completamente la posibilidad de contaminación por virus) para prevenir estrictamente recontaminación. Generalmente, los pasos de procesamiento que reducen los títulos de infección viral en más de 4 registros se consideran pasos efectivos del proceso de inactivación/eliminación de virus. Sin embargo, si el límite mínimo de detección del método de detección es 103TCID50, incluso si el título inicial del virus es 106TCID50, no es apropiado contar el virus como un paso de proceso efectivo específico, porque el título real del virus después del tratamiento puede ser mayor que 102TCID50, por lo que, según el método de detección, la sensibilidad solo puede expresarse como no detectada. La reducción de la infección viral se puede evaluar desde dos aspectos: la eliminación de partículas virales o la inactivación del virus. Si es posible, se debe aclarar si la reducción de los títulos virales resulta de la eliminación física o de la inactivación directa. (6) Seguimiento y observación de la seguridad de los virus Debido a la influencia de diversos factores, como los métodos de detección, el tiempo de seguimiento, la sensibilidad, etc., es difícil descartar por completo la infección humana por virus potencialmente contaminantes (como virus con largos períodos de incubación). , virus de patogénesis lenta y virus específicos de infecciones (riesgo de detección de virus con indicadores desconocidos, etc.). ) Incluso en estudios preclínicos, las pruebas con animales e incluso con primates han dado resultados negativos. Debido a que en diferentes etapas, las personas tienen diferente profundidad y comprensión de los peligros de los virus, y los materiales de apoyo y los enfoques de la investigación experimental que se pueden proporcionar también son diferentes, ya sea durante la investigación clínica o después de la comercialización, es necesario; realizar investigaciones sobre origen animal Realizar observaciones de seguimiento sobre la seguridad viral de los medicamentos bioquímicos. Métodos específicos: preste atención a los virus que pueden estar contaminados y establezca indicadores de evaluación para la infección por virus. Incluyendo virus que se sabe que son patógenos para los animales a partir de materias primas, virus que pueden infectar tejidos y células humanos en pruebas in vivo e in vitro, especialmente virus con infecciones latentes que se han descubierto mediante ensayos clínicos como serología o aislamiento por cultivo; y Se verificaron las características de nuevos virus e infecciones no descubiertas durante la producción. El método de detección utilizado debe poder identificar la diferencia entre virus humanos y animales y verificarse para garantizar la sensibilidad y especificidad del método. En el plan de investigación clínica, debe haber un plan de implementación para la detección de virus patógenos sospechosos, que incluya: detección sistemática de infecciones agudas, infecciones crónicas, infecciones clínicas latentes y seroconversión, así como una comparación de los resultados de las pruebas antes y después de la medicación.
Mediante pruebas activas y pasivas, se puede detectar oportunamente a pacientes asintomáticos con infección latente para evitar una posible propagación a gran escala entre la población. Debido a la existencia de muchos factores desconocidos e inciertos, la determinación final de la patogenicidad del virus contaminado requiere una gran cantidad de investigación básica y verificación clínica. Por lo tanto, los pacientes que utilizan productos de origen animal deben ser conscientes de que, aunque los productos seguros contra virus han reducido el riesgo de infección viral a un nivel muy bajo, este riesgo no se puede eliminar por completo. 3. Puntos de control de calidad de los medicamentos bioquímicos de órganos Según el proceso general de investigación de medicamentos bioquímicos de órganos, los puntos de control de calidad se dividen principalmente en los tres aspectos siguientes: 1) Fuentes fijas (materias primas), incluidas las especies animales, el estado de salud y ambiente de alimentación (cría cerrada), edad, tiempo de recolección, método de recolección, etc. y formuló estándares de calidad para las materias primas. 2) Estudiar métodos apropiados de extracción y purificación, incluida la inactivación y verificación de virus de origen animal, determinar el proceso de producción de la solución original (o producto semiacabado), estudiar los ingredientes principales, el contenido, la proporción de los ingredientes principales y el control de otros; ingredientes en la solución original (o producto semiacabado) Métodos para establecer estándares de calidad para soluciones crudas (o productos semiacabados). 3) Estudiar el proceso de prescripción de preparados, preparar preparados (productos terminados) para aplicación clínica, realizar las investigaciones de calidad correspondientes y formular estándares de calidad para productos terminados. En resumen, el núcleo del control de calidad de los fármacos bioquímicos de órganos es el control total del proceso (desde el origen hasta el producto final, el control del proceso y el control de los estándares de calidad).
3. Cuestiones a las que se debe prestar atención en la investigación de fármacos bioquímicos. Debido a las complejas fuentes de medicamentos bioquímicos, la calidad de los productos obtenidos a partir de diferentes materias primas y procesos de producción variará, incluido el contenido y la proporción de los ingredientes principales, así como el tipo y/o contenido de otros ingredientes, y estas diferencias son a menudo no se refleja en los estándares de calidad. Estrictamente hablando, los fármacos bioquímicos no los replican. Por tanto, a la hora de estudiar fármacos bioquímicos, primero debemos considerar el problema basado en la "no imitación". 1. Preste atención al control de materias primas y procesos, y controle integralmente la calidad del producto en combinación con los estándares de calidad. 2. No cambie fácilmente las materias primas, los procesos de producción y las formas de dosificación (especialmente las inyecciones de agua, las inyecciones de polvo y los grandes intercambios de infusiones). El período de validez del producto se ampliará después de su comercialización. Si se requieren los cambios anteriores, se debe llevar a cabo el trabajo de investigación correspondiente sobre el impacto de los cambios en la calidad, seguridad y eficacia del producto (este impacto se refiere a la calidad real del producto, no solo a los indicadores de control de calidad en los estándares de calidad). , incluyendo investigación farmacéutica, farmacología, toxicología e investigación clínica. 3. Dado que la calidad de los medicamentos bioquímicos depende del control total del proceso, ¿deben venderse libremente sus soluciones crudas (o productos semiacabados)? De lo contrario, no sólo aumentará la posibilidad de recontaminación en el circuito de circulación, sino también. ser perjudicial para todo el proceso de control de calidad del producto terminado. 4. El proceso de inactivación y verificación de virus de origen animal es un tema que requiere investigación y discusión conjunta por parte de investigadores, revisores y expertos en campos relacionados. Debido a que la comprensión de la gente sobre los virus de origen animal y la relación entre los virus de origen animal y las enfermedades infecciosas humanas se está profundizando gradualmente, la inactivación de virus y la verificación de procesos seguirán volviéndose más científicas y razonables a medida que aumente la comprensión de la gente. Lo anterior presenta brevemente los métodos generales de preparación, el flujo del proceso y la investigación de la calidad de los medicamentos bioquímicos, así como las cuestiones a las que se debe prestar atención durante el proceso de investigación. El propósito es permitir a los desarrolladores comprender mejor las características y los puntos de control de calidad de los medicamentos bioquímicos, prestar atención al control de fuentes y de procesos en la investigación de medicamentos bioquímicos y establecer el concepto de control completo del proceso de los medicamentos bioquímicos. Especialmente después del lanzamiento del producto, si se realizan algunos cambios en la aplicación complementaria, se deben realizar los estudios farmacéuticos, farmacológicos, toxicológicos y clínicos correspondientes para estudiar el impacto de estos cambios en la calidad, seguridad y eficacia del producto.