Introducción a la Fasciola fasciculata
2 tipos de películas de referencia en inglés Fasciolia [WS/T 566-2017 Diagnóstico de fascioliasis]
3. Fasciolia es un género de Fascioliaceae y es un orden recurrente. Los gusanos adultos parasitan principalmente en los conductos biliares de rumiantes como el ganado vacuno y ovino, y también pueden parasitar en los conductos biliares de los humanos. llamados por los veterinarios) son los principales parásitos de los humanos [1].
La morfología de Fasciola hepatica es 4.1. hermafrodita Cubierto de espinas. El extremo frontal del gusano tiene un cono de cabeza prominente en forma de cono, y la parte posterior del cono de la cabeza se ensancha o forma un hombro. La ventosa oral está ubicada en la superficie ventral del extremo frontal del. cono de la cabeza y la ventosa abdominal se encuentra detrás de la base del cono de la cabeza. El sistema digestivo consta de la faringe, el esófago y dos ramas intestinales. Las ramas intestinales a ambos lados se extienden hasta el extremo posterior del cuerpo del gusano. ramificarse hacia afuera y hacia afuera Hay dos testículos en el sistema reproductivo, que están muy ramificados y dispuestos en el medio del gusano. El ovario en forma de asta se encuentra en la parte posterior derecha de la ventosa abdominal y delante de la parte frontal. testículos El útero es corto, enrollado entre el ovario y la ventosa abdominal, y está lleno de huevos. La glándula vitelina se encuentra a ambos lados del gusano. Los puntos para identificar la morfología adulta de Fasciola hepatica y Fasciola gigas se muestran en la Tabla A.1 [1]
Tabla A.1 Fasciola hepatica y Hepatitis gigantea Identificación morfológica de gusanos adultos de Fasciola[1]
Puntos de identificación
Fasciola hepatica
Fasciola gigas
Forma del cuerpo
p>Es larga y estrecha, con hombros obvios y forma de "V" pronunciada al final
Estrecho y largo, con hombros discretos, lados planos y forma de "U" roma al final p>
Talla
(20~40) ?mm×(8~13)mm
(33~76) ?mm×(5~12)mm
p>
Longitud del cuerpo: Ancho del cuerpo
2: 1
Más de 3: 1
Ventosa
Un poco más pequeña que la boquilla de succión Grande
Aproximadamente 1,5 veces el tamaño de la ventosa bucal.
Intestino
Pocas ramas mediales
Las ramas mediales son complejas.
Testículos
La zona ramificada representa aproximadamente 2/3 del cuerpo del insecto.
El área de las ramas representa aproximadamente la mitad del cuerpo del insecto.
4.2 Los huevos de Fasciola ovata son rectangulares, de color marrón amarillento, con una pequeña cubierta en un extremo. La cáscara del huevo es fina y está dividida en dos capas. El huevo está lleno de muchas células de yema y un óvulo difícil de encontrar.
El tamaño de los huevos de Fasciola hepatica es (130 ~ 150) μ m × (63 ~ 90) micrones, con un tamaño promedio de 143 μm × 86 μm el tamaño de Fasciola Giantis es (144 ~ 208) μ m × (70 ~; 109) micrones, el tamaño promedio es de 164 μ m Infección por agua. Los gusanos adultos parasitan en el conducto biliar del huésped final, y los huevos producidos ingresan a los intestinos con la bilis, se mezclan con las heces y se excretan, y se desarrollan y eclosionan formando cercarias en agua con una temperatura adecuada. Las cercarias invaden al huésped intermediario (caracoles de agua dulce de la familia Verticillidae, etc.). ), y mediante el desarrollo y la proliferación asexual de cercarias, cercarias, cercarias y cercarias, se desarrollan aún más hasta convertirse en cercarias. Las cercarias maduras escapan del cuerpo del caracol y forman quistes en las plantas acuáticas o en el agua. Finalmente, el huésped se infecta al ingerir metacercarias vivas. Los gusanos infantiles se desprenden de las metacercarias en el intestino delgado, penetran la pared intestinal, migran dentro de la cavidad abdominal y finalmente atraviesan el parénquima hepático y entran en el conducto biliar para convertirse en gusanos adultos. El tiempo mínimo desde la deglución de las metacercarias hasta la búsqueda de huevos en las heces es de aproximadamente 10 a 11 semanas. La vida útil de los gusanos adultos es generalmente de 4 a 5 años, y hay informes de que pueden vivir como parásitos en el cuerpo humano hasta 12 años. [1]
Volumen 6[1]
6.1 Epidemiología La fascioliasis se distribuye por todo el mundo y se han notificado casos de infección humana en 51 países de los cinco continentes. Se estima que al menos 2,4 millones de personas en todo el mundo están infectadas con Fasciolopsis y el número de personas en riesgo de infección es 91.654.380. El primer estudio sobre distribución de parásitos humanos en China estimó que el número de personas infectadas en China era de 6.543.802. En la actualidad, 21 provincias (municipios y regiones autónomas), incluidas Fujian, Jiangxi, Hubei, Mongolia Interior, Guangxi y Yunnan, han informado de casos de Fasciolopsis.
6.2 Manifestaciones clínicas 6.2.1 Fasciolia aguda La fasciolia aguda ocurre entre 2 y 12 semanas después de la infección. Es causada por larvas de Fasciolia que nadan en la cavidad abdominal y el parénquima hepático. El curso de la enfermedad progresa relativamente lentamente. . Los síntomas incluyen: fiebre, dolor abdominal, fatiga o síntomas como anorexia, vómitos, distensión abdominal y diarrea, signos como hepatomegalia y dolor por percusión en la zona del hígado, y algunos pacientes desarrollan signos como ascitis y anemia; Aumento del porcentaje y/o valor absoluto de eosinófilos en sangre periférica.
6.2.2 La fascioliasis hepática crónica ocurre después de la fase aguda y es causada por daño mecánico a los conductos biliares en adultos y los * * * efectos de sus metabolitos, como la hiperplasia epitelial de los conductos biliares, los conductos biliares y la vesícula biliar. Inflamación, fibrosis de la vía biliar, dilatación y obstrucción, etc. Los síntomas incluyen: dolor abdominal, fatiga, anemia, anorexia, aversión a los alimentos grasosos, ictericia, hepatomegalia, etc. Las manifestaciones clínicas varían en gravedad. Aumento del porcentaje y/o valor absoluto de eosinófilos en sangre periférica.
6.2.3 Daño ectópico Durante el proceso de migración abdominal, los gusanos pueden infiltrarse o ser transportados por el torrente sanguíneo a órganos y tejidos distintos del hígado, causando daño ectópico, como tejido subcutáneo, músculos abdominales, peritoneo, pulmones, el parasitismo ectópico en los ojos, el cerebro, la vejiga y otras partes del cuerpo es más común en el tejido subcutáneo. Las manifestaciones clínicas de las lesiones ectópicas son complejas y variables, y el diagnóstico suele realizarse quirúrgicamente.
6.3 Examen de laboratorio 6.3.1 Examen de heces 6.3.1 Método de sedimentación por lavado con agua (o método de sedimentación por gravedad) Tome 20 g ~ 30 g de heces en un vaso de precipitados, agregue 10 ~ 12 veces de agua y mezcle bien para formar heces Pulpa. Utilice un tamiz de malla con un tamaño de poro de 250 a 425 micrones (malla 40 a 60) para filtrar en una taza medidora cónica de 500 ml. Agregue agua para enjuagar los residuos fecales en el tamiz hasta que el líquido fecal en la taza medidora alcance los 500 ml. Después de dejarlo reposar durante 30 minutos, vierta el sobrenadante, agregue agua hasta 500 ml y déjelo reposar durante 15 a 20 minutos. Repita esto de 3 a 5 veces hasta que el sobrenadante se vuelva claro. Finalmente, se descartó el sobrenadante y se tomó una extensión del sedimento para el examen microscópico de los huevos de Fasciola.
6.3.1.2 Método de recolección de huevos con bolsa de nailon: tomar 20 g ~ 30 g de heces, colocarlas en un tamiz con un diámetro de poro de 250 μm ~ 425 μm (malla 40 ~ 60) y usar un tamiz con poro. diámetro de 55μm (malla 260) Conecte la bolsa de seda de nailon y sujete la abertura inferior de la bolsa con un clip de hierro. Rocíe agua, triture las heces y cuele las heces en una bolsa de nailon.
Luego retire la malla, continúe rociando agua para enjuagar la suspensión fecal en la bolsa y raspe suavemente el exterior de la bolsa con palillos de bambú para ayudar a filtrar hasta que el filtrado se vuelva claro. Retire la pinza de hierro y tome una muestra del sedimento para examinar los huevos de Fasciola bajo un microscopio.
6.3.2 Inspección del líquido de drenaje duodenal: extraiga el líquido de drenaje duodenal y la bilis del tubo de drenaje duodenal y compruebe si hay huevos de Fasciola mediante el método de frotis directo. Para mejorar el efecto del examen microscópico, el líquido de drenaje se puede diluir y agitar con solución salina fisiológica, luego se divide en tubos de centrífuga, se centrifuga a 1500 g durante 5 a 10 minutos y se puede tomar una muestra del sedimento para el examen microscópico.
6.3.3 Se toman secciones patológicas de tejidos a partir del examen de biopsia patológica. La estructura microscópica de Fasciolopsis visible en el examen microscópico se puede utilizar como base para el diagnóstico, pero no se recomiendan más exámenes y diagnósticos de casos sospechosos.
6.3.4 Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) 6.3.4.1 Preparación del antígeno Recolecte gusanos adultos Fasciolia frescos de los conductos biliares del ganado vacuno y ovino y utilice solución salina tamponada con fosfato (PBS) de 0,01 mol/l, pH 7,4. ) ), luego agregue PBS e incube a temperatura ambiente durante 3 a 6 horas. Centrifugar el medio de cultivo durante 65,438±00 minutos a 3000 gy 40°C, retirar el precipitado (huevos, etc.) y el sobrenadante es el antígeno de excreción y secreción de Fasciolopsis. La concentración de proteínas se determinó mediante el método del azul brillante de Coomassie.
6.3.4.2 Reactivo conjugado marcado con enzima: conjugado anti-IgG humana marcado con peroxidasa de rábano picante; diluyente de recubrimiento antigénico: tampón carbonato 0,05 mol/L, pH 9,6 Solución de bloqueo: diluyente de recubrimiento antigénico que contiene suero bovino al 1 % albúmina; solución de lavado: 0,01 mol/L de solución salina tamponada con fosfato que contiene 0,05 de Tween 20, pH 7,4 Diluyente: solución de lavado que contiene albúmina sérica bovina al 1 % Solución de sustrato: solución de sustrato de 3, 3', 5, 5' tetrametilbencidina (TMB) (ver; c. 4.3); para fórmula); solución de parada: 2 mol/L de solución de ácido sulfúrico.
6.3.4.3 Fórmula de la solución de sustrato TMB Solución de color de sustrato A: 13,6 g de acetato de sodio, 1,6 g de ácido cítrico, 0,3 ml de peróxido de hidrógeno 30 y agua destilada hasta 500 ml. Solución cromogénica de sustrato B: 0,2 g de etilendiaminotetraacetato disódico, 0,95 g de ácido cítrico, 50 ml de glicerol, 20 ml de solución de TMB (pesar 0,2 g de TMB, disolver en 20 ml de DMSO), añadir agua destilada a 500 ml. La solución cromogénica de sustrato B debe almacenarse protegida de la luz. Antes de usar, mida cantidades iguales de líquido A y líquido B según sea necesario, mezcle uniformemente antes de usar. O puede utilizar directamente la solución cromogénica TMB disponible comercialmente.
6.3.4.4 Pasos de la operación: diluir el antígeno a 5 μg/ml ~ 20 μg/ml con diluyente de recubrimiento, agregar 100 μL a cada pocillo de una placa de poliestireno de 96 pocillos y mantener durante la noche a 4 °C. DO. Deseche la solución en el hoyo al día siguiente y sacúdala para secarla. Añadir 200 l/pocillo de solución de bloqueo e incubar a 37 °C durante th. Deseche el líquido sellador, lave 3 veces con detergente, 5 minutos cada vez y seque durante 5 minutos. Diluya el suero o el suero de referencia (2 controles negativos, positivos y en blanco por lote, varios pocillos para cada muestra) con diluyente a 1:200 ~ 1:400, agregue 100 μl a cada pocillo e incube a 370 °C durante 1 hora. Decantar la muestra de suero y lavar como antes. Añadir 100 μl/pocillo de conjugado marcado con enzima (diluido con diluyente según la concentración recomendada) e incubar a 37 °C durante 1 h. Retirar el conjugado marcado con enzima, lavar 4 veces durante 5 minutos cada una y secar durante 5 minutos. Añadir 100 l/pozo de solución de sustrato TMB y mantener alejado de la luz durante 5 minutos a temperatura ambiente. Añadir 50 µl de solución de parada por pocillo. Establezca los pocillos de control en blanco a cero y utilice un lector de microplacas para medir el valor de absorción de densidad óptica (OD) de cada pocillo a una longitud de onda de 450 nm.
Si el valor OD promedio/valor de referencia negativo (P/N) de la muestra analizada es mayor o igual a 2,1, se determina que el resultado de 6.3.4.5 es positivo.
6.4 Diagnóstico diferencial 6.4.1 Etiología de Clonorchis sinensis Clonorchis sinensis es una enfermedad parasitaria común transmitida por los alimentos causada por el consumo de peces y camarones de agua dulce que contienen metacercarias de Clonorchis sinensis. Los gusanos adultos parasitan en los conductos hepatobiliares del huésped y sus manifestaciones clínicas son similares a las de Fasciola hepática, pero la mayoría de los pacientes presentan síntomas leves.
Los huevos de Clonorchis sinensis se pueden detectar mediante el examen de las heces. El tamaño es (27 ~ 35) μ mo comer la mitad de los cangrejos de agua dulce y los cangrejos que contienen quistes de paragonimiasis pueden causar infección y daño hepático, que se manifiesta principalmente como hepatomegalia, dolor en el área del hígado y función hepática anormal. Los anticuerpos específicos de Paragonimus fueron positivos en la inmunología sérica.
6.4.3 Capillaria hepatica es un parásito de ratas y muchos mamíferos. Los gusanos adultos viven en el hígado y ocasionalmente infectan a los humanos, causando capilariasis hepática. Las personas se infectan durante el período infeccioso al consumir alimentos o agua contaminados con huevos. Las manifestaciones clínicas incluyen fiebre, hepatoesplenomegalia y aumento marcado de eosinófilos. El patógeno fue confirmado mediante biopsia de hígado.
6.4.4 Los pacientes con hepatitis viral, como hepatitis aguda y hepatitis crónica, a menudo tienen una función hepática significativamente anormal y antígenos o anticuerpos positivos de la hepatitis viral. Las pruebas inmunológicas y etiológicas para Fasciolopsis fueron negativas.
6.4.5 Absceso hepático amebiano Algunos pacientes con absceso hepático amebiano tienen antecedentes de disentería o diarrea. Los pacientes suelen tener fiebre leve, dolor en la zona del hígado y sensibilidad evidente. Se pueden encontrar trofozoítos o quistes de Entamoeba histolytica en las heces. La ecografía B muestra un área sin eco en el sitio de licuefacción, y en la biopsia hepática se pueden observar trofozoítos de Entamoeba histolytica.
6.4.6 Absceso hepático bacteriano Los pacientes con absceso hepático bacteriano a menudo presentan escalofríos, fiebre alta, síntomas graves de infección e intoxicación, dolor en el área del hígado, niveles elevados de glóbulos blancos y neutrófilos y niveles elevados de eosinófilos en la rutina. Los análisis de sangre están bien en porcentajes y/o valores absolutos. El examen de ultrasonido B muestra múltiples abscesos y el pus obtenido de la biopsia hepática suele ser de color blanco amarillento, maloliente y con frotis o cultivo bacteriano. A menudo se producen abscesos metastásicos y el tratamiento antiamebas es ineficaz.
6.4.7 Tumores malignos del hígado