Esterilizador de óxido de etileno
(1) Bacillus subtilis var negro (ATCC 9372) Tabletas de Bacillus.
El requisito de contenido bacteriano es de 5 × 10 ufc/pieza a 5 × 10 ufc/pieza (según los resultados del recuento de cultivos bacterianos viables). En condiciones de dosis de óxido de etileno de 600 mg/L ± 30 mg/L, temperatura de 54 ℃ ± 2 ℃ y humedad relativa de 60 % ± 10 %, el tiempo de supervivencia de las esporas en la tableta bacteriana debe ser ≥ 7,8 min y el tiempo de destrucción. debe ser ≤58 min, D El valor es 2,6 min ~ 5,8 min.
(2) Portador bacteriano (10mm×10mm, representado por un trozo de tela si es necesario). A medida que los objetos de esterilización se agregan o reemplazan con otros portadores de bacterias.
(3) Bolsa de plástico de polietileno (envasada en rodajas, especificación 60 mm × 40 mm, espesor 0,2 min ~ 0,4 mm).
(4) Equipos de recuento de bacterias viables (ver 2.1.1.3).
(5) Artículos que se pueden procesar según lo especificado en el manual de instrucciones del esterilizador (cargue el esterilizador hasta el requisito de carga completa). (1) Prepare la suspensión de variante negra de Bacillus subtilis y las tabletas bacterianas de acuerdo con los requisitos de la prueba. Coloca las rebanadas en bolsas plásticas de polietileno de doble capa y séllalas, 2 rebanadas por bolsa. Se utilizaron 20 bolsas para cada ensayo.
(2) Coloque los artículos esterilizados en las capas superior, media e inferior. Establezca un punto dentro, medio y fuera de cada capa, con un total de 9 puntos. Hay 1 bolsa de tela en el medio de los artículos en cada punto y se requieren 18 bolsas de piezas de bacterias de prueba. Se colocó otra bolsa (2 piezas) de tabletas bacterianas a temperatura ambiente como control positivo.
(3) Realizar la esterilización con óxido de etileno en condiciones de carga completa de acuerdo con la concentración de óxido de etileno, el tiempo de acción, la temperatura del gabinete y la humedad relativa especificadas en las instrucciones. Dependiendo del uso del esterilizador, cárguelo completamente. Después del tratamiento, saque las rodajas, transfiéralas a 5 ml de medio de cultivo de caldo nutritivo, cultívelas en una incubadora a 37 °C y observe los resultados finales después de 7 días (prueba de cultivo cualitativa).
Para tubos de ensayo de caldo nutritivo cuyos resultados son difíciles de determinar, tomar 0,2 ml de la suspensión e inocularlo en la placa de agar nutritivo, esparcirlo uniformemente con una varilla L estéril y colocarlo en un recipiente de 37°. Incubadora C para cultivo. Después de teñir el frotis durante 48 horas, observe la morfología de la colonia bajo un microscopio o realice otras pruebas para determinar si hay crecimiento o crecimiento de las bacterias de prueba. Si no es el organismo de prueba, se debe repetir la prueba.
(4) En la prueba se deben establecer al mismo tiempo grupos de control positivo cualitativo y cuantitativo y grupos de control negativo.
(5) Para el grupo de control positivo cuantitativo, utilice el mismo lote de tabletas bacterianas a temperatura ambiente. Después de que el grupo de prueba haya sido desinfectado o esterilizado durante el tiempo especificado, coloque inmediatamente 2 tabletas bacterianas en 5,0 ml de. PBS en cada tubo de ensayo, agite y golpee el tubo 80 veces. Tome el líquido de lavado de acuerdo con el método que se muestra en 2.1.1.3 para el cultivo y recuento de bacterias viables.
(6) Grupo de control positivo cualitativo, utilice el mismo lote de tabletas bacterianas de prueba a temperatura ambiente. Después de que el grupo de prueba haya sido esterilizado durante el tiempo especificado, inocule inmediatamente 2 tabletas bacterianas en 5,0 ml de carne nutritiva. En el medio de cultivo de sopa, colóquelo en una incubadora para cultivo cualitativo y observe el crecimiento de bacterias.
(7) Grupo de control negativo, use 2 piezas de muestras no infectadas para el mismo lote de pruebas, inóculalas en 5,0 ml de medio de cultivo de caldo nutritivo y coloque el medio de cultivo de caldo nutritivo no inoculado en la incubadora. cultivo cualitativo y observar si se produce crecimiento bacteriano.
(8) La prueba se repite 5 veces.
(9) En las 5 pruebas, la cantidad de bacterias recuperadas de las tabletas bacterianas de control positivo en cada prueba debe ser de 5 × 10 ufc/pieza ~ 5 × 10 ufc/pieza en el grupo de control positivo cualitativo; las bacterias crecieron bien; los controles negativos no deberían mostrar crecimiento bacteriano. Si los resultados del control positivo o del control negativo no cumplen con los requisitos anteriores, la prueba no será válida y se repetirá. (1) La temperatura y la humedad relativa tienen una gran influencia en el efecto de esterilización del gas de óxido de etileno y deben controlarse estrictamente en las condiciones de prueba.
(2) El líquido de óxido de etileno puede disolver polietileno, cloruro de polivinilo, etc., y el líquido no se puede gotear sobre dichos elementos. El óxido de etileno, ya sea líquido o gaseoso, puede dañar los productos de celuloide.
(3) El óxido de etileno es inflamable y explosivo. Se deben tomar medidas de prevención de incendios y a prueba de explosiones en el sitio de prueba, y no se permiten llamas abiertas ni chispas.
(4) La inhalación de demasiado gas de óxido de etileno puede provocar síntomas de intoxicación como dolor de cabeza, vómitos y, en casos graves, edema pulmonar. El ambiente de trabajo debe estar bien ventilado.
Cuando se trabaja durante 8 horas al día, la concentración de óxido de etileno no supera los 1,82 mg/m (1 ppm). Cuando se trabaja durante 15 minutos, la concentración de exposición no supera los 9,1 mg/m (5,0 ppm). Si aparecen síntomas de intoxicación, abandone el lugar rápidamente. Aquellos con síntomas leves deben respirar aire fresco hasta que los síntomas desaparezcan; aquellos con síntomas graves deben ser enviados al hospital para recibir tratamiento a tiempo.