Embalaje de virus, infección de células diana

3ug X2

6ug plásmido objetivo

Medio óptico 150ul

Mezclar y dejar reposar durante 5 minutos.

40 ul Pei+110 ul opti-medium, dejar reposar 5 minutos.

Deja reposar la mezcla A y B durante 30 minutos.

En este punto, sustituir la placa de Petri de 100 mm por 3 ml de opti-medium.

Después de 4 horas, reemplace todo el medio.

Cambiar el líquido a la mañana siguiente.

El virus (tamiz 0,45) se recogió 48 horas después del intercambio de líquido.

En este punto, prepare las células A549.

60 mm

3ul (1:1000) de polibutadieno

1ml de medio de cultivo completo

2ml de virus (en células coinfección para pasaje)

Cultivo durante la noche para cambiar el líquido.

Reponer el líquido a las 8 horas.

La infección viral continuó a la mañana siguiente (la infección se repitió tres veces).

Usa inductores para inducir 3, 5, 7.

Recogida de muestras y medición de glóbulos blancos