Identificación de la celidonia.
Vista de la superficie de la hoja: Las paredes verticales de las células epidérmicas superiores son rectas; las paredes verticales de las células epidérmicas inferiores son onduladas; debajo hay más venas y más largas; Los tricomas no glandulares tienen de 3 a 13 células y miden entre 150 y 1500 μm de largo.
Corte transversal del tallo: 1 hilera de células epidérmicas; la capa exterior es cutícula ondulada. Hay dos filas de células epiteliales que contienen cloroplastos fuera de la corteza, y las 3-4 filas inferiores de paredes celulares son ligeramente más gruesas. (1) Caracterización química: tomar 5 g de polvo grueso, remojarlos en 20 ml de cloroformo amoniacal durante la noche y filtrar. Divida la solución de cloroformo en dos partes, una parte se reserva para el muestreo en capa fina y la otra parte es cloroformo evaporado, se disuelve en 2 ml de ácido clorhídrico al 1%, se coloca en un tubo de ensayo y se agrega gota a gota la solución de prueba de yoduro de potasio y bismuto mejorada. , la solución inmediatamente adquiere un color marrón rojizo. (Reacción de alcaloides)
(2) Preparación de muestras para cromatografía en capa fina: Igual que "Caracterización Química". Alternativamente, el residuo extraído con cloroformo en el ítem "Propiedades químicas" se puede evaporar completamente, remojar en metanol durante la noche, filtrar y concentrar el filtrado a 2 ml, luego colocarlo en una placa de capa fina de gel de sílice G (producida en Qingdao, con una solución de hidróxido de sodio al 0,5 % y hornear a 65438 ± 020 ℃ durante más de 4 horas). La parte de lixiviación de cloroformo se desarrolla con hexano-cloroformo-metanol (6:3:0,3) o la parte de lixiviación de metanol se desarrolla con cloroformo-metanol (9:1). Se satura el vapor de amoniaco y el desarrollo es de 10cm. Usando quelidonina, tetrahidrocoptisina, queleritrina y sanguinarina como controles, observar bajo luz ultravioleta (254 ~ 365 nm). Como resultado, se detectaron los cuatro alcaloides en el extracto de raíz de celidonia, mientras que no se detectó queleritrina en el extracto de la parte aérea. El extracto de metanol se comparó con berberina y coptisina y se mejoró la pulverización del reactivo de yoduro de bismuto y potasio. Como resultado, se detectaron dos alcaloides en el extracto de raíz de celidonia, mientras que solo se detectó coptisina en el extracto aéreo.
(3) Extraer 0,1 g del polvo a través de una capa de papel, remojarlo en 10 ml de butanol saturado con una solución de ácido cítrico al 1% durante 1 hora, agitar de vez en cuando, filtrar y después de 1 hora filtrar. con papel de filtro saturado de n-butanol saturado con agua. Después de 30-45 minutos, sáquelo y obsérvelo bajo luz ultravioleta después del secado.
(4) Determinación del contenido ① Determinación de quelidonina: Primero, use la solución metanólica de ácido sulfúrico para extraer colorimétricamente la muestra. Después de que el metanol se evapore del extracto, la solución ácida se neutraliza con una solución de hidróxido de sodio. para formar un álcali, extraer con cloroformo, acidificar nuevamente, extraer con cloroformo, luego alcalinizar con una solución de hidróxido de sodio, evaporar el cloroformo, disolver el residuo en metanol y diluir a volumen. Una cierta cantidad de esta solución se aplicó sobre papel de filtro pretratado con acetona-formamida (7:3), revelado con n-butanol-ácido acético-agua (4:1:5) y tamponado con ácido acético de pH 4 que contenía capuchina. Las manchas de celidonia separadas se eluyeron con líquido y el compuesto coloreado (una mezcla de quelidonina y tinte) se extrajo con cloroformo.
(5) Extraiga el polvo con cloroformo-ácido oleico (99:1) espectrofotometría UV, apunte la solución concentrada en una placa de capa fina de gel de sílice G y utilice cloroformo-acetona-acetato de etilo-tolueno ( 2: 1: 1: 1) Despliegue y saque las manchas de celidonia de la placa de TLC.
(6) Método yodométrico: Agitar 3 g de polvo y 30 g de etanol al 70 % a temperatura ambiente durante 2 horas, filtrar, tomar 25 g del filtrado, evaporar el etanol, añadir 10 gotas de ácido sulfúrico al 10 %. solución y agregar agua a 10 g, filtrar, tomar 5 g del filtrado y alcalinizar con 1 ml de solución de hidróxido de amonio al 10%. Filtrar con algodón, disolver 20 g de residuo de evaporación en solución de ácido sulfúrico 0,1 N, calentar para eliminar el cloroformo, diluir a 10 ml con solución de ácido sulfúrico 0,1 N, tomar una cierta cantidad de esta solución (equivalente a 0,5 g de muestra), mezclar con 2 ml de Solución de ácido sulfúrico al 10% y 2 ml de solución de ácido sulfúrico Mezcle una solución de yodo-yoduro de potasio 0,1 N y déjela reposar. Disolver en 25 ml (ⅰ) de metanol y valorar con solución estándar de tiosulfato de sodio 0,01 N (1 ml de tiosulfato de sodio 0,01 N ≈ 0,882 5 mg de quelidonina). La absorbancia de la solución (I) también se puede medir a 470 nm. Este método es sensible y no interfiere con otros alcaloides de la muestra.
(7) Titulación ácido-base: extraer la muestra con etanol al 70%, concentrar, acidificar con ácido sulfúrico, filtrar, alcalinizar con solución de hidróxido de sodio al 15%, extraer con cloroformo, concentrar y añadir al extracto. Añadir una cierta cantidad de solución de ácido clorhídrico 0,1 N, calentar en un baño de agua para eliminar el cloroformo y luego titular con una solución de hidróxido de sodio 0,1 N, utilizando una mezcla de rojo de metilo y azul de metilo como indicador.
(8) Determinación del contenido de sanguinarina (método colorimétrico): Extraer la solución de éter de petróleo que contiene la muestra de sanguinarina con ácido clorhídrico, luego alcalinizar con álcali y extraer con cloroformo, luego agregar una solución de tris A al 30% de cloruro de antimonio. en cloroformo, forma un color naranja, luego compare los colores. Método: Tomar una cierta cantidad de muestra de extracto de éter de petróleo, colocarla en un embudo de decantación, agregar 10 ml de ácido clorhídrico concentrado, agitar bien y agregar 10 ml de agua destilada, separar la capa ácida, transferir a otro embudo de decantación y use un medio que contenga 1 a 2 Extraiga la capa de éter de petróleo dos veces agregando 10 ml de ácido clorhídrico concentrado a agua destilada y combine la solución ácida y 1. Después de enfriar, extraer con cloroformo tres veces (10, 10, 5 ml), combinar las soluciones de cloroformo en un vaso de precipitados pequeño, evaporar hasta sequedad en una estufa a 100°C, transferir cuantitativamente el residuo a un tubo colorimétrico que contenga 3 ml de cloroformo seco y agregar 2 ml de tricloruro de antimonio al 30 % en solución seca de cloroformo, colorimétrico mediante filtro verde.
(9) Determinación de alcaloides totales: tomar 5 g de muestra, extraerla con etanol al 60% tres veces (100, 100, 50 ml), calentar durante 15 minutos cada vez, combinar los extractos, concentrar a presión reducida para 50 ml, agregue 30 ml de ácido sulfúrico concentrado, 30 ml de solución de ácido acético y 4 g de partículas de zinc, calentado a aproximadamente 65438+. Después de enfriar, neutralizar con amoníaco concentrado, extraer tres veces con éter dietílico (hasta que el extracto no reaccione con el reactivo de yoduro de mercurio y potasio), filtrar, secar con sulfato de sodio anhidro, lavar el filtro con éter dietílico, concentrar, secar al vacío para eliminar. el éter dietílico y secar para mantener un peso constante, agregar con precisión 50 ml de cloroformo para disolver, absorber 25 ml de solución de cloroformo, evaporar hasta sequedad, disolver el residuo en 65438±00 ml de ácido acético glacial y agregar 5 ml. de anhídrido acético 0,65438±0N. El contenido total de alcaloides se mide como quelidonina (1 ml de solución de ácido perclórico 0,05 N ≈ 0,017 65 g de quelidonina).