Alimentar ratones con diferentes concentraciones de Giemsa
Alcohol de nicotina; citología de espermatozoides; efectos sobre los micronúcleos
1 Introducción
Las sustancias químicas nocivas contenidas en las hojas de tabaco son principalmente nicotina. La nicotina es muy tóxica y es un compuesto muy importante que tiene fuertes efectos tóxicos en varios sistemas del cuerpo. El uso excesivo de nicotina puede provocar fácilmente muchas reacciones adversas graves. Fumar puede provocar una intoxicación crónica grave. Las instituciones de investigación de la Universidad Estatal de Carolina del Norte en los Estados Unidos descubrieron que se encontraron metabolitos de nicotina en el esperma de los fumadores masculinos. Se cree que este carcinógeno puede tener efectos adversos en los recién nacidos después de ingresar a los espermatozoides, puede causar mutaciones genéticas en el cuerpo humano y también puede usarse como factor iniciador del cáncer.
El alcohol está compuesto de carbono, hidrógeno y oxígeno. Es inofensivo para el organismo y es una parte indispensable de la sangre humana. Beber con moderación ayuda a dilatar los vasos sanguíneos y relajar o expandir los tejidos de todo el cuerpo, especialmente el músculo liso arterial. No sólo es inofensivo para la salud humana, sino que también tiene efectos protectores evidentes. Sin embargo, beber en exceso puede ser perjudicial para la salud humana. Si bebes demasiado durante mucho tiempo, provocarás alcoholismo crónico, lo que provocará un gran daño a los órganos humanos e incluso permitirá que los carcinógenos se aprovechen de ello. Por otro lado, también puede provocar daños en los espermatozoides masculinos.
Más investigaciones muestran que cuando el alcohol y la nicotina están presentes en exceso en el cuerpo, el alcohol agravará el daño de la nicotina a los tejidos y células del cuerpo.
Este experimento diseñado explora los efectos de las tres sustancias anteriores en los espermatozoides de ratón observando y midiendo la distorsión de los espermatozoides de ratón cocultivados con nicotina, alcohol y nicotina y alcohol * * * * durante un período de tiempo, para verificar más a fondo los efectos nocivos de estas sustancias en el esperma humano.
A través del experimento, esperamos tener una comprensión más confiable y objetiva del grado de daño a los espermatozoides causado por el tabaco y el alcohol. Más importante aún, el efecto combinado del tabaco y el alcohol agravará el daño. espermatozoides, orientando así una alimentación sana y razonable.
Además, a excepción del efecto de la nicotina en los espermatozoides de ratón, no pudimos encontrar artículos experimentales de otras personas sobre las otras dos partes del experimento. Consulte otra literatura relevante para determinar la dosis y el método del experimento. El éxito del experimento aún está por verificar. Esperamos que este sea un proceso de innovación y discusión, cultivando y mejorando así nuestras capacidades experimentales.
2. Materiales y métodos experimentales
2.1 Animales de experimentación: ratones macho, de 6-7 semanas de edad, 15.
2.2 Plan de diseño experimental (como se muestra en la Tabla 1)
Tabla 1 Tabla de tratamiento de cada grupo experimental
Grupo
Proceso
p>
Números
Grupo de nicotina
Coloca los ratones en una caja sellada de 40cm×20cm×10cm. Una vez al día, enciende dos cigarrillos a la vez. tiempo y los coloco en la caja. Fumé pasivamente durante aproximadamente una hora durante seis días consecutivos.
2
Grupo de alcohol
A los ratones se les administró por vía oral 0,2 ml de alcohol al 20 %, 30 % y 50 % en cada concentración. dos veces al día 6 días seguidos.
Sexto
Grupo de nicotina más alcohol
La operación fue la misma que la anterior, realizándose el tabaquismo pasivo y la administración intragástrica al mismo tiempo.
Seis
Grupo control
Alimentación natural
1
2.3 Fármacos:
1 caja de cigarrillos (comercial)
Solución de alcohol (20%, 30%, 50% relación volumen)
2.4 Solución colorante: Solución colorante Giemsa al 5%.
2.5 Equipo experimental
Microscopio, jeringa, refrigerador, gotero, malla de alambre fino, baño de agua, equipo de disección (tijeras para ojos, tijeras para huesos, pinzas, pinzas para codo, etc.), Dispositivo de lavado gástrico, caja de plexiglás transparente con tapa (40cm×20cm×10cm).
2.6 Pasos experimentales
2.6.1 Grupo de control de ratones
Utilice 1 ratón como control, alimente de forma natural y recolecte materiales después de 7 días.
2.6.2 Ratones del grupo experimental
Seleccione 2 ratones como grupo experimental, 1 ratón en cada grupo. Queme las hojas de tabaco de 2 cigarrillos una vez al día, colóquelas en una caja transparente, deje que los ratones fumen pasivamente y recoja las hojas de tabaco después de 7 días.
2.6.3 Diseccionar y observar los cambios en diversos órganos del ratón.
2.6.3.1 Tome los materiales y mate al animal. Tome los testículos de ambos lados y retire el tejido circundante. Coloque algunos de los testículos en un portaobjetos de vidrio y tritúrelos con una malla de alambre fino o unas pinzas de codo. .
2.6.3.2 Teñir con tinte de Giemsa durante 5 a 15 minutos, cubrir con un cubreobjetos y escurrir el tinte circundante.
2.6.3.3 Prensado Colocar el papel de filtro sobre el cubreobjetos y golpear suavemente el cubreobjetos con una goma para dispersar y fijar las células.
2.6.3.4 Examen microscópico
3. Resultados experimentales
3.1 Observación del comportamiento
Durante el experimento, observar el comportamiento de los ratones en comportamiento de cada grupo, y los resultados se enumeran en la Tabla 2.
Tabla 2 Registros de comportamiento de los ratones tratados en cada grupo
Grupo
Fumador pasivo
Alcohol oral (v/V)
Grupo de nicotina
Acostados boca abajo, la respiración se aceleró, la capacidad de actividad disminuyó significativamente y algunos ratones reaccionaron violentamente y se contrajeron.
Grupo alcohólico
20%: Actúa como siempre, algunos más emocionados, otros más lento.
30%: boca abajo, dificultad para respirar, espasmos estomacales.
50%: Incapacidad para moverse, colapso, dificultad para respirar, espasmos estomacales. Algunos ratones reaccionaron violentamente y murieron poco después de la alimentación por sonda.
Grupo de nicotina más alcohol
Al tumbarse boca abajo, la respiración se aceleró, la capacidad de actividad disminuyó significativamente y algunos ratones reaccionaron violentamente y convulsionaron.
20%: Las acciones son como de costumbre, algunas son más excitantes, otras son un poco más lentas.
30%: boca abajo, dificultad para respirar, tics estomacales, muy débil.
50%: Incapaz de moverse, boca abajo, dificultad para respirar, tics estomacales, muy débil. Algunos ratones reaccionaron violentamente y murieron poco después de la alimentación por sonda.
Grupo normal
Alimentación normal
De los resultados registrados en la Tabla 2, se pueden extraer las siguientes conclusiones conductuales: la nicotina y el alcohol tienen efectos evidentes en el comportamiento de los ratones y su consumo excesivo puede incluso provocar la muerte. Demuestra que fumar y beber son muy perjudiciales para el organismo.
3.2 Comparación morfológica de los ratones antes de finalizar el experimento
Observar la morfología de los ratones antes de finalizar el experimento, y los resultados se enumeran en la Tabla 3.
Tabla 3 Registros de observación morfológica de los ratones antes de finalizar el experimento
Grupo
Grupo experimental
Grupo normal
Tamaño
Pérdida de peso evidente
Normal
Actividad
Caída, movimientos lentos o inmóviles, expresión apagada.
Animada
Respiración
Profunda, lenta, pero rápida.
Más rápido y suave
Manifestaciones patológicas
Deformación corporal
2. Ceguera
3. cavidad de aire trasera.
4. Hinchazón facial
5. Ojos saltones
Ninguno
A partir de la observación y el registro de los resultados en la Tabla 3, se presentan las siguientes formas. Se puede sacar una conclusión científica: la nicotina y el alcohol tienen efectos obvios en la morfología de los ratones, incluida la pérdida de peso, la reducción de la actividad, las anomalías respiratorias y diversas manifestaciones patológicas, lo que indica que el tabaquismo y el alcoholismo son muy perjudiciales para el organismo.
3.3 Comparación anatómica
Durante el experimento se observó la morfología de los ratones de cada grupo, y los resultados se recogen en la Tabla 4.
Observación morfológica de los ratones de cada grupo.
Grupo
Pulmón
Hígado
Intestino
Grupo Nicotina
Blanco, Rojo ligeramente oscuro
Color hígado
Encogimiento, rojo oscuro
Grupo alcohólico
Blanco, rojo ligeramente oscuro
Rosa
Normal
Grupo Nicotina más alcohol
El pulmón izquierdo estaba atrofiado y rojo oscuro; el pulmón derecho estaba rojo oscuro con tres bandas oscuras.
Ma Long
Ma Long
Grupo normal
Blanco
Color hígado
Cian oscuro
Figura 1 Morfología externa de órganos en ratones tratados con tabaco y alcohol en diferentes grupos.
Comparación morfológica de órganos internos en ratones tratados con alcohol y tabaco.
Conclusión anatómica: Las observaciones anatómicas muestran que el alcohol y la nicotina causan diversos grados de daño a los tejidos y órganos del ratón. Cuando la nicotina y el alcohol trabajan juntos, sus efectos aumentan significativamente. Tomando como ejemplo los pulmones de los ratones del grupo experimental, el alcohol tuvo poco efecto en los pulmones, mientras que la nicotina les causó más daño. Cuando la nicotina y el alcohol trabajan juntos, los pulmones de los ratones experimentales se vuelven evidentemente necróticos y aparecen puntos negros.
3.4 Comparación citológica
Durante el experimento, se observó y comparó la citología de los ratones experimentales. Los resultados se muestran en las Figuras 3 y 4.
Figura 3 Mutación (micronúcleo y triplete) en espermatozoides de ratón tras una intoxicación por nicotina.
Figura 4 Tripletes de espermatozoides de ratón causados por el alcohol y el tabaco
Conclusión citológica: Las células germinales de los ratones del grupo de la nicotina, el grupo del alcohol y el grupo del tabaco y el alcohol tienen micronúcleos y triploide, pero el número no es suficiente para las estadísticas cuantitativas y hay poca diferencia en el número de micronúcleos entre los tres grupos.
4 Discusión experimental
4.1 Resumen de resultados experimentales
Este experimento tiene resultados obvios a nivel conductual, anatómico y celular, es decir, existe una relación cualitativa. Conclusión: la nicotina, el alcohol y sus mezclas tienen un daño evidente para los ratones, especialmente para sus espermatozoides, lo que también refleja el daño de estas sustancias al esperma humano.
4.2 Ideas para mejorar los métodos experimentales
En este experimento se rediseñó el método de producción y la cantidad, incluyendo intensidad, duración, dosis al ratón, etc. (Por un lado, reduce el impacto de las diferencias individuales, por otro lado, reduce el impacto de la inevitable muerte individual de los ratones durante el experimento) y las técnicas operativas clave (como la administración gástrica) se pueden mejorar aún más para mejorar la precisión y el efecto del experimento.
Además de los experimentos mejorados mencionados anteriormente, esperamos obtener resultados experimentales más objetivos, completos y valiosos al mejorar el diseño experimental. A continuación, nuestras ideas experimentales son:
①Desde una perspectiva macroscópica del comportamiento;
②Desde una perspectiva anatómica;
③Desde una perspectiva citológica, en este experimento, en Además de recolectar espermatozoides, se tiñeron y observaron células hepáticas.