¿Cuánto tiempo tarda en curarse el pegamento de matriz diluido?
En vista de los estrictos requisitos de Matrigel en el entorno operativo, para garantizar que su experimento se desarrolle sin problemas, el Laboratorio Central del Hospital Popular Provincial de Henan le brinda cálidos consejos sobre los siguientes aspectos:
1. Al recibir la mercancía, primero confirme que haya hielo seco, que la matriz de Matrigel esté sólida y que el nivel del líquido esté nivelado; La matriz Matrigel completa sólo se puede reenvasar una vez. Antes de reenvasarlo, se debe colocar en un frigorífico a 4°C (lo mejor es insertar primero la matriz de matrigel en hielo, y luego colocarla en un frigorífico a 4°C) durante un tiempo hasta que se derrita (recuerde no colocarlo en un frigorífico a 4°C) en la puerta del refrigerador o en Coloque los reactivos frecuentemente en el refrigerador con la abertura abierta). Además, las puntas de pipeta y los tubos EP utilizados para la dispensación deben enfriarse previamente a -20 °C (porque el pegamento de la matriz se desechará si se solidifica por encima de los 10 °C. Todo el proceso de dispensación debe realizarse en hielo). , y el proceso de dispensación debe llevarse a cabo en cada experimento posterior. Retire el Matrigel instalado en este experimento debe desecharse y no puede reservarse para el siguiente uso.
3. no debe tocar el Matrigel, como sostener La parte superior del tubo EP que contiene la matriz de Matrigel evita que la temperatura corporal solidifique el Matrigel
4. 12 mg/ml, y la concentración de la matriz Matrigel de alta concentración es de 18-22 mg/ml. La concentración específica se puede consultar a través del número de artículo;
5. Tome la placa de 24 pocillos como ejemplo. Al realizar experimentos de invasión de células tumorales, agregue 20-30 ug de matriz Matrigel a cada pocillo (generalmente la concentración de trabajo es 200-300 ug/ml y luego agregue 100 ul a cada pocillo). En este momento, la matriz de matrigel se diluye a un múltiplo muy bajo (algunos experimentos deben diluirse hasta 30 veces y la concentración óptima específica debe optimizarse de acuerdo con sus propios experimentos). Después de aplicar el pegamento, colóquelo en una incubadora a 37°C durante 1 hora. Después de sacarlo, si hay medio de cultivo líquido en la capa superior, deseche con cuidado el medio de cultivo líquido en la capa superior antes de usarlo nuevamente (en este momento, la matriz de matrigel se hunde hasta el fondo, formando una pequeña capa delgada);
6. Endotelial En experimentos de formación de tubos celulares, la matriz de Matrigel de alta concentración (18-22 mg/ml) generalmente se diluye a 10 mg/ml, mientras que la matriz de Matrigel de concentración ordinaria (8-12 mg). /ml) es cercano a 10 mg/ml, por lo que a veces puede usarse como agente formador de tubos.
7. El experimento debe realizarse con celdas con una pequeña cantidad de pasajes y buenas condiciones.
8 El contenido anterior es muy importante, preste atención.