Método Flynn-fenol

Tomar como ejemplo la determinación de frutos

1 Materiales y métodos

1.1 Reactivos

1.1.1 Tungstato de sodio médico ( Na2CO3 · 2H2O), molibdato de sodio (Na2MoO4 · 2H2O), sulfato de litio (Li[2]sO4), ácido fosfórico (H3PO4 85%), ácido fosfomolíbdico (24 moo 3-p2o 5·xH2O). La muestra estándar de monohidrato de ácido gálico es un producto de Sigma-Aldrich. El agua es agua destilada.

1.1.2 Cromógeno FC Pesar 50,0 g de tungstato de sodio y 12,5 g de molibdato de sodio, disolverlos en una botella de reflujo de 1000 ml con 350 ml de agua destilada, añadir 25 ml de ácido fosfórico y 50 ml de ácido clorhídrico y mezclar. De manera uniforme, refluya a fuego lento durante 2 horas. Añadir 75,0 g de sulfato de litio, 25 ml de agua destilada y unas gotas de agua con bromo. Guárdelo en una botella marrón para su uso posterior. Cuando lo use, agregue 1x agua destilada para diluir. 1.1.3 Revelador FD: Pesar 100,0 g de tungstato de sodio y 20,0 g de ácido fosfomolíbdico, disolverlos en 200 ml de agua destilada y agregar 5 ml de ácido fosfórico. Calentar a reflujo durante 2 horas, enfriar y ajustar el volumen a 1 litro.

1.1.4 Solución de carbonato de sodio al 7,5% Pesar 37,5 g de carbonato de sodio, disolverlos en 250 mL de agua tibia, mezclar bien y enfriar hasta un volumen constante de 500 mL.

1.1.5 Solución estándar de monohidrato de ácido gálico Pesar 0,110 g de monohidrato de ácido gálico, disolverlo en agua destilada y ajustar el volumen a 100 ml. La concentración másica de esta solución es de 1 000 mg/L. Pipetearla en matraces volumétricos de 0,0, 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, 5,0 ml a 100 ml y diluir hasta la marca con agua destilada. Las concentraciones másicas de las soluciones estándar de monohidrato de ácido gálico obtenidas fueron 0,0, 10, 20, 30, 40 y 50 mg/l respectivamente.

1.2 Instrumentos

Espectrofotómetro UV.

1.3 Método

1.3.1 Muestra de pretratamiento Lavar los frutos y secarlos. Picar las partes comestibles y homogeneizar con un machacador de pañuelos para su uso posterior.

1.3.2 Extracción de polifenoles totales: Tomar una cantidad adecuada de muestra (2 mL de vino, 2 g de uvas y caquis, 5 g de otras frutas), lavar un matraz aforado de 100 mL con 80 mL de agua destilada, y mantener caliente al baño maría en ebullición a 100°C 30min, sacar, enfriar, diluir a volumen, filtrar el filtrado y reservar.

1.3.3 Para la medición, utilice una pipeta graduada de 5 ml para absorber 1,0 ml de filtrado (si el contenido de polifenoles es demasiado alto, se puede diluir adecuadamente) o solución estándar de monohidrato de ácido gálico, y utilice una pipeta graduada. Pipetee para agregar FC respectivamente. Diluya el cromógeno o el cromógeno FD y la solución de carbonato de sodio al 7,5% en 10 ml con agua destilada, mezcle bien, desarrolle color a temperatura ambiente (lo mismo a continuación) y mida.