Describa brevemente las características mínimas de identificación de Staphylococcus aureus.
Además:
Primero, recoja las colonias en tubos bioquímicos de manitol a 37 °C durante la noche y observe que el cambio de color es positivo. Otras pruebas de coagulasa se pueden dividir en dos métodos, uno es el método en portaobjetos y el otro es el método en tubo de ensayo. La identificación es muy sencilla y se puede encontrar en cualquier libro de exámenes microbiológicos.
Lo siguiente es una referencia.
Staphylococcus aureus se puede identificar directamente en términos de forma y descripción de caracteres. También hay información que espero sea útil para el cartel.
En primer lugar, la bacteria es un coco grampositivo, sus células están dispuestas en forma de uva y no tiene esporas ni cápsulas.
En segundo lugar, Staphylococcus aureus crece de forma turbia en un medio de cultivo en caldo, a veces el líquido es transparente en un medio de cultivo en caldo de triptona y soja y crece de forma turbia cuando la carga bacteriana es excesiva. Cuando se cultivan en colonias de agar sangre, aparecen de color amarillo dorado y, a veces, de color blanco. Las colonias son grandes, prominentes, redondas, opacas, lisas y rodeadas de círculos hemolíticos.
En tercer lugar, cuando la cepa se cultiva en la placa de Baird-Parker, la colonia es redonda, lisa y convexa, húmeda, de 2-3 mm de diámetro, de color gris a negro, con un borde más claro y turbidez. alrededor de él. Cinturón con un anillo transparente en su capa exterior. La aguja se siente como la dureza del chicle mantecoso al tacto. Ocasionalmente se encuentran colonias similares que son insolubles en lípidos, sin embargo, no hay zonas turbias ni anillos transparentes;
Las colonias aisladas de alimentos congelados o secos que han estado almacenados durante largos períodos de tiempo tienen un color más claro que las colonias típicas y pueden tener una apariencia áspera y seca. (Espero que esto ayude al autor original en su identificación).
Medio Baird-Parker. doc (24.0k)
También existen algunos indicadores fisiológicos y bioquímicos, como la prueba de coagulasa plasmática.
Las colonias se seleccionaron e inocularon en caldo de extracto de carne y se cultivaron en una incubadora a 37 grados durante 24 horas antes de realizar la prueba de coagulasa plasmática. Los pasos generales de este experimento son los siguientes: extraer plasma fresco de conejo (1:4), colocarlo en un tubo de ensayo pequeño, agregar la bacteria Staphylococcus aureus cultivada durante 24 horas, agitar bien, colocarlo en un baño de agua a 36 grados, y observar cada media hora 6 horas en total. Si está coagulado (es decir, cuando se inclina o invierte el tubo de ensayo, se considerará un resultado positivo), combinado con las características morfológicas anteriores, etc.
Para procedimientos experimentales más detallados, puede consultar libros relevantes, como la cantidad de muestras y reactivos agregados durante el experimento y otros detalles.
Para conocer los límites microbianos, consulte el Apéndice XI J de la "Farmacopea de la República Popular China" (edición de 2005).
Staphylococcus aureus: Tomar 65.438 00 ml de solución problema (equivalente a 1g, 10ml y 10cm2), directamente o después del tratamiento, inocular en una cantidad adecuada (no menos de 100ml) de caldo de telurito de sodio (Potasio) ( o caldo nutritivo) medio de cultivo, cultivo, tomar el cultivo anterior, rayarlo e inocularlo en los huevos. 56600.0000000000005 Si no crecen colonias en la placa, o si el crecimiento de las colonias difiere de las características enumeradas en la Tabla 5, no se detecta Staphylococcus aureus en la muestra.
Si las colonias que crecen en la placa son consistentes o sospechosas con las características de las colonias enumeradas en la Tabla 5, se deben recoger 2 o 3 colonias e inocularlas en la inclinación del medio de agar nutritivo y cultivarlas durante 18 -24 horas. Tome el medio de agar nutritivo para cultivo, realice tinción de Gram e inocule en el medio de caldo nutritivo, cultive durante 65438 ± 08-24 horas y realice la prueba de coagulasa plasmática.
Tabla 5 Staphylococcus aureus
Morfología de colonia mediana
El agar manitol cloruro sódico es de color amarillo dorado, redondo y convexo, con bordes limpios y circundantes. Hay anillos amarillos. El diámetro de la colonia es 0,7-65438±0 mm
El agar yema de huevo con cloruro de sodio es de color amarillo dorado, redondo y convexo, con bordes limpios, y hay un anillo opalescente alrededor del cual se descompone la lecitina. El diámetro de la colonia es 65438±0-2 mm.
Prueba de coagulasa de plasma: Tome 3 tubos de ensayo pequeños estériles, agregue 0,5 ml de una mezcla de plasma y agua esterilizada (1:1) y luego agregue 0,5 ml de caldo nutritivo de la cepa sospechosa para cultivo ( o suspensión bacteriana concentrada preparada mediante cultivo inclinado en medio de agar nutritivo) y 0,5 ml de caldo de cultivo nutritivo de Staphylococcus aureus (o suspensión bacteriana concentrada preparada mediante cultivo inclinado en medio de agar nutritivo). Se cultivaron tres tubos al mismo tiempo y la observación comenzó después de 3 horas hasta las 24 horas. El plasma del tubo de control negativo debe fluir libremente y el plasma del tubo de control positivo debe coagularse. La prueba de coagulasa plasmática es positiva si el plasma del tubo de ensayo coagula; en caso contrario, es negativa. Si el tubo de control positivo o el tubo de control negativo no cumple con el tiempo de cumplimiento, prepare el plasma y vuelva a realizar la prueba.
Si las bacterias sospechosas anteriores son cocos no grampositivos y la prueba de coagulasa plasmática es negativa, se determina que no se detecta Staphylococcus aureus en la muestra.
También estoy haciendo la identificación de Staphylococcus aureus. Como tengo muchas muestras, solo pruebo dos indicadores.
Primero, recogemos las colonias en un tubo bioquímico de manitol y pasamos la noche a 37, y observamos que el color se vuelve positivo. Otras pruebas de coagulasa se pueden dividir en dos métodos, uno es el método en portaobjetos y el otro es el método en tubo de ensayo. El método específico ha sido explicado por varias personas anteriormente, por lo que no entraré en detalles. Espero que le resulte útil.
Muchas gracias por tu consejo. ¡Te beneficias mucho!
Además, me gustaría preguntar si Staphylococcus aureus puede crecer en placas de agar BHI y en un ambiente anaeróbico obligado. ¿Significa esto que las características morfológicas son diferentes?
¡Gracias a todos! !
El Staphylococcus aureus típico tiene forma esférica, con un diámetro de aproximadamente 0,8 μm, y se dispone en forma de racimos de uva bajo el microscopio. Staphylococcus aureus no tiene esporas ni flagelos, la mayoría de ellos no tienen cápsula y son grampositivos. Staphylococcus aureus tiene bajos requerimientos nutricionales y crece bien en medios de cultivo ordinarios. Es aeróbico o facultativamente anaeróbico. La temperatura óptima de crecimiento es 37°C y el pH óptimo de crecimiento es 7,4. Las colonias en la placa son gruesas, brillantes, redondas y de 1 a 2 mm de diámetro. Alrededor de las colonias en la placa de sangre se forma un anillo hemolítico transparente. Staphylococcus aureus tiene una alta tolerancia a la sal y puede crecer en caldo con 10-15 NaCl. Puede descomponer la glucosa, la maltosa, la lactosa y la sacarosa, produciendo ácido pero no gas. La reacción del rojo de metilo es positiva y la reacción P es débilmente positiva. Muchas cepas pueden descomponer la arginina, hidrolizar la urea, reducir los nitratos y licuar la gelatina. Staphylococcus aureus es muy resistente y menos sensible a las sulfonamidas, pero muy sensible a la penicilina y la eritromicina.
Observación de la tinción: seleccione colonias sospechosas de la placa para realizar la tinción de Gram. Staphylococcus aureus es Gram positivo. Bajo el microscopio, se disponen como uvas, sin esporas ni cápsulas, con un diámetro de 0,5-1 μm.
Prueba de coagulasa en plasma: absorba 0,5 ml de plasma de conejo y 0,5 ml de caldo de Staphylococcus aureus y cultive durante 24 horas, cultive a 36 ± 65438 ± 0 ℃, observe cada media hora durante 6 horas, si se produce coagulación. es decir, cuando el pequeño tubo de ensayo se inclina o se pone boca abajo, si el contenido no fluye, se considera positivo. Al mismo tiempo, haga una comparación del yin y el yang.
Prueba de nucleasa termoestable: Tratar el caldo de cultivo en un baño de agua hirviendo a 65438±05min durante 24 horas, pinchar las semillas en una placa de ADN con azul de toluidina con un asa de inoculación e incubar a 36±65438± Incubar a 0°C durante 24 horas. El color rosa claro alrededor de la línea de la picadura es positivo. La prueba fue positiva para Staphylococcus aureus.
Espero que te sean útiles.