Describa brevemente los principios y pasos de la tecnología PCR.

Respuesta: La tecnología de reacción en cadena de la ADN polimerasa, conocida como tecnología PCR, es una enzima que utiliza ADN polimerasa basada en ADN molde en presencia de cebadores y cuatro tipos de desoxirribonucleótidos que promueven la reacción y completan la reacción. Proceso de amplificación rápida del fragmento objetivo de la plantilla, que se basa en ciclos repetidos de tres temperaturas. Los tres pasos de cada ciclo son: (1) Desnaturalización: es decir, el ADN bicatenario se desnaturaliza térmicamente a 94 °C para romper los enlaces de hidrógeno del ADN bicatenario de la plantilla y convertirse en monocatenario. (2) Renaturalización: es decir, cuando la temperatura de desnaturalización cae repentinamente por debajo del valor de Tm del cebador (normalmente de 35 a 65 °C), el cebador se hibrida con la secuencia complementaria del ADN molde. Dado que los cebadores generalmente tienen una secuencia de 10 a 25 bases, la estructura del ADN molde es mucho más compleja que la molécula cebadora, y la concentración de moléculas cebadoras en el sistema de reacción es mucho mayor que la del ADN molde. el ADN cebador y el molde se combinan fácilmente para formar una cadena complementaria. (3) Extensión: bajo la acción de la ADN polimerasa, utilizando ADN como plantilla y cuatro tipos de desoxirribonucleótidos como materia prima, en presencia de Mg2+. La ADN polimerasa se basa en su actividad polimerasa 5' → 3', con el cebador que se une a la cadena plantilla de ADN como punto de partida. La secuencia del cebador se extiende para sintetizar la cadena complementaria del ADN molde.