El concepto de prueba de inhibición del crecimiento en pruebas bacteriológicas.

De hecho, el principio es relativamente simple: la sal de MTT se puede reducir a partículas de color azul violeta utilizando la deshidrogenasa mitocondrial de las células vivas. El color de las partículas después de la disolución puede reflejar la actividad de las células.

Procedimientos operativos

1. Siembre las células en una placa de cultivo de 96 pocillos con una densidad de 4,0 × 10 8 /l y cultívelas en una incubadora con CO2 al 5 % a 37 °C. Hasta que las células se adhieren a la pared, se agrega vincristina para lograr las concentraciones finales 0, 0,1 y 60 respectivamente.

Cultivar en una incubadora de CO2 al 5 % a 2,37 ℃ durante 20 horas, agregar 20 μl de Mtt a cada pocillo y continuar cultivando durante 4 horas.

3. Aspirar el medio de cultivo, lavarlo una vez con medio libre de suero, añadir 100 μL de solución de lisis de MTT e incubar durante 8 horas en una incubadora que contenga 5% de CO2 a 37°C.

4. Después de que los cristales de color púrpura se hayan disuelto por completo, utilice un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas para detectar la absorbancia de las células en cada grupo a A 570 nm/A 450 nm. A 570 nm/A 450 nm representa la viabilidad de las células. , y 0 μmol/L de fármaco es el grupo de control, y la tasa de supervivencia celular es del 100%. Los otros grupos son los siguientes: tasa de supervivencia = (absorbancia de cada grupo de concentración/absorbancia del grupo control) × 65438.

La tarea principal es preparar una solución nutritiva de PBS y preparar etiquetas de enzimas UV.