Introducción a la adenosina desaminasa sérica
Contenido 1 Pinyin 2 Referencia en inglés 3 Descripción general 4 Examen médico de la adenosina desaminasa sérica 4.1 Nombre de la prueba 4.2 Clasificación 4.3 Recogida del material 4.4 Principio de determinación de la adenosina desaminasa sérica 4.5 Reactivos 4.6 Método de operación 4.7 Valor normal 4.8 Importancia clínica del laboratorio resultados 4.9 Notas 4.10 Enfermedades relacionadas 1 Pinyin
xuè qīng xiàn gān tuō ān méi 2 Referencia en inglés
adenosina desaminasa sérica 3 Descripción general
Adenosina desaminasa (ADA) El sistema se llama adenosina aminohidrolasa, que cataliza principalmente la adenosina y la desoxiadenosina para generar inosina y amoníaco. Es uno de los sistemas enzimáticos importantes en el catabolismo del adenilato. La ADA se distribuye ampliamente en diversos tejidos del cuerpo humano, con su mayor contenido en la mucosa del intestino delgado y el bazo, seguidos por el hígado, los riñones, los huesos y el músculo esquelético. La ADA intracelular se localiza principalmente en el citoplasma y la actividad de ADA en los glóbulos blancos es mayor que en los glóbulos rojos. La ADA en suero está compuesta de isoenzimas derivadas de diferentes tejidos, y su especificidad relativa de sustrato y energía de activación también son diferentes de la ADA tisular. El pH óptimo de la ADA en suero es de 5,5 a 6,5, y el pH de la ADA tisular es de 6,5 a 8,5. El método principal para medir la ADA es el método colorimétrico. 4 Examen médico de la adenosina desaminasa sérica 4.1 Nombre de la prueba
Adenosina desaminasa sérica 4.2 Clasificación
Prueba bioquímica en sangre gt Determinación de enzimas
4.3 Recolección de material
Sangre 4.4 Principio de determinación de la adenosina desaminasa sérica
ADA cataliza la hidrólisis del nucleósido de adenina para generar nucleósido de hipoxanina y amoníaco, que se desarrolla utilizando el color Bosch. El agente mide la producción de amoníaco, que refleja indirectamente la actividad de ADA. 4,5 Reactivos
(1) Tampón de adenosina (pH 6,8): En 45 ml de agua desionizada, añadir 4,8 ml de 1 mol/L de NaOH, hervir para eliminar el amoniaco, añadir 1,361 g de KH2PO4 para disolver y enfriar. a 70 ℃ Agregue 133,6 mg de adenosina, agregue agua desionizada a 50 ml, agregue 1 ml de cloroformo para conservar y guárdelo en el refrigerador.
(2) Solución fenólica de nitrosoferricianuro de sodio: Tome 10 ml de fenol líquido, agregue agua desionizada a 500 ml, agregue 40 mg de nitrosoferricianuro de sodio y guárdelo en una botella marrón en el refrigerador. Si la lectura del tubo en blanco aumenta, se debe preparar nuevamente.
(3) Solución de orosina: disuelva 4 g de NaOH en una solución de ácido hipocloroso de 0,01 mol/l, agréguelo a 500 ml y guárdelo en el refrigerador para un almacenamiento prolongado.
(4) Solución de almacenamiento estándar de amoníaco (1 mg/ml): tome sulfato de amonio AR o GR y séquelo a 100 ~ 110 ℃ durante 2 horas, luego enfríelo en un desecador. Pese con precisión 0,472 g, disuélvalo en agua desionizada, agregue 0,1 ml de ácido sulfúrico concentrado y agregue agua desionizada para obtener 100 ml.
(5) Solución de aplicación estándar de amoníaco (25μg/ml): Tome 2,5 ml de solución de almacenamiento estándar de amoníaco en un matraz volumétrico de 100 ml y agregue agua desionizada hasta la marca. 4.6 Método de operación
Opere de acuerdo con la Tabla 1.
Mezclar bien, incubar en baño María a 37°C durante 30 minutos, poner a cero a 640nm con agua destilada y leer la absorbancia de cada tubo. 4.7 Valor normal
1~25U. 4.8 Importancia clínica de los resultados de laboratorio
La medición de la actividad de ADA se utiliza principalmente para el diagnóstico y diagnóstico diferencial de enfermedades hepatobiliares, y también se utiliza para
diagnóstico auxiliar de tuberculosis y otras enfermedades.
(1) Enfermedades hepatobiliares: las enfermedades hepáticas como la hepatitis viral aguda, la hepatitis crónica activa, la cirrosis y el cáncer de hígado tienen una actividad elevada de ADA en diversos grados, siendo la cirrosis la más obvia. Medido al mismo tiempo que ALT, tiene mayor valor para juzgar el grado de recuperación de las células hepáticas. En la ictericia obstructiva, la actividad de ADA rara vez aumenta, por lo que es útil para identificar la ictericia.
(2) La actividad sérica de ADA también puede aumentar en pacientes con fiebre tifoidea, mononucleosis infecciosa, fiebre reumática, anemia hemolítica, leucemia y ciertos tumores.
(3) La actividad de ADA en el derrame pleural tuberculoso es significativamente mayor que la de los derrames cancerosos y no inflamatorios, y la actividad de ADA del derrame pleural y su relación son >1. Por lo tanto, la medición de las actividades de ADA en suero y líquido pleural y sus proporciones son de gran importancia para identificar la naturaleza del derrame.
(4) La actividad de ADA en el líquido cefalorraquídeo de la meningitis tuberculosa es significativamente mayor que la de la meningitis purulenta, meningitis viral, hemorragia cerebral, infarto cerebral, traumatismo cerebral, etc. 4.9 Notas
(1) La solución de ácido hipocloroso de 0,01 mol/l se puede diluir con una solución de antiformina y su contenido de cloro activo se puede calibrar de la siguiente manera: tomar 2 ml de solución de antiformina, agua destilada para aproximadamente 20 ml, 3 g de yoduro de potasio, agregar 5 ml de ácido acético glacial después de disolver, usar almidón soluble (1 g/L) como indicador, valorar con 0,1 mol/L de tiosulfato de sodio y calcular la cantidad de cloro activo en la solución de Antiformin en función de su concentración.
(2) Se utiliza cloramina T en lugar de hipoclorito de sodio, y la primera tiene una alta concentración de cloro efectivo y un largo tiempo de almacenamiento del reactivo. La fórmula es: NaOH 0,5 g, Na2HPO4 · 12H2O 5,37 g, cloramina T 100 mg, agregar agua hasta 100 ml. Se puede conservar en botella marrón durante 1 año.
(3) El agua destilada utilizada para preparar los reactivos debe desionizarse o hervirse para eliminar el amoníaco y reducir la absorbancia del tubo blanco.
(4) Las unidades anteriores se pueden convertir a concentración unitaria internacional (U/L) multiplicando 1,19, basándose en: unidad × 1000/(60 × 14).
(5) Los glóbulos rojos contienen una gran cantidad de actividad ADA, por lo que se debe evitar el uso de muestras hemolizadas. 4.10 Enfermedades relacionadas