Ejemplo de cálculo de colonias bacterianas totales
El número total de colonias es una medida del número de microorganismos presentes en los alimentos, el agua, el suelo, etc. Uno de los métodos más utilizados es el recuento en placas. El siguiente es un ejemplo de cómo calcular el número total de colonias:
1. Preparación: Tome una cantidad adecuada de la muestra a analizar, agréguela a solución salina fisiológica y mezcle bien.
2. Tamizar la placa: Seleccionar el medio de cultivo adecuado. Después de fundir, cuando la temperatura sea la adecuada, verter la muestra en la placa y agitar la placa para distribuir uniformemente el medio de cultivo.
3. Agregue bacterias: use un anillo de hierro estéril para deslizar suavemente sobre la superficie del líquido de la muestra para distribuir las bacterias en la superficie del líquido sobre la superficie del medio de cultivo para que crezcan de manera uniforme.
4. Cultivo: Colocar el medio de cultivo en una incubadora de cultivo con temperatura y humedad constantes, generalmente a 37°C durante 24-48 horas.
5. Conteo: Transcurrido el tiempo de incubación, observe la forma, tamaño, color y otras características de las colonias, y cuente las colonias que crecen en el medio nutritivo para obtener el número total de colonias.
6. Cálculo: En función de los resultados del recuento y de la cantidad de solución salina fisiológica añadida a la muestra, se puede calcular el número total de colonias por mililitro o por gramo de muestra.
Condiciones de cultivo de colonias bacterianas:
1. Temperatura: El crecimiento y reproducción de las colonias bacterianas requiere de una temperatura constante y adecuada. En términos generales, la mayoría de las bacterias crecen más rápido a 37°C y crecen más lentamente alrededor de 20°C.
2. Humedad: La humedad necesaria para el crecimiento de las colonias suele ser superior al 80%. Al cultivar, es necesario utilizar una placa de Petri con tapa y agregar una cantidad adecuada de agua para mantener la humedad.
3. pH: Las diferentes colonias bacterianas tienen diferentes rangos de adaptación al pH. El pH del cultivo de colonias convencional suele estar entre 6,5 y 7,5.
4. Nutrientes: El crecimiento y reproducción de las colonias bacterianas requiere diversos nutrientes, como proteínas, azúcares, aminoácidos y vitaminas.
5. Oxígeno: Las diferentes colonias bacterianas tienen diferentes demandas de oxígeno. Algunas colonias bacterianas necesitan cultivarse en un ambiente con poco oxígeno, mientras que otras requieren suficiente oxígeno en el aire.