Introducción al analizador de células sanguíneas
Contenido 1 Pinyin 2 Referencia en inglés 3 Descripción general 4 Método de detección combinado de impedancia eléctrica, conductividad de alta frecuencia y dispersión láser 5 Método de detección combinado de dispersión de luz y tinción citoquímica 6 Método de detección combinado de impedancia eléctrica y conductancia de radiofrecuencia 7 Método de detección de dispersión de luz polarizada con láser de múltiples ángulos 1 Pinyin
xuè xì bāo fèn xī yí 2 Referencia en inglés
hematología *** yzer 3 Descripción general
La sangre El analizador de células es un hospital. Es uno de los instrumentos más utilizados en pruebas clínicas. Se utiliza principalmente para detectar muestras de sangre. Puede realizar análisis cualitativos y cuantitativos de componentes tangibles en la sangre y proporcionar información relevante. Con el rápido desarrollo de la tecnología informática en los últimos años, la tecnología de análisis de células sanguíneas también ha pasado de grupos tridimensionales a grupos de cinco dimensiones, y del espacio bidimensional al espacio tridimensional. Además, también hemos notado que muchos de ellos. Las tecnologías de cinco clasificaciones de los analizadores de células sanguíneas modernos adoptan las mismas tecnologías que se utilizan en los citómetros de flujo muy avanzados de hoy, como la tecnología de detección de luz dispersa, la tecnología de flujo de vaina, la tecnología láser, etc. Este artículo se centra en los métodos de detección y las aplicaciones de los instrumentos de análisis de células sanguíneas para los cinco grupos. 4 Método de detección combinado de impedancia eléctrica, conductividad de alta frecuencia y dispersión láser
Esta es una nueva tecnología lanzada por Coutler Company en 1987. Las células sanguíneas se suspenden en el electrolito y una cierta corriente pasa a través del Electrodos internos y externos del sensor Debido a que la impedancia eléctrica de las células sanguíneas es muy alta, cuando las células sanguíneas pasan a través de dos electrodos, la impedancia entre los electrodos aumenta instantáneamente, formando un pulso eléctrico cuya amplitud es proporcional al volumen de las células sanguíneas. El volumen de las células se puede medir en función del tamaño del pulso. Al medir los glóbulos rojos, se utiliza un discriminador de pulso para eliminar los pulsos de plaquetas más pequeños y retener los pulsos de glóbulos rojos y blancos, ya que la cantidad de glóbulos blancos en la sangre es inferior a 1/500 de los glóbulos rojos. , los datos totales se consideran aproximadamente el recuento de glóbulos rojos. Al medir los glóbulos blancos, se utiliza hemolisina para lisar los glóbulos rojos y luego se cuentan los glóbulos blancos restantes. Al contar plaquetas, reduzca el umbral del discriminador de pulso, cuente el número total y luego reste el recuento de glóbulos rojos (que incluye el recuento de glóbulos blancos) para obtener el recuento de plaquetas. Dado que las células de diferentes tipos pero con el mismo volumen producen la misma amplitud de pulso, no se pueden distinguir completamente solo por el volumen. Este defecto se puede compensar analizando la estructura interna de los glóbulos blancos mediante conductividad de alta frecuencia y dispersión láser. Aunque la pared celular no puede pasar corriente de baja frecuencia, puede pasar corriente de alta frecuencia. El tamaño y la densidad del núcleo celular son diferentes, y su resistencia a la corriente de alta frecuencia también es diferente, por lo que pueden usarse para distinguir el blanco. células sanguíneas. La tecnología de dispersión láser se utiliza principalmente para examinar las características de la superficie y la estructura interna de las membranas celulares. La dispersión del láser tiene una gran capacidad para distinguir la estructura y la densidad de las partículas celulares. La dispersión de la luz producida por las partículas gruesas es más fuerte que la de las partículas finas, por lo que se pueden distinguir las cinco clasificaciones de los analizadores de células sanguíneas de las series STKS y MAXM. La empresa estadounidense COULTER utiliza el método de resistencia, la conductividad de alta frecuencia y el método de detección combinado de dispersión láser.
5 Método de detección combinado de dispersión de luz y tinción citoquímica.
Utiliza tecnología de dispersión láser y tinción con peroxidasa para la clasificación celular. Los eosinófilos tienen una fuerte actividad catalasa, los neutrófilos contienen catalasa relativamente abundante en su plasma, seguidos de los monocitos, muy pocas células primitivas y los linfocitos y las células alcalinas. Utilice una pequeña cantidad de sangre, dilúyala adecuadamente con un líquido hipertónico que contenga detergente y formaldehído e incúbela durante decenas de segundos. En este momento, el detergente destruye las células y las enzimas en el plasma de los leucocitos se fijan. , se continúa la segunda reacción, se agrega óxido de hidrógeno y se calienta el tetrahidronaftol. En este momento, la catalasa en las células a analizar descompone el peróxido de hidrógeno para producir oxígeno. Este último hace que el tetracloronaftol desarrolle color y precipite en las células. partículas que contienen enzimas. Este tipo de células Después de pasar por el rayo láser, las células se clasifican debido a las diferencias en la dispersión de la luz y el tamaño.
Obviamente, los neutrófilos, los linfocitos y las células primitivas no se pueden detectar porque no contienen esta enzima. Por lo tanto, algunos instrumentos están especialmente equipados con sistemas de detección de neutrófilos que utilizan un método de diferencia de tiempo para coincidir con el sistema de medición de RBC/PLT. **Usa un canal. Debido a la acción del reactivo, excepto las células isófilas, todas las demás células de la sangre se lisan. La cantidad de células isófilas junto con los núcleos desnudos de otras células produce un mapa de distribución celular. Las células isófilas intactas muestran una alta dispersión de ángulo estrecho y están ubicadas en la mitad superior de la figura, mientras que las células desnudas están ubicadas en la mitad inferior. Las diferentes células desnudas tienen diferentes distribuciones en el eje X debido a diferentes estructuras. El núcleo único se encuentra a la izquierda y cuanto más lobulado está, más hacia la derecha. La computadora analiza la relación entre núcleos lobulados y picos de dispersión angular nuclear únicos, y la relación es el resultado informado por el analizador. Los analizadores de la serie TECHNICON H utilizan esta tecnología. 6 Método de detección combinado de impedancia eléctrica y conductancia de radiofrecuencia
Este método utiliza cuatro sistemas de detección para detectar diferentes tipos de células ① Sistema de detección de linfocitos, monocitos y neutrófilos: en suspensión celular Se agrega agente hemolítico a Huaizhong para disolver el rojo células sanguíneas, mientras que los glóbulos blancos se mantienen intactos. El citoplasma y la morfología nuclear son similares a las condiciones fisiológicas. Cuando estas células pasan por el sistema de detección, los glóbulos blancos se someten al método de impedancia eléctrica (medición del volumen celular) y al método de conductividad por radiofrecuencia (. (detección combinada de núcleos celulares y densidad de partículas) dividió las células en tres grupos: linfocitos, monocitos y neutrófilos. ② Dos sistemas de detección de eosinófilos y células alcalinas: agregue un agente hemolítico especial a la solución de suspensión celular, excepto los eosinófilos y las células alcalinas, otras células se disuelven o encogen y luego se analizan las células que permanecen intactas. fueron contados. ③ Sistema de detección de células inmaduras: agregue aminoácidos sulfatados a la suspensión celular. Debido a la diferencia en la ocupación, se unen más aminoácidos a las células inmaduras que a las células maduras y son resistentes a los agentes hemolíticos. Cuando se agregan agentes hemolíticos, las células maduras. Se disuelven para el recuento sólo las células inmaduras que puedan estar presentes.
En la actualidad, el NE1500 de Japan East Asia Company y el analizador de células sanguíneas SE9000 de SYSNEX Company utilizan este método para realizar agrupaciones de quintiles. 7 Método de detección de dispersión de luz polarizada con láser de múltiples ángulos
El instrumento que utiliza esta tecnología utiliza un flujo de vaina para diluir la muestra de sangre. Después de la dilución, la estructura interna de los glóbulos blancos es similar únicamente al estado natural. las células isófilas son higroscópicas debido a sus características de higroscopicidad que resultan en ligeros cambios en la estructura celular. La hemoglobina de los glóbulos rojos se separa de las células bajo la acción de una alta presión osmótica. El agua del flujo de la vaina ingresa a los glóbulos rojos, dejando intacta la estructura de la membrana celular. Tiene el mismo índice de refracción que el flujo de la vaina y no afecta la detección de los glóbulos blancos. El instrumento detecta la luz dispersada generada por las células que pasan a través del rayo láser desde cuatro ángulos al mismo tiempo. La luz dispersada en ángulo frontal de 0° se utiliza para determinar el volumen de la celda, la luz dispersada de ángulo estrecho de 10° se utiliza para determinar la celda. Se miden los gránulos celulares internos y el citoplasma, y la dispersión de luz despolarizada de 90° separa los eosinófilos de los neutrófilos y otras células. Los analizadores de células sanguíneas CD3000 y CD3500 de ABBOTT utilizan esta tecnología.