¿Qué enfermedades son fáciles de contraer para las larvas de trucha arco iris y cómo prevenirlas?
Fuente autor: China Aquaculture Network
1 Necrosis pancreática infecciosa (NPI)
1, patógeno
El virus de la necrosis pancreática infecciosa (IPNV), Dodos y otros creen que el IPNV es un virus biARN. Las partículas de virus son icosaédricas, no envueltas y tienen 92 cápsides con un diámetro de aproximadamente 50 a 75 nm. La cápside contiene 1 gen de ARN bicatenario compuesto por dos segmentos. Es el virus de ARN más pequeño conocido entre los virus de los peces. En cloruro de cesio, la densidad de flotación del virus es 1,33 g/ml, el coeficiente de sedimentación es 0,435S, el peso molecular de las partículas del virus es 55×10s Daltons y el peso de todas las proteínas de la cápside es 50,2×106 Daltons; El ARN tiene 4,8 × 106, lo que representa el 8,7 del peso de las partículas del virus. La densidad de flotabilidad del ARN en sulfato de cesio es de 1,60 ~ 1,615 g/ml y el coeficiente de sedimentación en una solución de gradiente de sacarosa es de 14S. Las proteínas virales de platino se dividen en tres grados según su tamaño. El polipéptido más grande pesa 105.000 daltons, lo que representa el 4% del peso molecular total, y es una polimerasa unida al ARN. El péptido de tamaño mediano pesa 54.000 daltons y representa el 62% del peso total. Es la principal proteína de la cápside a partir de la cual se producen los anticuerpos. Las dos pequeñas proteínas internas pesan 365.438.000 daltons y representan 28 y 29.000 daltons respectivamente, lo que supone el 6% del peso total. Las cepas conocidas incluyen VR299, Sp, Ab, He, etc. Estas cepas difieren algo en términos de serología, susceptibilidad y patogenicidad. Según Jiang Yulin et al. (1989), el IPNV aislado en la provincia de Shaanxi, mi país, tuvo una fuerte reacción cruzada con el antisuero de la cepa IPNV-Sp en la reacción de neutralización cruzada serológica, lo que indica que se trataba de una cepa IPNV-Sp. Tong Shangliang et al. (1990) informaron que la cepa IPNV-VR 299 fue aislada de Shandong.
El virus prolifera fácilmente y aparece en líneas celulares de peces y CPE como RTG-2, PG, RI, CHSE-214, AS, BP-2, EPC. Sin embargo, cuando se inocularon en líneas celulares de peces como CAR, CLC y CO, no se produjo ECP y el título del virus también fue bajo. La temperatura de crecimiento es de 4 a 27,5 ℃; si la temperatura aumenta lentamente durante el proceso de cultivo, el virus puede crecer a 30 ℃; la temperatura de crecimiento óptima es de 15 a 20 ℃; Los virus se sintetizan y maduran en el citoplasma para formar cuerpos de inclusión. Los virus cultivados en la cepa de células RTG-2 producen nuevos virus en 5 horas a 24°C, mientras que se necesitan 8 horas para generar nuevos virus a 65438±05°C, pero la cantidad de virus producido es mayor a esta temperatura. El virus causó patología de las células RTG-2, apareciendo lesiones a 26°C 9 horas después de la infección, 20°C 18 horas después de la infección y 4°C unos días después. A 20°C, las placas, la condensación nuclear, el alargamiento celular, la separación entre sí y de la pared de la botella se pueden observar en 2 a 3 días. En las células con una fuerte capacidad antiviral, aunque los núcleos celulares se han reducido, todavía están adheridos a la pared de la botella, por lo que las placas son en su mayoría reticulares, especialmente en los bordes de las placas, donde las células sanas y las células degeneradas se mezclan entre sí. Las cepas Ab no pueden crecer en líneas celulares FHM.
IPNV no es sensible al éter ni al cloroformo, y también es muy estable al glicerol y se puede garantizar su existencia en glicerol al 50 % durante más de varios años (la cepa francesa Kerlo pierde infectividad en 3 meses a 4 °C); resistencia al pH El rango de infección es de 4 ~ 10; puede soportar altas temperaturas y puede inactivarse en solución salina fisiológica a 60 °C durante 30 minutos en agua filtrada y esterilizada a 4 °C, la infectividad se puede mantener durante más de; 5 a 6 meses en agua del grifo a 10°C. Puede almacenarse durante más de 7 meses, pero en agua no tratada con algas, el virus no se puede detectar después de 14 días. La mayoría de las plantas pueden tolerar temperaturas bajas por debajo de 20°C; almacenarse a 4°C durante al menos 4 años después de la liofilización. Pérdida de infectividad. No es sensible al ácido, con una tasa de infección de 100 después de 30 minutos en pH 3; es sensible a los álcalis, con una tasa de infección de sólo 0,01 a pH 11; El cloro, la formalina, el yodo, el ozono y el pH pueden matar los virus en una determinada concentración y tiempo.
Los virus pueden inducir interferón en células cultivadas, y la cantidad de interferón inducida por la cepa VR299 en líneas celulares FHM depende de la temperatura.
Entre 15 ℃, 20 ℃, 26 ℃ y 30 ℃, la producción de interferón a 26 ℃ es la más alta: el interferón no es sensible al calor ni al pH, no es dializable, no precipita con centrifugación a alta velocidad y su actividad se modifica fácilmente. afectado por tripsina y tripsina. ? El mercaptoetanol es resistente al ADN y a la ARNasa. Se estima que el peso molecular del interferón producido en la línea celular RTG-2 es de 94.000 daltons.
2. Los peces sensibles
populares incluyen el salmón americano, la trucha arcoíris, el tímalo, la corvina, el salmón coho, el salmón rosado, el salmón del Atlántico y el salmón Chinook. Daña principalmente a alevines y alevines de entre 14 y 70 días. Cuando la temperatura del agua está entre 10 y 12°C, el curso de la enfermedad se puede dividir en tipos agudos y crónicos. En el tipo agudo todas las personas mueren en unos pocos días, mientras que en el tipo crónico muere una persona cada día y dura mucho tiempo. Aunque el pez de 1 año también está enfermo, la condición es más leve. En general, es poco probable que los peces con una longitud total de más de 15 cm estén infectados y la mayoría de ellos son infecciones latentes.
La principal fuente de infección son los peces adultos portadores del virus, y los peces restantes pueden convertirse en portadores del virus durante años o incluso toda la vida después de la enfermedad. El IPNV se puede detectar en el riñón, el bazo, el hígado, las gónadas y las heces, siendo la tasa de detección más alta en el riñón. Además, el IPNV también se ha encontrado en 20 familias de peces, desde rotíferos hasta peces óseos, y la mayoría de los peces son normales a simple vista. El IPNV también se ha aislado de metacercarias de trematodos parásitos de moluscos, crustáceos y peces. Se detectó IPNV infeccioso en las heces de pollos, búhos, gaviotas y hurones después de que fueron alimentados artificialmente con IPNV, lo que sugiere que también pueden ser transmisores de IPN. El IPNV en agua de río y agua de pozo puede durar 10 días a 4°C y 5 días a 15°C. ¿Estás en línea? En agua de mar a una temperatura de 4 a 10°C, casi no hay pérdida de infectividad después de 4 a 10 semanas, y 99 después de 5 a 6 meses después de 5 semanas de secado en interiores, todavía queda una pequeña cantidad de infectividad, por lo que ambas aguas; y el aire pueden ser medios de transmisión. El IPNV se puede transmitir verticalmente a través de huevos u horizontalmente a través de heces, orina y secreciones de gónadas de peces enfermos vertidos al agua. Infección a través de las mejillas y la boca. La duración del período de incubación está relacionada con el tamaño del pez y la temperatura del agua. Cuanto más grandes sean las especies de peces, más largo será el período de incubación. Dentro del rango de temperatura adecuado para el crecimiento del virus, cuanto mayor sea la temperatura, más corto será el período de incubación. Por ejemplo, cuando la temperatura del agua es de 12 a 14°C, los alevines desarrollarán síntomas y comenzarán a morir al mismo tiempo entre 5 y 8 días después de la infección, y los peces más grandes comenzarán a morir en 10 a 12 días.
IPN apareció por primera vez en Canadá y Estados Unidos, y luego se hizo popular en Dinamarca, Francia, Grecia, Checoslovaquia, Reino Unido, Alemania, Noruega, Italia, Yugoslavia, Suecia, Japón y otros países. En la década de 1980, la IPN se introdujo en Corea del Norte, la provincia china de Taiwán, el noreste de China, Shaanxi, Shandong, Gansu y otros lugares. Es el primer objeto de cuarentena de puerto pesquero.
3. Síntomas
Los peces enfermos pierden el equilibrio al nadar, a menudo nadan verticalmente y se hunden rápidamente hasta el fondo del agua. Después de esperar un tiempo, repiten la acción de nadar anterior hasta morir. Generalmente, sólo se necesitan de 1 a 2 horas desde el comienzo de la natación hasta la muerte. Los peces enfermos que han perdido la capacidad de nadar en charcos con agua se reúnen en las redes de bloqueo de las zanjas de drenaje. Los peces enfermos tienen el color del cuerpo negro, ojos saltones, abdomen hinchado, congestión en el abdomen y la base de las aletas, branquias rojas y, a menudo, tienen una mucosidad lineal en el ano. A veces, cuando se abre el vientre del pez, se pueden observar ascitis, sangrado pilórico y palidez anormal del hígado, el bazo, los riñones y el corazón; generalmente no hay comida en el tracto digestivo, pero hay moco de color blanco lechoso o amarillo claro, que por lo general no se coagula en formalina del 5 al 10% y tiene valor diagnóstico.
4. Lesiones
La característica más evidente es la necrosis pancreática. Las vesículas pancreáticas, los islotes y casi todas las células son anormales. La mayoría de las células eran necróticas, especialmente por condensación y fragmentación nuclear, y algunas células tenían cuerpos de inclusión en el citoplasma. Se confirmó mediante microscopía electrónica que las inclusiones intracelulares y sus análogos observadas por Kudo et al. (1973) bajo microscopía óptica eran lisosomas celulares, que incluían no sólo partículas de virus sino también orgánulos desnaturalizados. El IPNV existe en el citoplasma de las células acinares pancreáticas, los hepatocitos y las células de Kupffer. Las partículas virales también penetran en el páncreas en el citoplasma de los macrófagos y las células errantes. El tejido adiposo que rodea el páncreas también se vuelve necrótico y los músculos esqueléticos se vuelven vidriosos. En la etapa tardía de la enfermedad, el tejido hematopoyético y los túbulos renales de los riñones también degeneran y se necrosan, el hígado sufre necrosis local y la mucosa del tracto digestivo se degenera, se necrosa y se cae.
5. Diagnóstico
(1) Diagnóstico preliminar en función de los síntomas y la situación epidémica. Primero, observe si el pez enfermo es susceptible a la necrosis pancreática infecciosa y luego haga un juicio preliminar basado en el comportamiento de natación del pez enfermo y sus síntomas internos y externos únicos. Los órganos internos y el útero de los peces enfermos suelen ser de color pálido, especialmente cuando no hay comida en los intestinos, pero hay muchas sustancias mucosas que no se solidifican en formalina del 5 al 10%, lo que puede aumentar la precisión del diagnóstico. de esta enfermedad. Al mismo tiempo, se debe investigar la fuente de los huevos y las especies de peces, las condiciones de las fuentes de agua y el historial de enfermedades.
(2) La necrosis pancreática se puede encontrar mediante un examen patológico, pero es difícil de diagnosticar si el pez enfermo tiene lesiones renales, hepáticas e intestinales como NHI y VHS, y la NPI no tiene tracto digestivo granular. Células como el fenómeno de necrosis.
(3) Utilice la línea celular RTG-2 para aislar el virus y observar el CPE para un diagnóstico adicional. Pero cuando se produce una infección mixta, como la infección mixta por IPN y VHS, se inocula en la línea celular RTG-2. Después de 24 horas, el CPE es similar al IPN y después de 48 horas, el CPE es similar al VHSV. En este momento, es necesario realizar pruebas de sensibilidad para éter, glicerol y pH. IPNV en la línea celular RTG-2 muestra un CPE obvio a pH 7,2 ~ 7,6. Es insensible al éter y estable al glicerol. Por otro lado, el VHSV en la línea celular RTG-2 no mostró o no mostró CPE a pH 7,2, mostró CPE evidente a pH 7,6, fue sensible al éter dietílico y perdió infectividad en glicerol al 50%.
(4) Diagnóstico final
① Prueba de neutralización, debido a la gran cantidad de serotipos de IPNV, es necesario utilizar antisueros multivalentes para el diagnóstico. El Instituto de Investigación de Enfermedades de los Peces Orientales de Estados Unidos ha preparado suero anti-IPNV multivalente (7 cepas).
②El método de fijación del complemento utiliza antígenos solubles de virus conocidos para determinar si hay anticuerpos correspondientes en el suero de peces enfermos. Es menos específico que la prueba de neutralización, pero los antígenos de fijación del complemento aparecen antes y desaparecen rápidamente. , Puede utilizarse para el diagnóstico precoz.
③El método de anticuerpos fluorescentes directos puede detectar virus de forma rápida y precisa en tejidos y células cultivadas. Puede detectarse en células RTG-2 cultivadas a 20°C durante 3 a 4 horas, y el serotipo Pi no provocará reactividad cruzada cuando se almacene en la misma planta.
(4) El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), durante la temporada de inicio, puede confirmar si la epidemia es causada por el IPNV dentro de las 24 horas y puede determinar si los huevos de pescado están contaminados por el IPNV dentro de las 48 horas. horas;? En los peces adultos que no parecen cansados, la presencia de anticuerpos anti-IPNV en la sangre se puede detectar en aproximadamente 24 horas. Este método tiene las ventajas de una velocidad rápida y alta sensibilidad. Tiene las ventajas de una gran especificidad y un funcionamiento sencillo. El Grupo de Virus Yubingbao del Instituto de Hidrobiología de la Academia de Ciencias de China ha preparado un kit.
5. Métodos de prevención y control
(1) Fortalecer las medidas preventivas integrales, implementar estrictamente el sistema de cuarentena y no utilizar IPNV para exportar o transportar huevas, alevines, alevines, y reproductores.
(2) Cuando se detecta una epidemia, los peces deben desinfectarse completamente y el estanque de peces debe desinfectarse con cloro eficaz en una concentración de 200 × 10-6 a 8 ~ 10 °C; use 2 formalina. Desinfecte con Lin o solución de hidróxido de sodio (pH 12,2) durante 10 minutos.
(3) Establecer una base para criar especies de peces libres de IPNV y prohibir la mezcla de otras especies de peces que no hayan sido puestas en cuarentena.
(4) Utilice una solución acuosa de yodóforo (povidona yodada, PVP-I, nombre comercial: 10 solución compuesta de yodo pinive) para desinfectar los huevos de tricomas, la concentración es 50 × 10-6 y el baño medicinal. el tiempo es de 15 minutos; si el valor del pH del agua es mayor, la concentración debe ser (60 ~ 100) × 10-6. Los alevines nacidos de huevos de peces tratados de esta manera a veces todavía tienen IPN, y el IPNV aún puede estar en los huevos o en ciertas partes de la superficie del huevo que son difíciles de alcanzar con la solución farmacológica.
(5) En la etapa inicial de la enfermedad, la PVP-I se mezcla y se alimenta. El yodo disponible por kilogramo de pescado por día es de 1,64 ~ 1,91 g. La alimentación continua durante 15 días puede reducir la mortalidad.
(6) Cuando la temperatura del agua es inferior a 65438 ± 00 ℃, la aparición y mortalidad de NPI generalmente se pueden reducir.
Por lo tanto, los peces enfermos se pueden criar en un ambiente de baja temperatura del agua para controlar el desarrollo de la enfermedad. Los peces juveniles susceptibles también se pueden criar en agua de baja temperatura durante la temporada de la enfermedad y luego regresar después del período de la enfermedad. difícil de promocionar.
(7) El ruibarbo y otras hierbas medicinales chinas se pueden consumir mezclados, lo que tiene un efecto preventivo.
(8)2 500 larvas de 0,4g fueron alimentadas con 6mg de fitohemaglutinina dos veces, con un intervalo de 65438±05 días. Se informa que tiene cierto efecto en la prevención de la NPI.
Dos. Necrosis hematopoyética infecciosa (NHI)
1, patógeno
El virus de la necrosis hematopoyética infecciosa es un rabdovirus. ARN monocatenario con forma de bolita, tamaño 120 ~ 300 × 60 ~ 100 nm, sensible al éter, glicerol y cloroformo, recubierto con una densidad flotante (sulfato de cesio) de 1,59 g/cm3 (este artículo ha sido visitado 5216 veces); .