Introducción a la vacuna contra la fiebre tifoidea
Contenido 1 Pinyin 2 Referencia en inglés 3 Regulaciones para la fabricación y prueba de vacunas contra la tifoidea 3.1 Bacterias 3.2 Fabricación de vacunas 3.3 Pruebas del producto terminado 3.4 Almacenamiento y período de validez 4 Instrucciones de uso de las vacunas contra la tifoidea 4.1 Efectos farmacológicos de las vacunas contra la tifoidea 4.2 Indicaciones 4.3 Objetos de vacunación 4.4 Uso 4.5 Contraindicaciones 4.6 Reacciones adversas de la vacuna contra la tifoidea 4.7 Precauciones 4.8 Almacenamiento 4.9 Especificaciones 5 Referencias 1 Pinyin
shāng hán jūn miáo 2 Referencia en inglés
vacuna contra la tifoidea
typhobacterin 3 Procedimientos de fabricación y prueba de la vacuna contra la tifoidea
[1] Esta cepa se cultiva con bacterias tifoideas y luego se toma el césped bacteriano para hacer una suspensión, la cual se esteriliza con formaldehído y se esteriliza con fosfato. La solución salina tamponada se diluye para contener 300 millones de bacterias por ml. Se utiliza para prevenir la fiebre tifoidea. 3.1 Bacterias
1.1 Fuente de las cepas
Las cepas utilizadas para fabricar las vacunas contra la fiebre tifoidea y el suero de diagnóstico utilizado para probar las cepas deben obtenerse de China Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Distribuido o aprobado por el Product Testing Institute.
1.2 Identificación de la cepa bacteriana
Para determinar la cepa bacteriana se puede utilizar caldo agar, agar Martin u otros medios de cultivo adecuados con pH de 7,2 a 7,4.
1.2.1 Características del cultivo
Las cepas utilizadas para producir las vacunas deben tener características morfológicas, culturales y bioquímicas típicas.
1.2.2 Prueba de aglutinación en suero
Utilizar el cultivo incubado a 37°C durante 18 a 20 horas y diluirlo con solución salina tamponada con fosfato para contener 600 millones de bacterias/ml, y diagnosticar con bacterias tifoideas. Para la prueba de aglutinación cuantitativa, el suero se mezcla bien y se deja a 37°C durante la noche. La dilución más alta del suero que muestra aglutinación (+) a simple vista es el título de la reacción de aglutinación. El valor de aglutinación no debe ser inferior a la mitad del valor original del suero. Cuando se utiliza el suero tifoideo Vi y O juntos para la prueba de aglutinación, debe aglutinarse con el suero Vi pero no con el suero O, o solo tener una aglutinación baja.
1.2.3 Prueba de toxicidad
Utilizar cultivo en agar cultivado a 37°C durante 12 a 16 horas y diluirlo con solución salina fisiológica a 600 millones/ml, 300 millones/ml y 150 millones/ml y 75 millones/ml de concentraciones iguales de solución bacteriana (la dilución se puede cambiar o aumentar según la virulencia de la cepa). Cada dilución de la suspensión bacteriana se inyectó por vía intraperitoneal en ratones que pesaban de 14 a 16 g, al menos 5 ratones, cada uno con 0,5 ml, y se observaron durante 3 días. La dosis mínima que hace que todos los ratones mueran dentro de los 3 días posteriores a la infección es 1 dosis letal (LD), y 1 LD no debe exceder los 150 millones de bacterias.
1.2.4 Prueba de toxicidad
Suspender el cultivo de agar cultivado a 37 ℃ durante 18 a 20 horas en solución salina tamponada con fosfato y calentarlo a 56 ℃ durante 1 hora (u otro método). de esterilización). Sin conservantes añadidos. Después de pasar la prueba de esterilización, diluir a 3 concentraciones de 60, 30 y 1,5 mil millones de bacterias por ml. La suspensión bacteriana de cada concentración se inyecta por vía intraperitoneal con 0,5 ml en 5 ratones que pesan entre 15 y 18 g. Observar durante 3 días e inyectar a 7,5 todos los ratones. con 100 millones de bacterias deberían sobrevivir, pero 3 de cada 5 ratones inyectados con 1.500 millones de bacterias pueden morir.
1.2.5 Prueba de inmunidad
Realizar de acuerdo con el ítem 1.2.5 del “Reglamento de Fabricación y Verificación de Vacunas Triple Bacteria Tifoidea y Paratifoidea A y B”.
1.2.6 Prueba de antigenicidad
Seleccione al menos 3 conejos sanos que pesen aproximadamente 2 kg e inyecte por vía intravenosa 3 veces la solución bacteriana utilizada en la prueba de inmunidad, 0,5 ml cada vez. La primera inyección fue de 700 millones de bacterias, la segunda inyección fue de 1,4 mil millones de bacterias y la tercera inyección fue de 2,1 mil millones de bacterias, con un intervalo de 7 días entre cada vez. Recoja sangre de 10 a 14 días después de la última inyección para realizar una prueba de aglutinación cuantitativa para determinar el título. El título de aglutinación de 2/3 del suero de conejo no es inferior a 1:12800, lo que se considera calificado.
1.3 Preservación de cepas bacterianas
Las cepas bacterianas deben liofilizarse y almacenarse a 2-8 ℃
Las muestras deben tomarse después de que las cepas bacterianas se hayan liofilizado Inspeccionar según el punto 1.2. Después de pasar la inspección, se puede utilizar durante 3 años. En el futuro, todas las características deben inspeccionarse antes de cada producción. Aquellos que pasen la inspección pueden continuar usándolo durante 2 años. 3.2 Producción de vacunas
Se deben seleccionar dos cepas para la producción de la vacuna contra la fiebre tifoidea.
2.1 Bacterias
Después de abrir las cepas liofilizadas, se debe comprobar la forma, la pureza y la prueba de aglutinación en porta (incluido el uso de suero Vi para la reacción de aglutinación vítrea). prueba, puede ser En uso, cada cepa liofilizada abierta no debe exceder las 6 generaciones para la producción.
2.2 Medio de producción
Utilizar agar Martin o agar caldo con un pH de 7,2 a 7,4 u otro medio adecuado.
2.3 Preparación de la solución madre
2.3.1 Inoculación
Se puede utilizar la inoculación y, después de la inoculación, incubar a 37 °C durante 18 a 24 horas.
2.3.2 Recolección
Los frascos deben inspeccionarse uno a uno antes de su recolección, y aquellos que contengan bacterias extrañas deben desecharse. El césped bacteriano se raspó y se suspendió en solución salina tamponada con fosfato.
2.3.3 Prueba de bacterias puras
Después de recolectar la solución original, se deben tomar muestras frasco por frasco e inocularlas en 1 tubo de agar inclinado, e incubarlas a 37°C durante 2 días y 24-26°C durante 1 día. Si hay impurezas, se debe descartar el crecimiento bacteriano.
2.3.4 Esterilización
Añadir solución de formaldehído que no exceda el 1,1%±0,1% (ml/ml) a la solución original para esterilización. La solución original después de agregar el fungicida debe almacenarse a 37°C por no más de 7 días y luego almacenarse entre 2 y 8°C.
2.3.5 Prueba de esterilidad
Se debe tomar una muestra de la solución original que haya pasado la prueba de bacterias puras e inocularla en un tubo de medio de tioglicolato sin agar y en un tubo de agar inclinado ordinario, y colocado en 37 Incubar a ℃ durante 5 días Si hay crecimiento de esta bacteria, la cantidad de cultivo se puede aumentar y volver a analizar si hay crecimiento de otras bacterias, se debe descartar.
2.3.6 Fusión de soluciones originales
Las soluciones originales que han pasado la prueba de esterilidad se filtran y fusionan según diferentes cepas o diferentes fechas de fabricación. Después de combinar, no se debe agregar más del 0,5% (g/ml) de fenol u otros conservantes adecuados y almacenar a 2-8°C.
2.4 Prueba de la solución original
2.4.1 Examen microscópico
La forma de las bacterias debe ser normal y estar libre de bacterias extrañas.
2.4.2 Prueba de aglutinación
Realizar la prueba de aglutinación en la solución original y el suero correspondiente, y el título de aglutinación no debe ser inferior a la mitad del título del suero original.
2.4.3 Prueba de esterilidad
Realizar de acuerdo con los “Procedimientos de prueba de esterilidad para productos biológicos”.
2.4.4 Determinación de la concentración
La concentración debe determinarse de acuerdo con los estándares chinos de turbidez bacteriana en conjunto con el departamento de inspección de calidad.
2.4.5 Prueba de inmunidad
Una vez que la solución original pase la prueba de esterilidad, se realizará en conjunto con el departamento de inspección de calidad. El número de lotes de muestreo no debe ser inferior a. 1/5 de los lotes de producción. El método es el mismo que el 1.2.5, excepto que se utilizan al menos 15 ratones en cada grupo y el 60% de los ratones inmunes están protegidos para sobrevivir.
2.5 Almacenamiento de la solución original
La solución original debe almacenarse entre 2 y 8 ℃. La solución original no deberá ser inferior a 4 meses desde la fecha de recolección hasta el momento en que se utiliza para la dilución de la vacuna, y el período de almacenamiento será de 2 años y medio a partir de la fecha de recolección.
2.6 Dilución de la vacuna
2.6.1 Mezcla de la solución madre
Antes de la dilución, las soluciones madre preparadas a partir de diferentes cepas deben mezclarse en cantidades iguales según el número de bacterias, pero cada vez se permite que la cantidad de bacterias agregadas a cada cepa y la cantidad de bacterias que se deben agregar aumenten o disminuyan entre las dos cepas dentro de un rango del 40% bajo el principio de que la cantidad total de bacterias permanece sin cambios. .
2.6.2 Dilución de la vacuna
Para diluir la vacuna, utilice solución salina tamponada con fosfato que contenga entre un 0,25% y un 0,5% (g/ml) de fenol u otros conservantes adecuados.
2.6.3 Concentración de vacuna
Cada ml contiene 300 millones de bacterias tifoideas
2.7 Lotes de vacunas
En un mismo grupo Cada frasco de Se considera un solo lote la vacuna en la que la solución original se diluye con el mismo lote de diluyente el mismo día. Los diluidos en tanques grandes se deben dividir en lotes según los tanques grandes y dividir en sublotes según la máquina llenadora.
2.8 Verificación
Después de la dilución, se deben tomar muestras de cada lote botella por botella para realizar pruebas de esterilidad y determinar el contenido de conservante (excepto cuando se diluye en botellas grandes).
2.9 Embalaje
Después del embalaje, se debe tomar una muestra de cada sublote y enviarlo al departamento de inspección de calidad para la inspección del producto terminado. 3.3 Verificación del producto terminado
3.1 Inspección física y química
La vacuna debe ser una suspensión de color blanco lechoso con un valor de pH de 6,8 a 7,4. No debe haber grumos bacterianos ni materias extrañas que. no puede ser destrozado. El contenido de fenol debe ser del 0,25% al 0,5% (g/ml).
3.2 Forma y pureza de las bacterias
La tinción y el examen microscópico deben mostrar que se trata de bacilos Gram negativos. Observe al menos 10 campos visuales, y no debe haber más de 10 bacterias atípicas (bacilos lineales, gruesos o teñibles) en cada campo visual en promedio, y no debe haber bacterias diversas.
3.3 Prueba de esterilidad
Realizar de acuerdo con los “Procedimientos de prueba de esterilidad para productos biológicos”.
3.4 Prueba de seguridad
3.4.1 Prueba de toxicidad
Utilice 5 ratones sanos que pesen entre 18 y 20 gy inyecte por vía intraperitoneal 0,5 ml de vacuna en cada ratón. Utilice 2 conejillos de indias sanos que pesen entre 350 y 450 g, inyecte por vía intraperitoneal 1,5 ml de vacuna y observe durante 7 días. No debe haber muertes.
3.4.2 Prueba de conservante
Utilice 2 ratones sanos que pesen entre 18 y 20 g, e inyecte por vía subcutánea 0,5 ml de vacuna a cada ratón, utilizando fenol como conservante. Los ratones tendrán temblores. síntomas, pero no debe exceder la media hora. Deben permanecer en observación durante 7 días sin absceso local ni muerte. 3.4 Almacenamiento y período de validez
Debe almacenarse entre 2 y 8 ℃. El período de validez es de un año y medio a partir de la fecha de dilución. Si la solución original se diluye después de haber estado almacenada durante más de 1 año, el período de validez debe acortarse en consecuencia (el período de validez total no excederá los 2 años y medio a partir de la fecha de recolección de la solución original). 4 Instrucciones de uso de la vacuna contra la tifoidea
Después de cultivar esta cepa con bacterias tifoideas, tome el césped bacteriano para hacer una suspensión, agregue formaldehído para esterilizarlo y dilúyalo con solución salina tamponada con fosfato. Se utiliza para prevenir la fiebre tifoidea.
Este producto es una suspensión de color blanco lechoso que contiene conservante de fenol y no debe contener materias extrañas ni coágulos que no se puedan agitar. 4.1 Efectos farmacológicos
Esta cepa se cultiva por separado con Bacillus tifoideo y paratifoideo A y B. El césped bacteriano se esteriliza con formaldehído y se diluye con tampón fosfato para producir una vacuna muerta. Después de la inoculación, el cuerpo produce **. *Respuesta inmune humoral. Este producto tiene un 70% de protección contra la fiebre tifoidea. La inmunidad aparece un mes después de la vacunación y puede durar de 1 a 2 años. Se utiliza para la prevención de la fiebre tifoidea y paratifoidea A y B. 4.2 Indicaciones
Para la prevención de la fiebre tifoidea. 4.3 Destinatarios de la vacunación
Se utiliza principalmente para trabajadores del ejército, puertos, obras de construcción a lo largo de vías férreas, alcantarillado, heces, personal de eliminación de basura, industria de catering, personal médico y de prevención de epidemias y residentes del agua, o personas en zonas donde la enfermedad es endémica. 4.4 Uso
1. La piel en el punto de unión del músculo deltoides en el lado lateral de la parte superior del brazo se desinfecta y luego se inyecta por vía subcutánea.
2. Quienes se inyectan esta vacuna por primera vez deben inyectarse 3 veces, con un intervalo de 7 a 10 días entre cada vez. La dosis de la inyección es la siguiente:
De 1 a 6 años: 0,2 ml para. la primera inyección, 0,3 ml para la segunda inyección y 0,3 ml para la tercera inyección. Aguja 0,3 ml.
Mayores de 6 años a 14 años: 0,3ml para la primera toma, 0,5ml para la segunda toma y 0,5ml para la tercera toma.
Mayores de 14 años: La primera inyección es de 0,5ml, la segunda inyección es de 1,0ml y la tercera inyección es de 1,0ml.
La dosis de refuerzo es la misma que la tercera dosis. 4.5 Tabúes
1. Fiebre, hipertensión severa, enfermedades cardíacas, hepáticas, renales y tuberculosis activa.
2. Mujeres embarazadas, menstruación y lactancia.
3. Aquellos con antecedentes de reacciones alérgicas. 4.6 Reacciones adversas
Las reacciones adversas son numerosas y evidentes, lo que puede deberse a que la vacuna contiene endotoxinas y sustancias alergénicas. Habrá enrojecimiento, hinchazón, infiltración, dolor y linfangitis en el lugar de la inyección. Las reacciones sistémicas incluyen fiebre, dolor de cabeza, malestar, náuseas, vómitos, etc. Algunas personas son bastante graves y pueden afectar su trabajo. Está contraindicado en personas con fiebre, hipertensión, enfermedades cardíacas, hepáticas y renales, tuberculosis activa, mujeres embarazadas y lactantes.
4.7 Notas
1. Agite bien antes de usar. Si hay coágulos u objetos extraños en el frasco que no se pueden sacudir, o si la ampolla está rota o si ha sido congelada anteriormente, no se puede utilizar.
2. Se debe preparar epinefrina 1:1000 para primeros auxilios en caso de shock. 4.8 Almacenamiento
Almacenar en un lugar oscuro a 2-8 ℃. 4.9 Especificaciones
Las vacunas contra la fiebre tifoidea se pueden dividir en los siguientes tipos según el método de inoculación y sus componentes: 1. Vacuna contra la fiebre tifoidea inactivada (Vacuna contra la fiebre tifoidea) La vacuna contra la fiebre tifoidea inactivada generalmente se elabora a partir de cepas apropiadas de Salmonella typhi, como Ty2, después del procesamiento. La utilizan principalmente trabajadores de laboratorio relevantes y turistas que planean ir a áreas endémicas. 2． Vacuna contra las bacterias tifoidea y paratifoidea A y B (Vacuna triple contra la tifoidea y paratifoidea A y B).