¿En qué circunstancias se debe realizar la inmunohistoquímica?
Inmunohistoquímica.
Introducción:
La inmunohistoquímica es el principio básico de la reacción inmunológica-antígeno-anticuerpo aplicada, es decir, el principio de unión específica del antígeno y el anticuerpo. El reactivo cromogénico (fluoresceína, enzimas). , iones metálicos, isótopos) se utilizan para determinar los antígenos (polipéptidos, proteínas) en las células de los tejidos y realizar investigaciones de localización, cualitativas y cuantitativas sobre ellos, lo que se denomina inmunohistoquímica o inmunocitoquímica.
Principios básicos:
La unión entre anticuerpos y antígenos es muy específica, y la inmunohistoquímica aprovecha este principio. Primero, se extraen sustancias químicas de los tejidos o células como antígenos o haptenos, y luego se obtienen anticuerpos específicos inmunizando animales, y luego los anticuerpos se utilizan para detectar las mismas sustancias antigénicas en tejidos o células. Dado que el complejo de antígeno y anticuerpo es incoloro, es necesario utilizar métodos histoquímicos para visualizar los sitios de unión del antígeno y el anticuerpo para lograr una investigación cualitativa, de localización o cuantitativa de antígenos desconocidos en tejidos o células.
Clasificación:
Los principios de estos métodos inmunohistoquímicos comúnmente utilizados son los siguientes:
1. Tecnología de citoquímica de inmunofluorescencia
Conocido El anticuerpo se marca con fluoresceína, que se utiliza como sonda para detectar el antígeno correspondiente en células o tejidos y se observa bajo un microscopio de fluorescencia. Cuando la fluoresceína del complejo antígeno-anticuerpo se irradia con luz de excitación, emitirá fluorescencia de una determinada longitud de onda, de modo que se pueda determinar la ubicación o cuantificación del antígeno en el tejido.
2. Técnica de citoquímica inmunoenzimática
Actualmente es la técnica más utilizada en la investigación de inmunohistoquímica. El principio básico es que el anticuerpo marcado con enzima primero interactúa con el tejido o las células, y luego se agrega el sustrato enzimático para generar un producto o partículas insolubles coloreados con una cierta densidad electrónica. Se localiza el antígeno correspondiente en las células o tejidos. detectado mediante un microscopio óptico o un microscopio electrónico.
3.? Tecnología de oro inmunocoloidal
El oro coloidal se utiliza para marcar anticuerpos primarios, anticuerpos secundarios u otras moléculas que pueden unirse específicamente a inmunoglobulinas (como la proteína A de Staphylococcus) como sondas para detectar antígenos en tejidos o células. , investigación posicional o cuantitativa. Debido a su alta densidad electrónica, el oro coloidal se utiliza a menudo para estudios de localización de etiquetas únicas o múltiples en microscopía inmunoelectrónica.