Pasos específicos para preparar eosina y azul de metileno

(1) Preparación de la solución de tinte de Wright:

Colorante Wright 830 gramos o 1 gramo

Metanol (AR) 500 ml o 600ml.

○Péselo y séquelo primero (póngalo en una incubadora para que se seque durante la noche), póngalo en un mortero, use una barra de leche para romper suavemente el tinte en polvo y luego muélalo hasta que no pueda Ya no escuche el sonido de molienda, el sonido de las semillas de sésamo, luego agregue un poco de glicerina o metanol para disolver y muela, de modo que el tinte muestre un brillo de "espejo unidireccional" en la tina de leche y no haya deposición. partículas de tinte en polvo.

○Agregue una gran cantidad de metanol y muélalo hasta obtener una superficie de espejo, déjelo reposar por un tiempo, vierta el líquido superior en una botella de almacenamiento limpia (preferiblemente una botella de metanol vacía), agregue metanol y muela Repita varias veces, hasta que el mortero. Cuando se acabe el tinte y el metanol de la botella, agite bien y selle la botella.

○Conservar en un lugar oscuro a temperatura ambiente. Cuanto mayor sea el tiempo de almacenamiento, mejor se disolverá y descompondrá el tinte. Generalmente, es mejor almacenarlo durante más de 3 meses.

(2) Amortiguación:

●Función de amortiguación:

○El teñido es muy sensible a la concentración de iones de hidrógeno. Se observó un cambio de pH para disociar nuevamente el complejo proteico con el colorante.

○El tampón debe mantener un cierto valor de pH para estabilizar la tinción. El valor de pH del PBS es generalmente ***~6,8.

○Los colorantes básicos pueden neutralizar los grupos ácidos en la solución tampón, mientras que los colorantes ácidos pueden neutralizar las bases en la solución tampón para mantener constante el valor del pH.

●Preparación tampón (pH 6,4~6,8, débilmente ácido):

Fórmula 1: Fórmula 2:

1% dihidrogenofosfato de potasio 30 ml /15 de potasio fosfato dihidrógeno 73,5 ml

1% hidrogenofosfato disódico 20 ml/15 hidrogenofosfato disódico 26,5 ml

Se añade H2O (fresco) a 1000 ml.

Conservar a temperatura ambiente y protegido de la luz, y sellar la boca del frasco para evitar la contaminación por moho. Si hay contaminación, se debe desechar.