¿Qué entorno se requiere para las pruebas de endotoxinas?
Método de gel
Método de turbidez dinámica
Método de turbidez de punto final
Método cromogénico dinámico
Método del color final
El sistema del método del gel es un método para la detección cualitativa o semicuantitativa de endotoxinas utilizando el principio de reacción de aglutinación entre el reactivo de Limulus y la endotoxina. Las especificaciones comunes del reactivo en gel Limulus son 0,1 ml/tableta o 0,5 ml/pieza o más. Debe calentarse y reconstituirse con agua cruda (agua para prueba de endotoxinas bacterianas) antes de su uso. El método del gel determina el punto final de la reacción observando si se forma un gel. Este método es simple y económico de operar, no requiere equipo de medición especial y puede usarse para determinaciones cualitativas o semicuantitativas.
La turbidimetría dinámica, la turbidimetría de punto final, el método cromogénico dinámico y el método cromogénico de punto final son los cuatro métodos para la detección cuantitativa de endotoxinas.
De acuerdo con el principio de detección, tanto el método de turbidez de punto final como el método de turbidez dinámica pertenecen al método de turbidez. El método de turbidez es un método para determinar el contenido de endotoxina detectando el cambio en la turbidez durante la reacción entre el reactivo de Limulus y la endotoxina. No se encontró ningún producto mediante el método turbidimétrico de punto final. El método de turbidez dinámica (también llamado método de turbidez dinámica) es un método que detecta el tiempo de reacción requerido para que la turbidez de una mezcla de reacción aumente a una absorbancia predeterminada, o detecta la tasa de aumento de turbidez.
Tanto el método colorimétrico de punto final como el método colorimétrico dinámico pertenecen al método de matriz colorimétrica. El método de matriz cromogénica es un método que utiliza la cantidad de cromóforo liberado por la coagulasa producida durante la reacción entre el reactivo de Limulus y la endotoxina para determinar el contenido de endotoxina. También se denomina método colorimétrico. En 2005, Xiamen Limulus Reagent Factory lanzó un kit de reactivos de Limulus que utiliza el tetrapéptido de Limulus como sustrato cromogénico. Tiene una fuerte capacidad antiinterferente, una sensibilidad de hasta 0,005 EU/ml y su calidad ha alcanzado el nivel líder internacional. En la actualidad, más de 500 unidades han utilizado el conjunto de herramientas y algunas unidades también han publicado los documentos correspondientes. Hay algunos productos extranjeros en China, pero los precios son mucho más altos que los de los reactivos nacionales y el ciclo de entrega es largo.
Si solo necesita detectar el límite de endotoxinas de la muestra, puede elegir el reactivo gel limulus. Midiendo el límite de endotoxinas y el factor de dilución efectivo máximo, realice una prueba de interferencia en la muestra para determinar el. Sensibilidad del reactivo de Limulus.
Si necesita determinar cuantitativamente el contenido de endotoxinas en una muestra, debe elegir un kit de prueba de Limulus de matriz cromogénica o un reactivo de prueba de Limulus de turbidez dinámica.
El método turbidimétrico dinámico y el método cromogénico dinámico requieren un fotómetro dinámico con un sistema de incubación y un software de soporte, como el probador limulus de microplacas ELx808 y el software TALgent o Gen5. El método de turbidez dinámica y el método colorimétrico dinámico son simples, de un solo paso y tienen un amplio rango lineal.
El método cromogénico de punto final requiere la detección con un lector de microplacas o espectrofotómetro visible. El uso de un instrumento de etiquetado de enzimas junto con un sistema de incubación, como el probador limulus de microplacas ELx808, puede reducir el consumo de reactivos.