¿Qué es el modelo de ligadura del nervio espinal?
Relación entre la activación de los astrocitos y el comportamiento del dolor
三
Zhao? ¿rojo? ¿Dónde está el jengibre? ¿Sol? ¿dinero? ¿Sun Xin Yafei? ¿Liu Fengyu? ¿Shi Yushun? ¿Diez mil? Sí △
(Departamento de Neurobiología, Instituto de Neurociencia, Universidad de Pekín, Laboratorio Clave de Neurociencia, Ministerio de Educación, Beijing 100083)
¿Resumen? Objetivo: Estudiar la relación entre la activación de los astrocitos de la médula espinal y el comportamiento del dolor en ratas modelo de ligadura del nervio espinal L5. Método:
44 ratas SD macho 180 ~ 220? g, divididos aleatoriamente en 4 grupos: grupo de operación simulada, ligadura del nervio espinal durante 1 día, 3 días y 7 días respectivamente.
¿El uso conductual de Feng? Frey. Se midieron los cambios en el umbral de contracción de 50 pies de ratas en los puntos de tiempo anteriores (?n?=?8)?, y se observaron los astrocitos mediante inmunohistoquímica para observar su marcador específico GFAP (?n? =?3)?. resultado:? (1) Nódulo del nervio espinal
Un día después de la ligadura, los animales desarrollaron hipersensibilidad al dolor mecánico. El comportamiento del dolor fue estable y persistente los días 3 y 7; no hubo cambios significativos en el grupo simulado.
(2) A los 65±438 días después de la cirugía, los astrocitos se activaron en el asta dorsal de la médula espinal del lado ligado. Se observó una fuerte activación de los astrocitos los días 3 y 7.
Respuesta, también se puede observar una ligera activación en el grupo de operación simulada. (3) Después de la ligadura del nervio espinal, los astrocitos se activan y el grado de activación es similar al de la ligadura del nervio espinal.
El desarrollo y mantenimiento de conductas dolorosas están estrechamente relacionados. Conclusión: La activación de los astrocitos en el asta dorsal de la columna puede desempeñar un papel en el dolor neuropático.
Uso.
¿Palabras clave? Astrocitos; proteína ácida glial; dolor neuropatológico; ligadura del nervio espinal
¿Ese? ¿relación? ¿entre? ¿eso? SP? ¿INAL? ¿Astrocitos? ¿activación? Entonces qué. Nervioso 2
¿Enfermo? ¿papá? ¿existir? ¿Comportamiento? ¿seguir? ¿ING? ¿Columna vertebral? ¿nervio? ¿yo? IGACIÓN
Zhao? ¿Hong? j? mantener la cabeza en alto? Yu2Qiu,? ¿Sol? ¿Dónde está el dinero? ¿Sol? Yan2Ni,? ¿yo? ¿IU? ¿Viento y lluvia? ¿Shh? ¿I? ¿Yu2Shun? ¿Diez mil? Usted
(¿Neurociencia? ¿Investigación? ¿Instituto? ¿Y luego qué? ¿Departamento? ¿Neurobiología? ¿Universidad de Pekín? ¿Clave? ¿Laboratorio? paraNeu2
¿Rossian? ¿Ministro? de? Educación,? Beijing? 100083)
¿Resumen? Objetivo:? ¿A dónde ir? ¿investigación? ¿eso? ¿relación? ¿entre? ¿eso? sp? final? ¿Astrocitos? ¿activación? Entonces qué. Nervioso 2
¿Enfermo? ¿dolor? ¿Comportamiento? ¿existir? ¿L5? sp? final? ¿nervio? ligadura? (? SNL)? ratón. ? método:? 44?Hombre? ¿DAKOTA DEL SUR? ¿ratón? Era. ¿Dividido casualmente
? ¿convertirse en? 4?Grupo? s:? ¿Falso? ¿SNL? 1?d,? ¿SNL? 3?d? Entonces qué. ¿SNL? 7?d? ¿grupo? ¿s? ¿Mecánica animal? ¿Dolor inusual? ¿Es
representativo? ¿Disgustado? ¿Por quién? 50?pata? ¿Retiro? ¿límite? (50?PWT)? ¿Qué es eso? ¿Evaluar? ¿Qué usar? ¿Feng? Frey. ¿Trapos? (?n
=?8).? ¿usar? ¿Inmunohistoquímica? Técnica,? ¿GFAP? Era. ¿Comprobado? ¿A dónde ir? ¿evaluar? ¿eso? ¿activación? ¿de? ¿células astro2
? (?n?=?3).? resultado:? (1)?¿Eso? ¿mecánico? ¿Dolor inusual? ¿de? ¿eso? ¿izquierda? ¿posterior? ¿pata? ¿Apareció? ¿abierto? ¿día? 1?¿Después? SNL,
Y luego. ¿Continuamente? existió? ¿De donde? ¿día? 3?¿Adónde ir? ¿día? 7.? ¿No? ¿Significativo? ¿Cambiar? ¿Mecánico? ¿Dolor inusual? Era. Observar
¿Dónde? ¿Falso? grupo.
? (2)?¿Son? ¿eso? ¿PI? ¿Lado? (?lesión?lado)? ¿Columna lumbar? ¿atrás? ¿Bocina? ¿GFAP? ¿Qué es la actividad inmune? ob2
¿Entregado? ¿Dónde? ¿día? 1.? ¿este? ¿Amable? ¿de? ¿Astrocitos? ¿activación? ¿mantener? ¿feroz? ¿Dónde? ¿día? 3? Entonces qué. 7. ¿Pero qué? ¿respuesta? ¿leve? ¿En qué medida?
¿Astrocitos? ¿activación? Era. ¿Observado? ¿existir? ¿Falso? grupo. ? (3)? ¿Astrocitos? Era. ¿activación? ¿existir? ¿eso? sp? final? ¿Cable suave? ¿En
SNL? ¿ratón? ¿eso? ¿Licenciado en Ciencias? ¿de? ¿Astrocitos? ¿activación? ¿Relacionado? Está bien. ¿eso? ¿desarrollar? Entonces qué. mantenimiento? ¿de? ¿neu2
ropático? dolor. ? en conclusión:? ¿Astrocitos? ¿activación? ¿existir? ¿eso? sp? final? ¿atrás? ¿bocina? ¿Es posible? ¿pag? ¿Acostado? ¿respuesta? ¿Role? ¿existir? Dolor neurótico
.
¿Clave? ¿Palabra? Astrocitos;? ¿Pegamento? ¿Fibroso? ¿Ácido? ¿pag? ¿proteína? (GFAP)? ;? ¿Neuropatía? dolor;? ¿Esp? final? ¿nervio? Ligación
(?SNL)
3? Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (30330230, 30570566) y Fundación de Ciencias Naturales de Beijing (7052039)
△Autor para correspondencia
¿Revista China de Medicina del Dolor? ¿diario? ¿de? ¿Analgésicos? 2007,?13,?(1)?39
amp copia;? ¿1994-2007?China? ¿Académico? ¿diario? ¿electrónico? ¿publicación? casa. ? ¿todo? ¿bien? reservar. ? ki.net
El dolor neuropatológico (?neuropático?dolor) se refiere a central o externo.
¿Síndrome de dolor causado por lesión o enfermedad del sistema nervioso periférico, con dolor
espontáneo (?espontáneo?¿doloroso)? Se caracterizan por hiperalgesia (?hiperalgesia)
y hiperalgesia (?alodinia). En los últimos años, la activación de las células gliales
se ha convertido en un nuevo hito en el campo de la investigación del dolor[? 1?]?. En este experimento, L5
ligadura del nervio espinal (?sp?inal? ¿nervio? ¿ligadura? Como dios de los ratones
Medición del dolor mecánico en ratas SNL a través del modelo de dolor patológico Cambios en sensibilidad
y activación de astrocitos en el asta dorsal espinal
Explorando la activación de astrocitos en el dolor en ratas y animales con dolor neuropático
Para la relación entre Proporcionado por el Centro de animales experimentales.Sí, peso 150 ~ 180? g. Se dividen aleatoriamente en 4 grupos, respectivamente, ¿grupo protésico, ?Tianhe 3? /p>
Según el método de Jin? para hacer SNL? Las ratas fueron expuestas a hidrato de cloral (300? mg/kg,? Después de p?) anestesia, colóquelo en el abdomen
La piel es Se hace una incisión en la espalda, se separa sin rodeos el músculo paravertebral izquierdo y se ata el nervio espinal con hilo de seda número 6, hemostasia, sutura e inyección.
Los procedimientos para ratas operadas de forma simulada. similar a los de ratas quirúrgicas, pero sin ligadura de nervios. p>2. Determinación de la sensibilidad al dolor mecánico en animales
El reportero de noticias Lan et al [? 3?] informó el "¿arriba? y luego qué. abajo". método
Se utilizó fibra de Von Frey (Stoelting Company, EE. UU.) para medir el umbral de contracción de 50 pies en ratas. 15 µg es la tasa máxima de contracción de 50 que se puede determinar mediante este método.
¿Umbral del pie? 0.? 25 µg es el umbral mínimo de 50 contracciones determinado por este método.
¿Cuando el umbral de contracción del pie 50 es inferior a 4? g se considera sensibilidad al dolor. Antes de la operación y 1 día, 3 días y 7 días después, se tomaron 50 muestras de cada uno del grupo de operación simulada y del grupo de operación para su medición.
Umbral de contracción del pie.
3.? Experimentos de inmunohistoquímica
Después de 1, 3 y 7 días, se realizó cloral 10 hidrato (300
mg/kg, ?I?p? toracotomía después de la anestesia. Perfusión ventricular izquierda. Tomar el segmento hinchado de la columna lumbar y cortarlo continuamente en un microtomo criostato. El espesor de las rodajas es de 14 μm. Hidratar las rodajas de médula espinal e inactivarlas. Catalasa de origen, sellada.
Proximidad, añadido GFAP. anticuerpo (Dako)? ?SP29001,
Zhongshan)? 3' 2. Desarrollo de color y desalcoholización en gradiente de difenildiamina (DAB).
Agua, xileno, sellado y fotografiado al microscopio.
Procesamiento estadístico
p>Las plantas de las patas de animales con comportamiento 50 se calcularon de acuerdo con la fórmula anterior
Se utilizó el umbral de contracción de las patas y se utilizó el software de inmunohistoquímica Metamorph. utilizado para estudiar el lado ligado.
Se analiza la capa superficial del asta dorsal de la médula espinal. Se toma el valor de gris promedio de cada muestra de médula espinal y se calcula el valor promedio de sus valores de gris. 4.? Software, el resultado es el error estándar medio
(¿media? s? e? m)? Utilice análisis de varianza unidireccional (¿un método? ANOVA) seguido de una prueba Hoc. , usando p? 0.? 05.
1. Después de la ligadura del nervio espinal, el pie izquierdo de la rata se contrajo a 50 pies. Un día después de la ligadura del nervio espinal, el pie izquierdo de la rata se contrajo a 50 pies.
Los umbrales son significativamente más bajos que los valores basales preoperatorios, es decir, los animales desarrollan una hiperalgesia mecánica. después de 3 y 7 días (en comparación con
En comparación con animales normales antes de la cirugía, P? lt? 0.? 01)?. p>es similar al valor inicial preoperatorio en comparación con animales normales, P?gt?05, como se muestra en la Figura 1)? .
¿Figura 1? Cambios en la hiperalgesia mecánica después de la ligadura del nervio espinal en ratas. Dentro de los 7 días posteriores a la cirugía, el volumen de cirugías simuladas fue alto.
Cambios en el umbral de 50 contracción del pie ligado en ratas y ratas modelo SNL.
3?三
：?p? ¿Es? 0.? 01, en comparación con el grupo de control normal preoperatorio.
¿Imagen? 1? ¿Dolor inusual? ¿existir? ¿ratón? ¿después? SNL. ? ¿eso? ¿Cambiar? ¿de? 50?Mano
¿Retiro? ¿límite? (50?PWT)? ¿existir? ¿Falso? Entonces qué. ¿SNL? ¿ratón? ¿Adentro? 7? ¿Cuántos días?
3?三
：?p? ¿Es? 0.? 01,?Contraste? ¿A dónde ir? ¿eso? ¿pag? re2operación? Controlar
2.? El método inmunohistoquímico muestra tinción de GFAP en el asta dorsal de la médula espinal.
Profundiza y activa las células gliales.
Utilizando el método de tinción inmunohistoquímica (DAB), observamos 1? después de una cirugía simulada (? simulada) y ligadura del nervio espinal? ¿d? (?SNL?1d)? ,?3?d
(?SNL?3d) y 7? ¿d? (?SNL?7d) Astrocitos.
(Ver Figuras 2A y 2B)? .
Como puedes ver en la imagen, ¿SNL? 1?d
40 ?Revista China de Medicina del Dolor? ¿diario? ¿de? ¿Analgésicos? 2007,?13,?(1)
amp copia;? ¿1994-2007?China? ¿Académico? ¿diario? ¿electrónico? ¿publicación? casa. ? ¿todo? ¿bien? reservar. ? ki.net
La tinción con GFAP en el asta dorsal de la médula espinal ligada fue más fuerte que en el grupo de operación simulada. ¿SNL? ¿Tres
d y SNL? 7?d? En comparación con el grupo de operación simulada, la tinción con GFAP mejoró significativamente.
Es decir, ¿1 tras daño a los nervios? Los astrocitos se activan. ¿Tres
d y 7? Los astrocitos reaccionaron fuertemente; en el lado no sellado
Los astrocitos no sufrieron este cambio. Esto también se observó en el grupo simulado.
Los astrocitos del asta dorsal de la médula espinal del lado ligado se activaron ligeramente.
Medimos el valor gris medio de la capa superficial del asta dorsal de la médula espinal en el lado ligado.
Análisis, ¿utiliza este valor para representar el grado de activación de los astrocitos (ver Figura
2C)? . Un día después de la ligadura del nervio espinal, se excitaron los astrocitos.
¿Seguir con vida? 3?Tianhe-7? Día tras día, el grado de activación de los astrocitos aumentó gradualmente.
Además.
¿Imagen 2? La tinción inmunohistoquímica muestra cambios en la tinción de GFAP en el asta dorsal de la columna en diferentes momentos después de la ligadura del nervio espinal. (1) ¿Después de la ligadura del nervio espinal 1? d.3? d y 7? Tinción inmunohistoquímica GFAP tridimensional de médula espinal
Color. ¿escala? ¿bar? =?100 micras. (b) es una vista ampliada del asta dorsal de la médula espinal en el lado ligado en (a). ¿escala? ¿bar? =?50 micrones. (c) Como se muestra en la Figura (a), cuantifique el valor gris promedio de la capa superficial del asta dorsal de la médula espinal en el lado ligado
Análisis.
3?三
：?p? ¿Es? 0.? 01,?En comparación con el grupo de operación simulada
¿Figura? 2?GFAP? ¿Inmunoreactividad? ¿existir? ¿eso? sp? final? ¿atrás? ¿bocina? ¿después? sp? final? ¿nervio? ligadura. ? (uno)? ¿Inmunotinción? ¿de? ¿GFAP? ¿existir? ¿eso? sp? final? ¿atrás? ¿bocina? ¿Dónde? ¿Cuántos días? 1,?三
Y luego qué. 7?¿Después? SNL. ? ¿escala? ¿bar? =?100μm? (B)? ¿Dos por 2? ¿Mayor urbanización? ¿existir? (uno)? . ? ¿escala? ¿bar? =?50 μm? (tres)? ¿Cuantificar? ¿de? ¿generalmente? ¿fortaleza? ¿existir? ¿Es esto superficial? ¿nivel? ¿de? ¿eso? ¿PI? ¿Lado? sp? final? ¿atrás? ¿bocina? ¿Como? ¿espectáculo? ¿existir? (uno)? .
3?三
：?p? ¿Es? 0.? 01,?Contraste? ¿Qué usar? ¿eso? ¿Falso? Grupo
Discusión
1.? Relación entre la activación de los astrocitos y el comportamiento del dolor neuropático
Los astrocitos en el sistema nervioso central realizan muchas funciones.
Funciones, como participar en la formación de la barrera hematoencefálica, regular los iones extracelulares y la neurotransmisión.
Concentración de masa, mantenimiento de la estabilidad del valor del pH extracelular, etc. Los astrocitos pueden activarse mediante muchos estímulos
como lesiones nerviosas, inflamación, infecciones del sistema nervioso
y diversos factores que causan dolor. Una vez activados los astrocitos,
se producen una serie de cambios como proliferación, hipertrofia, aumento de la síntesis de GFAP, etc.
Y aumentar la liberación de factores proinflamatorios. 1994,?Garrison et al[? 4?]
Se descubrió mediante inmunohistoquímica que los astrocitos se activaban en el modelo de compresión del nervio ciático si se usaba el medicamento MK2. 801 bloquea la transmisión anormal del dolor y también puede bloquear la activación de las células gliales. Existe una fuerte correlación entre la activación de las células gliales y el dolor amplificado. células gliales al dolor. Posteriormente, con la profundización de la investigación
Con la profundización de la investigación, se descubrió gradualmente que las células gliales existen en muchos modelos de dolor.
Activado[? 5~7?]?. En este experimento, ligamos los nervios espinales.
Se realizaron una serie de observaciones sobre las respuestas de los astrocitos en diferentes momentos.
Se encontraron astrocitos 1 día después de la ligadura del nervio espinal.
¿Para activación? Los días 3 y 7, los astrocitos fueron fuertemente estimulados.
Reacción in situ. La activación de los astrocitos se produce principalmente en el lado ligado.
No se encontraron astrocitos en el asta dorsal, el lado libre y el asta anterior de la médula espinal.
Activar. Esto es consistente con los informes en la literatura. Después de una lesión nerviosa,
los astrocitos se activan en las áreas de proyección neural [? 8,?9?]?.
La médula espinal es una estación de retransmisión que transmite información sobre el dolor desde la periferia al cerebro y luego la transmite al exterior.
Las terminales axónicas de las neuronas aferentes primarias del dolor terminan en el asta dorsal de la médula espinal.
A diferentes niveles, se produce en diferentes tipos de neuronas secundarias de la médula espinal.
Contacto. Entre ellas, fibras Aδ mielinizadas de diámetro medio y fibras amielínicas de diámetro pequeño.
Las fibras de la vaina C terminan en la capa superficial del asta dorsal de la médula espinal [? 10?]?Estas dos fibras desempeñan un papel intermediario.
Difusión de información nociva. Por tanto, se considera que las capas superficiales del asta dorsal de la médula espinal están implicadas en la transmisión del dolor. Los astrocitos están presentes aquí.
¿Revista China de Medicina del Dolor? ¿diario? ¿de? ¿Analgésicos? 2007,?13,?(1)?41
amp copia;? ¿1994-2007?China? ¿Académico? ¿diario? ¿electrónico? ¿publicación? casa. ? ¿todo? ¿bien? reservar. ? ki.net
La activación sugiere que estas células pueden estar involucradas en la transmisión de información dañina.
Un día después de la ligadura del nervio espinal, los animales experimentaron un dolor mecánico evidente.
¿Mínimo? Los animales mantuvieron altos niveles de sensibilidad al dolor los días 3 y 7. Incorrecto
No hubo cambios de comportamiento significativos en el grupo quirúrgico. La activación de los astrocitos
Hígado también ocurre a los 65.438 ± 0 días después de la ligadura del nervio espinal. 3 días y 7 días, activado
El grado va en aumento. Las células gliales de la médula espinal incluyen los astrocitos.
Células gliales y microglía. Según informes de la literatura existente[? 11?]?, Ridge
La microglia no se activa o se activa ligeramente después de la ligadura del nervio, y los inhibidores citoplasmáticos de la microglia
no pueden revertir los comportamientos de dolor establecidos que ¿Dónde están las estrellas?
; p>
Los glioblastos tienen una fuerte respuesta de activación después de la ligadura del nervio espinal,
y paralela al inicio y mantenimiento de conductas dolorosas, lo que sugiere astrocitos.
Las células pueden estar implicadas en la formación de conductas dolorosas. La microglía y los astrocitos
La glía desempeña diferentes funciones en el dolor. La opinión actual es que
inicia la activación de los astrocitos para activar la microglía,
Sin embargo, el grado de activación. la activación de los astrocitos está relacionada con la generación de dolor amplificado
Sigue siendo relevante[? 12?]?. Los astrocitos y el origen y dimensión del comportamiento del dolor
¿Todo el proceso de persistencia está relacionado con los astrocitos o es sólo temporal?
¿Es la activación de las células una causa o un efecto? Activación de astrocitos simples.
Si los animales vivos pueden inducir sensibilidad al dolor requiere una mayor verificación experimental.
2.? Posible importancia de los astrocitos en el dolor neuropático
Existe una estrecha relación entre los astrocitos y las neuronas, que son antagónicas entre sí.
Los cambios en el microambiente alrededor de las neuronas son muy sensibles y pueden revertirse rápidamente.
Sí. Las células gliales reactivas pueden liberar grandes cantidades de sustancias neuroactivas.
Factores cualitativos y proinflamatorios que aumentan las terminaciones nerviosas aferentes primarias.
La liberación de las puntas transmisoras del dolor y el aumento de la excitabilidad de las neuronas transmisoras del dolor
Amplian la transmisión del dolor y forman un circuito de retroalimentación con las neuronas.
Camino[? 13?]?.
Esto sugiere que las células gliales ya no se encuentran en el sistema nervioso central.
Un componente estático, pero no lo mismo que las neuronas.
Interrumpir el proceso dinámico de intercambio de información. Las células gliales transmiten señales a través de la red glial
ramas laterales, reponiendo así las neuronas y * * * participando en la transmisión del dolor.
Guía turístico. Una comprensión más profunda de la relación entre las células gliales y el dolor ayudará a la investigación.
Los fármacos para tratar el dolor crónico ofrecen nuevos objetivos.