Se ha clonado un gen relacionado con el cáncer. ¿Cómo diseñar un experimento para demostrar si se trata de un protooncogén o de un gen supresor de tumores?

1. Responder si este gen está relacionado con el grado/clasificación patológica, estadio clínico, pronóstico clínico y otros parámetros del cáncer.

A. Si el producto genético tiene anticuerpos:

1. Sección patológica->; puntuación inmune->2. Muestras clínicas frescas->Western blotting->Análisis de resultados

B Si no hay ningún anticuerpo correspondiente: recolecte muestras clínicas frescas de tejido tumoral->RT-PCR->Análisis de resultados

Por Respondiendo a la primera pregunta, se puede inferir aproximadamente que el gen puede ser un oncogén o un gen supresor de tumores. Por supuesto, este paso está lejos de confirmar su problema. Si eres un experto, aún es aceptable realizar este paso. Si eres médico, continúa respondiendo las siguientes preguntas.

2. ¿Cómo afecta este gen a la biología tumoral del cáncer?

Regula los genes al alza o a la baja, y luego observa los siguientes fenómenos.

Experimentos in vitro (múltiples opciones):

A. ¿Cómo afecta este gen al crecimiento/supervivencia/proliferación de las células tumorales? Curva de crecimiento celular/MTT, experimento de incorporación de WST-1/BrdU, etc.

B. ¿Cómo afecta este gen al ciclo celular de las células tumorales? Análisis del ciclo celular

C. ¿Cómo afecta este gen a la apoptosis de las células tumorales? Análisis de apoptosis (método TUNEL, método de doble tinción Annixin V/PI)

D. ¿Cómo afecta este gen a la migración de las células tumorales? Tales como: prueba de rayado de batería

E. ¿Cómo afecta este gen a la invasión y metástasis de las células tumorales? Como el experimento Transwell

Experimento in vivo:

¡Experimento de formación de tumores en ratones desnudos!

Observar la tasa de crecimiento tumoral (volumen, densidad de los vasos sanguíneos del tumor

Otros, como la proliferación de células tumorales y la apoptosis);

Respondiendo a la segunda pregunta, podemos entender básicamente a qué aspecto de la biología tumoral afecta este gen.

Básicamente, simplemente gradúese con un doctorado.

Pero si tienes requisitos más altos, también puedes considerar responder la tercera pregunta.

3. ¿Por qué mecanismo afecta este gen a un determinado aspecto de la biología tumoral?

Esta pregunta debe analizarse específicamente en función de los resultados de la segunda pregunta. No entraré en detalles.

Las anteriores son sólo mis sugerencias personales. Espero que puedan darle una impresión general.