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Métodos genéticos de células somáticas

Fusión celular

El tratamiento de células con virus inactivados (como el virus Sendai) o fármacos químicos (como polietilenglicol, dextrano) puede promover la fusión celular y obtener diferentes híbridos celulares. Por ejemplo, una célula homocariótica con dos o más núcleos de la misma especie, una célula heterocariótica con dos o más núcleos de una especie diferente, una célula sincitial intraespecífica (o interespecífica) con un núcleo compuesto por los mismos (o heterogéneos) núcleos fusionados. , células híbridas citoplasmáticas resultantes de la fusión de plastidios citoplasmáticos y células intactas, y células recombinantes resultantes de la fusión de nucleosomas citoplasmáticos de una célula a otra. Estos híbridos celulares obtenidos mediante procesos asexuales no sólo pueden utilizarse para estudiar el papel del núcleo y el citoplasma en la transmisión y expresión de información genética y los mecanismos de tumorigénesis, sino que también pueden utilizarse para superar las dificultades de la hibridación a distancia en plantas.

Generación de mutaciones

La mutagénesis inducida se puede utilizar para estudiar mecanismos de mutación y proporcionar marcadores selectivos para la fusión celular. Se han establecido líneas celulares mutantes con propiedades que incluyen deficiencia de nutrientes, sensibilidad a la temperatura, resistencia a la radiación, resistencia a virus y resistencia a medicamentos, y también pueden desarrollarse mediante mutación somática de plantas.

Métodos para seleccionar células fusionadas

Tanto la fusión celular como las mutaciones genéticas son eventos raros, por lo que se necesita un método de selección específico para aislar las células fusionadas de una gran cantidad de células no fusionadas. La selección HAT es el método más antiguo y más utilizado en células animales. En este método, la línea celular parental es deficiente en hipoxantina-guanina-fosforribosiltransferasa (Hg PRT-); la otra línea celular parental es deficiente en timidina quinasa (TK-); En el medio selectivo HAT que contiene hipoxantina (H), aminopterina (A) y timidina (T), ninguna de las células parentales puede sobrevivir y sólo las células híbridas fusionadas pueden crecer, por lo que las células híbridas pueden seleccionarse eficazmente. El principio del método de selección HAT es que existen dos métodos de síntesis de ácidos nucleicos: ① Síntesis total, sintetizando purinas y pirimidinas a partir de algunas moléculas pequeñas, y luego sintetizando ácidos nucleicos ② Método de emergencia: convertir hipoxantina en fosfato de hipoxantina bajo catálisis de; HGPRT (IMP), convierte la timidina en fosfato de desoxitimidina (dTMP) bajo la catálisis de TK y sintetiza aún más ácidos nucleicos. La aminopterina (a) en medio HAT puede bloquear la vía de síntesis total, por lo que las células madre no pueden crecer en medio HAT. Sólo cuando las células híbridas obtenidas por fusión celular tienen las actividades enzimáticas tanto de HGPRT como de TK pueden surgir hipoxantina (H) y timidina. (T) en el medio de cultivo se utilizan para sintetizar ácidos nucleicos (ver figura). De la misma manera, se puede utilizar cualquier otro método para seleccionar células fusionadas siempre que tenga condiciones que permitan que las dos células parentales no sobrevivan solas sino que solo sobrevivan después de la fusión.

Métodos para excluir o retener cromosomas parentales

Para el paso a largo plazo de células fusionadas de líneas celulares de ratón y rata, es el cromosoma de rata el que se excluye continuamente durante el proceso de paso; Sí. Los cromosomas humanos fueron excluidos de las células fusionadas de ratones y humanos. Sin embargo, si se fusionan células de una línea celular humana con células de ratón que no han sido subcultivadas durante mucho tiempo, las células fusionadas rechazarán primero los cromosomas del ratón. En las plantas, después de nueve meses de cultivo, se conservaron todos los cromosomas de la soja, mientras que la mitad de los cromosomas del tabaco quedaron excluidos.

Según las características de determinados genes de los cromosomas se pueden obtener células híbridas que excluyen selectivamente un determinado cromosoma. Por ejemplo, el cromosoma 5 humano contiene un gen de proteína receptora de la toxina diftérica que sensibiliza las células híbridas humanas a la toxina diftérica. Las células de ratón no tienen este gen y, por tanto, son resistentes a la toxina. Cultivando células de fusión de células humanas y de ratón en un medio de cultivo que contiene toxina diftérica, se pueden eliminar selectivamente las células híbridas con el cromosoma 5 humano. Por el contrario, las células fusionadas también pueden retener selectivamente un cromosoma. Por ejemplo, el gen HGPRT está ubicado en el cromosoma X humano, por lo que las células fusionadas capaces de crecer en medios HAT deben conservar el cromosoma X humano.

Transferencia de genes cromosómicos o nucleares

La introducción de material genético en las células de un organismo es un método común en la investigación genética de células somáticas. La transformación directa de las células receptoras mediante material genético exógeno no es eficaz. Utilizar virus, células fantasma, minicélulas, liposomas, etc. para cargar el material genético a transferir.

Se puede mejorar la eficacia de su introducción en las células receptoras. Alternativamente, se pueden utilizar tubos de vidrio muy delgados para inyectar ADN directamente en el núcleo de la célula receptora. Para los protoplastos de células vegetales después de eliminar la pared celular, también se pueden introducir moléculas de ADN, partículas de fagos y orgánulos mediante el método anterior. Además de transferir cromosomas o fragmentos de cromosomas, a veces es necesario transferir todo el núcleo celular y la microinyección también es un método común para transferir el núcleo.

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Incluso si no comes azúcar, a tu cuerpo no le faltarán calorías". "¿Por qué la dieta baja en azúcar de RIZAP (el primer equipo de fitness profesional de Japón) puede ayudar a perder peso? ¡Síganos para conocer el mecanismo detrás de ella y las reglas básicas que dan resultados! El azúcar es uno de los tres nutrientes principales, y el arroz y el pan son ¡ambos azúcar En los últimos años, debido a su buen efecto de pérdida de peso, el método de pérdida de peso "sin azúcar" ha recibido una gran atención. Cuando se trata de azúcar, intuitivamente se puede pensar en dulces como pasteles y postres. De hecho, los cereales como el arroz y el pan, y los fideos como los fideos de trigo sarraceno y los espaguetis, son azúcares que los asiáticos consumen en grandes cantidades. Los carbohidratos están compuestos de azúcar y fibra dietética, pero el azúcar representa la mayoría. ¿Eliminación relacionada con la pérdida de peso? Esto tiene que ver con el llamado mecanismo nutricional detrás de esto. El azúcar es en realidad uno de los tres nutrientes que se pueden convertir en calorías necesarias para las actividades humanas. Estos tres nutrientes son proteínas, grasas y proteínas. Es la materia prima de alrededor de 60 billones de células del cuerpo, que es responsable de producir músculos, sangre y tejidos como los huesos y la piel. La gente a menudo malinterpreta que los lípidos solo se convierten en grasa y se acumulan en el cuerpo. Solo es una fuente de calorías, pero también una materia prima para las membranas celulares y las hormonas. Así, hay tres tipos de nutrientes, cada uno de los cuales tiene su propia función. Quizás te preguntes: “Aun así, ¿está bien eliminar el azúcar? ? "Pero no hay problema". Hay una razón detrás de esto. "Incluso si no comes azúcar, a tu cuerpo no le faltarán calorías". La insulina acumulará grasa y el azúcar se descompondrá en glucosa en tu cuerpo. El llamado nivel de azúcar en sangre se refiere a la concentración de glucosa en la sangre. El cuerpo humano tiene un mecanismo para mantener los niveles de azúcar en sangre dentro de un cierto rango. Cuando usted come azúcar, los niveles de azúcar en la sangre aumentan, pero luego el páncreas secreta una hormona llamada insulina para transportar la glucosa de la sangre al hígado, lo que hace que el azúcar en la sangre baje. La glucosa que llega al hígado se almacena como glucógeno. Cuando el cuerpo enfrenta una situación de emergencia de glucosa insuficiente, el azúcar del hígado se convierte nuevamente en glucosa para que la utilice el cuerpo. Sin embargo, existe un límite superior para el almacenamiento de azúcar en el hígado. La insulina convierte el exceso de azúcar en grasa neutra (es decir, triglicéridos) y la almacena en el cuerpo. Por eso a la insulina se la llama la “hormona de la obesidad”. En resumen, "siempre que limites la ingesta de azúcar, puedes suprimir el aumento de los niveles de azúcar en la sangre, suprimiendo así la secreción de insulina, por lo que puedes perder peso". Las cetonas se pueden convertir en energía cerebral. Aunque el azúcar es una fuente de calorías para la actividad física, cuando el azúcar es insuficiente, la grasa puede compensarlo. Además, el cuerpo humano tiene un mecanismo llamado "regeneración de glucosa" para producir azúcar, por lo que el nivel de azúcar en sangre no será demasiado bajo. Cuando se agota la glucosa, el cuerpo crea una deficiencia de glucosa al regenerarla, regulando así los niveles de azúcar en sangre. En este momento se quemará la grasa neutra. En otras palabras, "si se reduce la ingesta de azúcar, habrá insuficiencia de glucosa en el cuerpo y la grasa se quemará gradualmente". Este es el principio de "eliminar el azúcar" que puede hacer que las personas pierdan peso. Un aumento rápido de los niveles de azúcar en sangre puede dañar los vasos sanguíneos, empeorar la circulación sanguínea e incluso causar arteriosclerosis. Además, el exceso de azúcar se combinará con las proteínas del cuerpo para formar "proteínas glucosiladas", que acelerarán el envejecimiento de la piel, el cabello, los huesos y otros órganos. Algunas personas pueden pensar: "¿No es la glucosa la única fuente de energía para el cerebro? Pero, de hecho, no hay problema sin glucosa. 下篇: ¿Qué tal Xinyang Qingtian Information Technology Co., Ltd.?