¿Qué métodos se pueden utilizar para evaluar la actividad antioxidante?

Método de evaluación de antioxidantes ORAC

ORAC es la abreviatura de capacidad de absorción de radicales oxidativos y es un sistema de métodos de evaluación para probar la capacidad antioxidante.

Ahora que la ciencia ha demostrado la importancia de los antioxidantes para el cuerpo humano, contrarrestar

la cuantificación de los efectos de la oxidación es un problema urgente que debe resolverse. Sólo cuando se pueda cuantificar el efecto antioxidante podrán las empresas desarrollar mejores productos, obtener el reconocimiento gubernamental y demostrar el efecto antioxidante de sus productos a los consumidores.

Antes de la introducción del método ORAC, debido a las pruebas antioxidantes extremadamente complejas, el mundo empresarial (un plan experimental extremadamente complejo no podía ser aplicado por el mundo empresarial. En ese momento, un experimento antioxidante riguroso a menudo requería varios meses y cuesta mucho dinero (extremadamente caro e inaceptable para la comunidad empresarial) no pueden probar de forma eficaz y exhaustiva la capacidad antioxidante de las muestras. Sin embargo, las empresas son el motor de la innovación tecnológica, al igual que Apple.

La prueba de antioxidantes de ORAC incluye cinco especies reactivas de oxígeno principales en el cuerpo humano: radicales peróxido (hidrofilicidad y lipofilicidad), radicales hidroxilo, peroxinitrito y oxígeno singlete. Un análisis completo de aniones superóxido y aniones superóxido puede obtener de manera efectiva la prueba. Capacidad antioxidante real y distribución de las muestras.

La prueba biológica de antioxidantes ORAC es un programa de prueba de mayor nivel que las pruebas de antioxidantes ordinarias. La capacidad antioxidante (biodisponibilidad) de las muestras se probó eficazmente utilizando células humanas.

ORAC está clasificado como el método estándar para pruebas de antioxidantes por la AOAC estadounidense y es el método de prueba internacional principal.

Otros métodos de evaluación

La antioxidación no es sólo un concepto, el efecto de los antioxidantes en el organismo también se puede medir cuantitativamente. Como experimento con animales, generalmente después de tomar antioxidantes durante un cierto período de tiempo, se miden los cambios en el malondialdehído (MDA) en la sangre y la actividad de la superóxido dismutasa (SOD) y la glutatión peroxidasa (GSH-PX) en el homogeneizado del hígado. La fuerza y ​​el efecto de los antioxidantes se pueden juzgar a partir de los cambios en las dos enzimas anteriores y en la MDA. Dado que no es posible medir el homogeneizado de hígado en humanos, se pueden medir MDA en sangre u orina, SOD y GXH-PX en sangre para determinar el efecto antioxidante.

Los oxidantes en los alimentos han atraído durante mucho tiempo la atención de los académicos nacionales y extranjeros porque:

① Los antioxidantes en los alimentos pueden protegerlos del daño y el deterioro oxidativos.

② Tiene efectos antioxidantes en el tracto digestivo humano y previene el daño oxidativo del tracto digestivo.

③Después de la absorción, puede desempeñar un papel en otros tejidos y órganos del cuerpo.

④Algunos extractos antioxidantes presentes en los alimentos pueden utilizarse como fármacos terapéuticos. El mecanismo de acción de los antioxidantes incluye quelar iones metálicos, eliminar radicales libres, apagar el oxígeno singlete, eliminar oxígeno e inhibir la actividad oxidasa.

Métodos de evaluación in vitro

Aunque existen muchos, se basan principalmente en dos tipos: uno consiste en evaluar la capacidad antioxidante del objeto probado midiendo la capacidad de la muestra para inhibir la oxidación de sustancias lipídicas. La otra es utilizar la capacidad de eliminación de radicales libres sintéticos de la muestra para reflejar la actividad antioxidante del objeto probado. La actividad antioxidante de los antioxidantes en los sistemas alimentarios y biológicos se ve afectada por muchos factores, incluido el efecto de distribución de los antioxidantes entre la fase acuosa y la fase oleosa, las condiciones de oxidación y el medio ambiente, y el estado físico del sustrato de oxidación.

1. Determinación de la resistencia al peróxido de aceite

Los lípidos abarcan una amplia gama y son los principales componentes de las membranas biológicas. Los ácidos grasos insaturados de los lípidos se pueden oxidar y se producirán radicales libres como L, LO, LOO y LOOH durante la peroxidación lipídica, lo que provocará daños a las células biológicas. Por tanto, la inhibición de la peroxidación lipídica tiene una importancia biológica importante.

Tiocianato férrico FTC: El método colorimétrico del tiocianato férrico (FTC) se basa en que en condiciones ácidas, el peróxido formado por la oxidación de lípidos puede oxidar el Fe2+ a Fe3+, y luego el Fe3+ reacciona con los iones ácidos del tiocianato. Forme un complejo rojo con máxima absorción en el rango de 480-515 nm. El valor de absorbancia a 500 nm se utiliza habitualmente para indicar la capacidad de una sustancia para resistir la peroxidación lipídica. Cuanto menor sea el valor de absorción de luz, mayor será la capacidad de la sustancia para resistir la peroxidación lipídica.

Método TBARs del reactivo del ácido tiobarbitúrico: Es un método común para evaluar el grado de oxidación del aceite. El producto final de la oxidación del aceite o del ácido linoleico es principalmente malondialdehído. Estos peróxidos reaccionan con el ácido tiobarbitúrico para formar compuestos coloreados, que se absorben a unos 530 nm.

2. Determinación de la capacidad de eliminación del DPPH

El DP es un radical libre orgánico de síntesis temprana y se utiliza a menudo para evaluar la capacidad de los antioxidantes para donar hidrógeno. Es muy estable en disolventes orgánicos, es de color violeta y tiene un pico de absorción característico. Cuando se encuentran eliminadores de radicales libres, el par solitario de DPPH hace que se desvanezca, es decir, el valor de absorción en la longitud de onda de absorción máxima se vuelve más pequeño. Por lo tanto, el efecto eliminador de una muestra sobre los radicales libres DPPH se puede evaluar midiendo el cambio en el valor de absorción.

3. Determinación del poder reductor

La medición del poder reductor es un método para comprobar si una muestra es un buen donante de electrones. Una muestra con una fuerte capacidad reductora debería ser un buen donante de electrones. Los electrones que proporciona no sólo pueden reducir el Fe3+ a Fe2+, sino también reaccionar con los radicales libres. La determinación del poder reductor es un método común para evaluar la actividad antioxidante.

4. Experimento sobre la inhibición de la enzima LOX

La lipoxigenasa LOX es una ferritina no hemo ampliamente distribuida en las plantas, con un peso molecular de 90-100 KD. Esta proteína enzimática está compuesta de múltiples cadenas de vaina. El grupo auxiliar metálico que contiene iones férricos está activo, mientras que el grupo auxiliar metálico que contiene iones de hierro divalentes está inactivo. Su principal función en el organismo es catalizar específicamente la reacción de oxidación de ácidos grasos poliinsaturados con estructuras cis y cis-pentadieno para generar hidroperóxidos de ácidos grasos poliinsaturados con * * * dobles enlaces conjugados. El sustrato principal en los organismos son los ácidos grasos insaturados libres liberados de los glicerolípidos (como los fosfolípidos). Entre ellos, el sustrato principal en los animales es el ácido araquidónico y los principales sustratos en las plantas son el ácido linoleico y el ácido linolénico. Ácido graso.

Los métodos anteriores son métodos para la medición y evaluación in vivo e in vitro de los efectos de la aplicación de antioxidantes.