¿Cómo preparar el reactivo de biuret?

En condiciones alcalinas, el biuret h2n-co-nh-co-nh2 puede reaccionar con iones cu formando un precipitado de color púrpura.

Tiene poca sensibilidad, rango de medición estrecho, requiere una gran cantidad de muestra y diferentes proteínas producen tonos de color similares. Por lo tanto, a menudo se usa para la determinación de proteínas que requiere rapidez pero no requiere mucha precisión. medidas. Las sustancias que interfieren con la determinación incluyen: tampones que son aminoácidos o péptidos por naturaleza, como los tampones Tris, porque producen una reacción de color positiva, los iones de cobre también se reducen fácilmente y, a veces, aparecen precipitados rojos.

Preparación:

El reactivo de Biuret A es una solución acuosa de NaOH con una fracción másica de 0,1 g/mL. El reactivo B de Biuret es una solución acuosa de CuSO4 con una fracción másica de 0,01 g/mL; ml.

Primero agregue 3 mL de Reactivo Biuret A al líquido a probar y agite uniformemente (para crear un ambiente alcalino), luego agregue de 1 a 2 gotas de Reactivo Biuret B y agite uniformemente. Si la solución a analizar contiene proteínas, verá que la solución se vuelve violeta.

Los compuestos con dos o más enlaces peptídicos pueden reaccionar de color púrpura con el reactivo de biuret. El enlace peptídico de la proteína puede formar complejos con Cu2 en solución alcalina para formar un complejo púrpura. La profundidad del color es directamente proporcional a la concentración de proteínas.

Referencia del contenido anterior: Enciclopedia Baidu - Reactivo Biuret