Efectos secundarios de la uroquinasa
Nombre en inglés: Urokinase
Número de página: edición 2000 II-323
Este producto se extrae de orina humana fresca Una enzima que activa el plasminógeno. Está hecho de material de alto peso molecular
54.000 y de bajo peso molecular 33.000, el contenido de alto peso molecular no será inferior al 90% y la proteína en la orina será de 65.438±0 mg.
La actividad de Kase no debe ser inferior a 654,38+200.000 unidades.
Durante el proceso de producción, este producto necesita calentarse a 60°C durante 10 horas para inactivar el virus.
Características: Este producto es un polvo de color blanco.
Identifique la solución de prueba en el elemento de determinación del título y diluya con tampón barbitúrico-cloruro de sodio (pH 7,8).
Para liberarlo en una solución que contenga 20 unidades por 1 ml, aspirar 1 ml, añadir 0,3 ml de solución de fibrinógeno bovino y luego añadir bovino a su vez.
Tome 0,2 ml de solución de plasminógeno y 0,2 ml de solución de trombina bovina, agite rápidamente y colóquelos inmediatamente a una temperatura constante de 37 ℃ ± 0,5 ℃.
Aislar en baño maría, recordar que el sistema de reacción debe coagularse en 30 a 45 segundos, y el coágulo debe volver a disolverse en 15 minutos. La solución de cloruro de sodio al 0,9% se pone en blanco y se utiliza el mismo método. El coágulo no se disuelve en 2 horas (la preparación de los reactivos es la misma que para la determinación de la potencia).
Comprueba la claridad y el color de la solución. Tome este producto y agregue una solución de cloruro de sodio al 0,9 % por 65438 ± 0 ml para obtener 3000 ml.
La solución unitaria debe ser transparente e incolora.
De acuerdo con la proporción de composición molecular, tomar este producto, agregar agua para hacer una solución que contenga 2 mg por 1 ml y luego agregar un volumen igual de solución tampón (concentrada)
Tampón de pegamento 2,5 ml, solución de lauril sulfato de sodio al 20% 2,5 ml, solución de azul de bromofenol al 0,1% 1,0 ml, solución de glicerol al 87% 3,5.
Ml, agregar agua hasta 10ml), colocar en un baño de agua durante 3 minutos, dejar enfriar y usar como solución de prueba agregar 10μl de solución de prueba a la muestra;
Para cada pocillo, según electroforesis (Apéndice ⅴ f quinta tinción con azul brillante de Coomassie), calcular el contenido relativo de polímero uroquinasa según la siguiente fórmula.
(%)
Área del pico de polímero uroquinasa
Contenido relativo de polímero uroquinasa (%)=————×100%
La suma de las áreas de los picos de uroquinasa de alto peso molecular y de bajo peso molecular
Pérdida de peso al secar: tomar este producto, usar pentóxido de fósforo como desecante, secar bajo presión reducida a 60°C hasta constante peso, no se permite pérdida de peso Más del 5,0%.
(Anexo 8l).
De acuerdo con la toxicidad anormal de este producto, agregue una inyección de cloruro de sodio para obtener una solución que contenga 5000 unidades por 1 ml y compruébelo de acuerdo con la ley.
(Apéndice ⅶc), la administración mediante inyección intravenosa debe cumplir con la normativa.
Tomar el pirógeno de este producto y agregar inyección de cloruro de sodio para hacer una solución que contenga 20.000 unidades por 1 ml. Compruébelo según la ley (adjunta
Registro ⅶd). Para el peso corporal del conejo, cada inyección de 65438 ± 0 kg 65438 ± 0 ml debe cumplir con las regulaciones.
La preparación del plasma del principio activo similar a la tromboplastina (1) comienza de 2 a 3 días después de la extracción de sangre venosa de un donante de sangre normal en ayunas.
Gotear y añadir previamente solución de oxalato de potasio al 20% a una bolsa de infusión de polietileno (añadir solución de oxalato de potasio al 20% por cada 10ml de sangre)
0,15ml), mezclar bien y añadir 0. Centrifugar a 20.000 rpm durante 20 minutos en una centrífuga de ~5°C para preparar la sangre.
Clarificación de pulpa. El tiempo de coagulación de la prueba de recalcificación del plasma debe ser de 12 a 17 minutos. Si son menos de 12 minutos se debe centrifugar o colocar nuevamente.
Se puede utilizar después de 12 minutos en el frigorífico a 0 ~ 5 ℃. Congele rápidamente a -20 ℃ para su uso posterior, descongele a 25 ℃ antes de usarlo.
(2) Para la prueba de recalcificación, tome 6 tubos de ensayo pequeños (12 mm × 75 mm) y agregue 0,1 ml de plasma y solución de ácido 6-aminocaproico a cada tubo de ensayo [tome 6
- Ácido aminocaproico 1,97g, disuelto en tampón barbitúrico (pH 7,4) y diluido a 50ml] 0,1ml y tampón barbitúrico.
(pH7,4)0,1 ml, luego agregue la solución de cloruro de calcio en secuencia (tome 1,84 g de cloruro de calcio, agregue agua para disolver y diluya a 500 ml).
Poner 0,10ml, 0,12ml, 0,14ml, 0,16ml, 0,18ml, 0,20ml rápidamente en un baño de agua a 25°C y observar el tiempo de coagulación.
En la serie de tubos de ensayo anterior, la cantidad de cloruro de calcio agregada al tubo de ensayo con el tiempo de curado más corto es la cantidad de solución de cloruro de calcio utilizada en la prueba de recalcificación del calcio. (3) Método de determinación: Tome este producto y agregue tampón barbitúrico (pH 7,4) para que contenga 10.000 unidades y 5.000 unidades por 1 ml.
Soluciones de prueba de 2500 unidades, 1250 unidades, 625 unidades y 312 unidades. Si la muestra contiene tetraacetato de etilendiamino o fosfato, se debe eliminar mediante diálisis con tampón barbitúrico (pH 7,4) a 2°C, y luego se prepara una solución con la concentración anterior.
Tome 8 tubos de ensayo pequeños (12 mm × 75 mm) y agregue 0,1 ml de tampón barbitúrico (pH 7,4) en los tubos de ensayo 1 y 8 como un par en blanco.
Agregue 0,1 ml de la solución de prueba diluida a otros 6 tubos de ensayo y luego agregue ácido 6-aminocaproico en secuencia.
Tomar 0,1ml de la solución y plasma respectivamente, agitar suavemente, dejar reposar en baño María a 25°C durante 2 a 3 minutos y añadir rápidamente la solución precalentada.
Mezclar uniformemente la solución de cloruro de calcio necesaria para la prueba de recalcificación mencionada anteriormente a 25°C y registrar el tiempo de colocación. Observe la coagulación del plasma.
Incline ligeramente al observar para no afectar el proceso de coagulación y registre el tiempo de coagulación. El error entre los dos tubos de control no debe ser superior a 65438±0 minutos.
El tiempo de coagulación del tubo de control en blanco menos el tiempo de coagulación del tubo de ensayo es igual al tiempo de acortamiento de la coagulación de la prueba de recalcificación.
En papel logarítmico, con la concentración de la solución de prueba como ordenada, el tiempo de acortamiento de la coagulación (segundos) de la prueba de doble calcio es
El gráfico de abscisas que conecta los puntos de muestra de diferentes diluciones Estará en una línea recta que se extienda y sea perpendicular al eje longitudinal.
La intersección de los ejes representa la concentración de la muestra de prueba, que también es la actividad enzimática de la muestra de prueba cuando la actividad similar a la tromboplastina es cero, por 1 ml.
La unidad del producto de prueba indica que debe ser superior a 150 unidades por 1 ml.
Determinación de actividad específica para la determinación de potencia (1) Solución reactiva de fibrinógeno bovino Tome fibrinógeno bovino y agréguelo.
El tampón barbitúrico-cloruro de sodio (pH 7,8) se utiliza para preparar una solución que contiene 6,67 mg de proteína coagulable por 1 ml.
Solución de trombina bovina: Tome trombina bovina y agregue tampón barbitúrico-cloruro de sodio (pH 7,8) para obtener 1 ml.
6,0 unidades de solución.
Solución de plasminógeno bovino Tome la solución de plasminógeno bovino y agregue tampón de trishidroximetilaminometano (pH 9,0)
) para preparar de 1 a 1,4 cajas por porción Solución de unidad de proteína (si la solución está turbia, centrifugue y tomar el sobrenadante para su uso posterior).
Antes de usar la solución mixta, tome volúmenes iguales de solución de trombina bovina y solución de plasminógeno bovino y mézclelos uniformemente.
(2) Preparación de la solución estándar Prepare el estándar de uroquinasa agregando tampón barbitúrico-cloruro de sodio (pH 7,8).
Contiene 60 unidades de solución por 1 ml.
(3) Preparación de la solución de prueba: tomar una cantidad adecuada de este producto, disolverlo en tampón barbitúrico-cloruro de sodio (pH 7,8) y mezclar bien.
Uniformemente y diluida a la misma concentración que la solución estándar.
(4) Método de determinación: tomar 4 tubos de ensayo, agregar 0,3 ml de solución de fibrinógeno bovino a cada tubo de ensayo y colocarlo en un baño de agua a 37 ℃ ± 0,5 ℃.
Añadir 0,9 ml, 0,8 ml, 0,7 ml y 0,6 ml de tampón barbitúrico-cloruro de sodio (pH 7,8) respectivamente, y luego añadir la solución estándar en secuencia.
Los líquidos son 0,1 ml, 0,2 ml, 0,3 ml y 0,4 ml respectivamente, luego agregar 0,4 ml de la solución mezclada, agitar inmediatamente y cronometrar respectivamente. El sistema de reacción debe coagularse en 30 a 40 segundos. Cuando las pequeñas burbujas en el coágulo alcanzan la mitad del volumen del sistema de reacción, es el final de la reacción.
Espera el tiempo. Tome la concentración de uroquinasa como abscisa y la diferencia entre el tiempo de finalización de la reacción y el tiempo de entrada al baño maría como ordenada. La reacción se lleva a cabo dos veces.
Dibuje una curva estándar en. el papel digital, que debe ser una línea recta. Utilice el método anterior para medir la muestra de prueba y obtener el título (unidad) en la curva estándar.
Marcado
La muestra estándar y la muestra de prueba deben probarse dos veces y las líneas rectas obtenidas deben ser paralelas; de lo contrario, la prueba debe repetirse.
El contenido de proteína es de aproximadamente 65438 ± 00 mg de este producto, péselo con precisión y mídalo de acuerdo con el método de determinación de nitrógeno (Apéndice ⅶ d segundo método).
Multiplique la fruta por 6,25 para obtener el contenido de proteína en el producto de prueba y calcule el contenido de proteína (mg) por 1 mg del producto de prueba.
La actividad específica se calcula según la siguiente fórmula.
Potencia (unidad) por 1 mg de producto de prueba
Actividad específica = ———————————————
Proteína contenido (mg) por 1 mg de muestra problema
Enzima proteolítica.
Almacenar protegido de la luz, sellado y mantenido por debajo de 10 ℃.
Preparación de uroquinasa para inyección
Uroquinasa
Uroquinasa
Función y uso Este producto es un producto producido por las células epiteliales tubulares renales A. enzima proteolítica especial que es un agente trombolítico eficaz. Su mecanismo de acción es diferente al de la estreptoquinasa. Este producto puede promover directamente la conversión de plasminógeno inactivo en plasmina activa e hidrolizar la fibrina que constituye el trombo. Utilizado clínicamente para trombosis cerebral, embolia cerebral, trombosis arterial o venosa periférica, embolia pulmonar, infarto agudo de miocardio, etc. También se puede utilizar en oftalmología para disolver fibras sanguíneas y coágulos de sangre en la cámara anterior. Debido a que este producto es una proteína del cuerpo humano, las reacciones adversas son menores que las de la estreptoquinasa.
Dosificación y modo de uso: goteo intravenoso, 1 vez, 10000 u ~ 20000 u, añadir 500ml de solución de glucosa al 5% y aplicar. 1 a 2 veces al día durante 5 a 7 días y luego inyectar por vía intramuscular 5000 U diarias para mantenimiento. Inyección intravenosa, 30000~40000 U/día durante los primeros 2~3 días, dividida en dos veces, luego 1000~20000 U/día durante 7~10 días. Cuando se usa en oftalmología, la dosis se puede administrar mediante inyección intravenosa sistémica o goteo según la afección. La inyección conjuntival o retrobulbar suele ser de 500 u ~ 1000 u.
El principal efecto secundario de 1 es el sangrado, por lo que es necesario medir la coagulación durante su uso. Si se encuentra tendencia a sangrar, se debe suspender el medicamento inmediatamente y se deben administrar medicamentos antifibrinolíticos. Puede haber dolor de cabeza, náuseas, vómitos, pérdida de apetito, etc.
Número de servicio de resúmenes químicos: 9039-53-6