¿Cuáles son los detectores de columna de cromatografía líquida más comunes?
1 y los detectores de absorción ultravioleta (UVD) son actualmente los detectores más utilizados en cromatografía líquida de alta resolución. Sus características principales son alta sensibilidad, amplio rango lineal, insensibilidad a los cambios en el caudal y la temperatura, y puede usarse para elución en gradiente. Requiere que los componentes de la muestra a medir tengan absorción UV y sea un detector selectivo.
2. El detector de matriz de diodos (PDAD) es un detector óptico multicanal que apareció recién en la década de 1980 y puede considerarse como una rama de UVD. Después del escaneo espectral y el procesamiento por computadora de cada componente eluido, se obtuvo un espectro tridimensional que combina espectro y cromatografía. Entre ellos, el espectro de absorción se usa para análisis cualitativos (para confirmar si se trata de una sustancia pura única) y la cromatografía se usa para análisis cuantitativos. A menudo se usa para análisis cualitativos y cuantitativos de muestras complejas (como muestras biológicas, hierbas chinas). medicamentos).
3. El detector de fluorescencia (FLD) también es un detector selectivo. Su sensibilidad es la más alta entre los detectores de HPLC de uso común y también se usa ampliamente, solo superado por UVD. Adecuado para compuestos que pueden excitar la fluorescencia. Muchas sustancias relacionadas con las ciencias biológicas, como aminoácidos, aminas, vitaminas, esteroides y algunos fármacos metabólicos, pueden detectarse mediante métodos de fluorescencia. Los detectores de fluorescencia son muy útiles en el análisis a nivel de trazas de muestras biológicas, especialmente después de la derivatización fluorescente, donde pueden detectar cantidades muy pequeñas de aminoácidos y péptidos.
Detector universal
1. El detector de índice de refracción (RID) es un detector universal, siempre que el índice de refracción del componente detectado sea diferente al del eluyente. usar. En las ciencias biológicas, es común encontrar varios carbohidratos que no tienen absorción de rayos UV y se usan comúnmente en detectores de índice de refracción diferencial. Su universalidad es más amplia que la UVD, pero su sensibilidad es menor, sensible a los cambios de temperatura e incompatible con la elución en gradiente, lo que limita su uso.
2. El detector de dispersión de luz evaporativa (ELSD) también es un detector universal que puede detectar cualquier muestra que sea menos volátil que la fase móvil y no requiera muestras que contengan cromóforos. El valor de respuesta de ELSD es proporcional a la masa de la muestra, por lo que puede usarse para determinar la pureza de la muestra o detectar sustancias desconocidas. ELSD es más sensible que RID, insensible a los cambios de temperatura, tiene una línea de base estable y puede usarse para elución en gradiente. ELSD ahora se usa ampliamente para detectar carbohidratos, lípidos, ácidos grasos y aminoácidos, fármacos y polímeros.
3. El detector de espectrometría de masas (MSD) es otro detector universal que tiene ventajas sobresalientes en sensibilidad, selectividad, versatilidad y proporciona información estructural y de peso molecular de los compuestos. Sin embargo, su alto costo operativo y complejidad limitan su popularización y aplicación.