¡Describa brevemente los contenidos básicos de la prueba de transformación maligna de células cultivadas! ! ! ! ¡Por favor ayuda amigos! ¡Gracias a todos! ¡Apresúrate!
Objetivos de la prueba
Propósito: Estudiar la morfología y expresión de la proteína p53 durante la transformación maligna de células epiteliales bronquiales humanas inducida por NNK in vitro, y explorar su papel en la alerta temprana y Detección de cáncer de pulmón en fumadores de alto riesgo. Métodos: Se indujeron células BEAS-2B con nitrosamina NNK específica del tabaco (concentración: 500 g/ml), y se determinaron la morfología celular y los parámetros morfológicos celulares (circunferencia, diámetro máximo, diámetro mínimo, relación nucleocitoplasmática y factor de forma) y cambios en la proteína p53. expresión. Resultados: Se estableció un modelo de transformación maligna de células BEAS-2B inducida por 1. NNK ① La resistencia sérica de las células BEAS-2BNNK de quinta generación en el grupo experimental aumentó significativamente. ②Las células BEAS-2BNNK en el pase 15 tienen las características de crecimiento independiente del anclaje (formación de colonias de agar blando). ③Las células bnk BEAS-2 de 25.ª generación formaron tumores en ratones desnudos y la patología fue carcinoma de células escamosas (grado I-II). Cambios morfológicos ① Cambios microestructurales: no hay cambios obvios entre las células BEAS-2B entre generaciones. No hubo diferencias significativas en la morfología de los clones celulares, el patrón de crecimiento, la morfología celular, la morfología nuclear y el número entre las células BEAS-2BNNK en los pases 1, 2 y 5 y las células BEAS-2B de los pases correspondientes. En las generaciones 10, 15, 20 y 25, las células y los núcleos se volvieron redondos gradualmente, aparecieron múltiples nucléolos y las células cambiaron gradualmente de un crecimiento radial a un crecimiento membranoso. ② Cambios ultraestructurales: no hay diferencias significativas entre generaciones de células BEAS-2B. En comparación con BEAS-2B, no hubo diferencias significativas en la morfología celular y nuclear, la morfología de los orgánulos y el número de BEAS-2BNNK en los pases 1, 2 y 5. Las células de las generaciones décima y decimoquinta se hincharon, los núcleos se deformaron gradualmente y aparecieron anomalías nucleares. El nucléolo se agrandó significativamente, los bordes se endurecieron y los orgánulos se hincharon y su número aumentó significativamente. Las células son activas y tienen características obvias de células transformadas. Las células y los núcleos de las generaciones 20 y 25 estaban obviamente distorsionados, los núcleos estaban obviamente fragmentados, había muchos nucléolos y el número de orgánulos se redujo significativamente, mostrando características obvias de las células tumorales. ③ Parámetros morfológicos: no existe una diferencia estadísticamente significativa en los parámetros morfológicos entre las generaciones de células BEAS-2B. En comparación con las células BEAS-2B, no hubo diferencias significativas en los parámetros morfológicos de las células BEAS-2BNNK en la primera, segunda y quinta generación (p>0,05); los parámetros morfológicos de la décima y decimoquinta generación aumentaron gradualmente; y la diferencia fue significativa (P