¿Por qué no se añade suero al tubo estándar para la medición constante de la fosfatasa alcalina Michaelis-Menten?

Para la medición constante de Michaelis-Menten de fosfatasa alcalina, la razón por la cual no se agrega suero al tubo estándar es para restar el aumento en la absorbancia causada por el suero para garantizar la precisión de los resultados de la prueba.

El experimento de determinación constante de fosfatasa alcalina de Michaelis-Menten utiliza fosfato de benceno disódico como sustrato y es hidrolizado por fosfatasa alcalina para generar fenol y fosfato libres. El fenol reacciona con la 4-aminoantipirina en condiciones alcalinas y se oxida con ferricianuro de potasio para formar un derivado de quinona roja. La profundidad del color es proporcional al contenido de fenol. La actividad enzimática se puede calcular en función de la absorbancia, o el contenido de fenol t se puede encontrar a partir de la curva estándar y luego se puede calcular la actividad enzimática. El tubo estándar se utiliza para calibrar el valor colorimétrico estándar. Agregar suero aumentará la absorbancia, por lo que no se puede agregar suero al tubo estándar.