¿Cuáles son las características del hongo Armillaria?
Hongo Armilla) oué l. También conocido como hongo Armillaria y hongo avellana. Pertenece a Basidiomycetes, Laminaria, Ascomycetes, Hongos, Tricholomaceae, Armillaria. Los cuerpos fructíferos son hongos anuales utilizados en alimentación y medicina y son el agente causante de la pudrición de las raíces que daña los bosques. Se distribuye por todo el mundo. China se distribuye principalmente en Heilongjiang, Jilin, Liaoning, Hebei, Henan, Shanxi, Shandong, Gansu, Shaanxi, Qinghai, Xinjiang, Sichuan, Anhui, Zhejiang, Hunan, Hubei, Yunnan, Guizhou, Mongolia Interior, Tíbet y la provincia de Taiwán. El cuerpo fructífero, el estípite y el micelio se pueden utilizar como medicina. De naturaleza cálida y de sabor dulce. El cuerpo fructífero contiene manitol, lecitina, ergosterol, vitamina A (alto contenido), B1, B2, C, PP y otros aminoácidos, entre los cuales el ácido aspártico, el ácido glutámico y la leucina tienen el mayor contenido (semillas bacterianas, micelio fermentado y Gastrodia elata también tiene el contenido más alto (consulte la tabla 21-9). Tiene el efecto de disipar el viento, activar colaterales, fortalecer músculos y huesos. Se puede utilizar para tratar el dolor lumbar y de piernas, la epilepsia, etc. También previene la pérdida de visión, la ceguera nocturna y la piel seca. En la actualidad, el cultivo artificial ha tenido éxito en el Jardín Botánico de la Academia de Ciencias de Guizhou y en el condado de Qixia, provincia de Shandong. Dada la relación especial entre Armillaria y Gastrodia elata, en 1976 también tuvo éxito la aplicación clínica de Armillaria elata en lugar de Gastrodia elata y se identificaron los resultados. Actualmente hay varias empresas farmacéuticas en China. Armillaria fermentum tiene las mismas actividades biológicas que Gastrodia elata a esta dosis, como efectos sedantes y anticonvulsivos sobre el sistema nervioso central, mejora de la circulación sanguínea y aumento del flujo sanguíneo cerebral y coronario. Los resultados de la observación clínica muestran que el efecto curativo sobre los síntomas de vértigo causados por diferentes causas (hipertensión, insuficiencia de la arteria vertebrobasilar, enfermedad de Meniere, disfunción del nervio autónomo y pacientes con deficiencia de yin e hiperactividad yang) es similar al de Gastrodia elata, y es eficaz. para la neurastenia y el insomnio, el tinnitus, el entumecimiento de las extremidades, la epilepsia, la arteriosclerosis cerebral y otras enfermedades también tienen ciertos efectos. Manitol, Armillaria A, Armillaria B, uracilo, uridina, eritritol, arabitol, adenina, adenosina, sacarosa, hidroximetilfurfural, octadecanoato de metilo, etc. Los mismos componentes que Gastrodia elata se extraen y aíslan del producto de fermentación de Gastrodia elata.
Tabla 21-9 Determinación de aminoácidos en Armillaria y Gastrodia elata
*Resultados del análisis: el contenido de ácido glutámico es el más alto, seguido del ácido aspártico y la leucina, y el contenido de metionina más bajo.
Instrumento analítico: analizador de aminoácidos 835-50 totalmente automático.
1. Características morfológicas
(1) Cuerpos fructíferos
En verano y otoño suelen crecer en racimos en la base de tocones de árboles viejos o árboles muertos. y también puede ser parásito de árboles vivos. Las frondas miden unos 10-15 cm de alto, con una cubierta carnosa, semiesféricas y aplanadas, a veces ligeramente con forma de ombligo, de 5-12 cm de diámetro, de color amarillo miel o caqui claro, ligeramente más oscuras en el centro, con pequeñas escamas o racimos de escamas en la superficie o completamente lisas, los bordes son ondulados, con rayas radiales y el mango mide 65.438 metros de largo. El cilindro está ligeramente curvado, a veces la base está ligeramente agrandada (la base del cultivo en botella está poco desarrollada), fibrosa, suave por dentro, hueca en la etapa posterior, marrón claro, la parte superior del tallo blanco no es obvia ni suave. la base del tallo está conectada al rizoma. El estipe es adherido y extendido, casi blanco, con esporas blancas. Las esporas son incoloras y lisas, ovaladas, de 8-9,5 × 5,5-6,5 μ m.
(2) Micelio
Existe en forma de micelio, bolas bacterianas, bacterias bifurcadas y cuerdas bacterianas.
1. Micelio
Al microscopio, las hifas son incoloras y transparentes, con filamentos de diafragma y no forman uniones en forma de cerradura. En cultivo puro, comienza como una alfombra blanca, luego gradualmente se vuelve amarillo oxidado y rojo parduzco, y se vuelve marrón oscuro a medida que envejece. En este momento, las bacterias son frágiles y delgadas, con arrugas en la superficie y, a veces, crecen sobre las bacterias hifas rizadas y esponjosas de color camel. Desde el crecimiento de las hifas hasta el envejecimiento, la fluorescencia se puede ver en la oscuridad, siendo las hifas blancas las que tienen la fluorescencia más fuerte. El micelio a menudo invade el tejido de las raíces o de los troncos más viejos, provocando la pudrición de los árboles.
2. Bacterias esféricas y ramificadas
En el cultivo en matraz agitado, el micelio está formado principalmente por esferas espinosas o bacterias irregularmente ramificadas, y el tamaño de la esfera bacteriana es de aproximadamente 3 -7 mm. marrón claro hueco. Tanto los cocos como las micobacterias emiten fluorescencia en la oscuridad. El brillo es más fuerte después de 4-5 días y se debilita gradualmente después de 7 días.
Paso 3: Cuerda Bacteriana
Es un micelio organizado, una estructura parecida a una raíz retorcida por innumerables hifas delgadas paralelas de color blanco o blanco-amarillo. La capa exterior del pan tiene una vaina, que es blanca cuando es joven y gradualmente se vuelve marrón. El punto de crecimiento de la punta es blanco o blanco-amarillo y se vuelve marrón oscuro cuando está maduro. Tiene varios metros de largo y está bifurcado. En cultivo puro, el tallo de la perla que se extiende dentro de la matriz no cambia de color o cambia de color lentamente, mientras que el tallo de la perla fuera de la matriz cambia de color rápidamente.
Es blanco y quebradizo cuando es joven y fluorescente en la oscuridad. Después del envejecimiento, se vuelve duro y de color marrón oscuro. La observación microscópica encontró que había hifas y septos cortos en la superficie de la cuenta, y a veces se veían cristales incoloros en forma de varilla alrededor de las hifas (Figura 21-15).
Figura 21-15 Diagrama morfológico del hongo Armillaria
1 Cuerpo fructífero 2. Sección longitudinal del cuerpo fructífero 3. Esporas
En segundo lugar, características biológicas
El hongo Armilla es más común en verano y otoño. Crece de forma saprofita en tocones viejos y árboles muertos, o parasita árboles vivos. Puede infectar a más de 200 tipos de árboles, los más comunes son el pino, el abeto, el abeto, el alerce y otros árboles de hoja ancha. La Armillaria parásita o saprofita también se puede encontrar en las impaciencias, la peonía, el ginseng americano, el ruibarbo comestible y la caña de azúcar. , fresa, patata, etc.
(1) Temperatura
Según Roitsma (1932), el micelio de Armillaria permanece astigmático en un determinado medio de cultivo a 18-22°C durante 3-4 meses. Luego, los cuerpos fructíferos pueden ser formado. Li Liangsheng et al. (1987) informaron que los cuerpos fructíferos se pueden formar en condiciones generales de 12 a 20 °C en mi país, y la temperatura óptima es de 15 a 18 °C.
El micelio puede crecer entre 5 y 30 ℃, pero entre 24 y 27 ℃ es el más adecuado. Las cepas se pueden formar a 15-28°C, prefiriéndose 25°C. El micelio de Armillaria puede emitir luz a 10-30 °C, y la luz más intensa se emite a 24-28 °C. Si supera los 37 ℃, perderá su capacidad de emitir luz.
(2) Aire
Armillaria es una bacteria aeróbica y puede crecer bien sólo si está bien ventilada. Durante el proceso de cultivo de fermentación sumergido, también se requiere ventilación y agitación de aire adecuada.
(3) Humedad
El crecimiento y desarrollo del hongo Armillaria requiere suficiente agua y una alta humedad del aire. El micelio crece mejor cuando el contenido de humedad del sustrato es del 50-60% y la humedad relativa del aire es del 80%. La formación de cuerpos fructíferos requiere mantener la humedad relativa del aire entre el 85-95%.
(4) Valor de pH
Armella Armillaria puede crecer a un pH de 4 a 7, pero un pH de 6 es más adecuado.
(5) Iluminación
La luz inhibe el crecimiento de la bacteria Armillaria. El micelio y el estípite no requieren luz durante su crecimiento, pero se requiere luz dispersa para formar cuerpos fructíferos. Li Liangsheng y otros informaron que no se requiere luz solar directa durante el cultivo artificial. Generalmente, 100-500 LX pueden crecer bien y formar cuerpos fructíferos.
(6) Nutrición
Armillaria es un hongo parásito facultativo que puede crecer saprofitamente sobre árboles o tocones caídos y parasitar árboles vivos. Se pueden utilizar cáscaras de semillas de algodón, mazorcas de maíz, aserrín, salvado de trigo, salvado de arroz, etc. para cultivar cuerpos fructíferos según las condiciones locales. Para el cultivo líquido de micelio, la glucosa es la mejor fuente de carbono y el polvo de pupa de gusano de seda y la peptona son las mejores fuentes de nitrógeno.
En tercer lugar, la tecnología de cultivo
Hay pocos informes bibliográficos sobre la tecnología de cultivo del cuerpo fructífero de Armillaria. En la actualidad, sólo Shandong Li Liangsheng et al. (1988) informaron del éxito del cultivo artificial del hongo Armillaria, pero no se ha promovido. En la década de 1970, la fermentación del micelio de Armillaria se produjo con éxito y se ha aplicado clínicamente, logrando enormes beneficios sociales y económicos.
(1) Utilice ladrillos de bacterias para cultivar los cuerpos fructíferos de Armillaria.
1 Preparación del medio de cultivo
Exponga las cáscaras frescas de las semillas de algodón durante 2-3 días y tome 100 kg. Cáscaras de semillas de algodón, añadir 20 kg de residuo de harina de maíz, 1 kg de yeso, 1 kg de fertilizante fosfatado, 0,15 kg de carbendazima. Después de mezclar, sujételo firmemente con las manos y deje caer 65, 438+0-2 gotas entre los dedos. El valor del pH es 6,5.
2. Preparación antes de la siembra
El molde móvil es de 58×45×12cm y la lámina de plástico es de 100cm2. Las áreas interiores y exteriores de cría deben lavarse con agua de cal viva con un valor de pH superior a 12, y todos los utensilios y láminas de plástico deben empaparse en una solución de permanganato de potasio al 0,1% durante 3 a 5 minutos.
Siembra
Coloque el revestimiento de plástico en el molde móvil, apile las cáscaras de semillas de algodón mezcladas sobre la lámina de plástico, a unos 6 cm de altura, espolvoree una capa de bacterias y agregue una esparcida. capa de material de cultivo, extienda tres capas de material de cultivo, entierre el material de cultivo grande en las cuatro esquinas y el centro del material de cultivo, espolvoree una capa de material de cultivo triturado en la superficie, compáctelo adecuadamente, nivelelo, cúbralo con periódico , y utilizar láminas de plástico. Envolverlo bien y compactarlo con pequeñas tablas de madera.
4. Manejo del período de crecimiento micelial
El micelio puede crecer a 22-28 ℃, pero 25 ℃ es adecuado, por lo que la temperatura durante la etapa debe controlarse entre 24-26 ℃. entre. A las 24 horas de la siembra brotó y a las 48 horas de la siembra parecía haber comido un trozo de material. Después de 7 días, el micelio blanco puede cubrir la superficie del material. En este momento, la película debe retirarse y ventilarse todas las mañanas y noches.
Puede penetrar a los 25 días y entrar en la etapa de diferenciación.
5. Gestión del período de crecimiento del cuerpo fructífero
Las investigaciones han descubierto que Armillaria puede producir cuerpos fructíferos entre 2 y 20 °C, pero crece más rápido entre 15 y 18 °C. La humedad relativa del aire debe mantenerse entre el 85 y el 95 %, la luz solar directa está estrictamente prohibida y crecerá bien con una luz de 100 a 500 LX. Se puede cosechar en 3-5 días.
Después de cosechar un lote de cuerpos fructíferos, los ladrillos de hongos se secan al aire durante 2 o 3 días. La superficie está seca y el interior está húmedo, con un contenido de humedad de aproximadamente el 50 %. Luego rocíe la solución nutritiva hasta que el contenido de humedad del ladrillo en forma de hongo alcance aproximadamente el 70% y cúbralo con una lámina de plástico. Los cogollos de los hongos se formarán después de 3 a 5 días y se pueden cosechar 5 lotes.
Preparación de la solución nutritiva: disuelva 250 g de glucosa, 300 tabletas de levadura y 1100 tabletas de vitaminas en una cantidad adecuada de agua, luego agregue agua hasta 50 kg y la temperatura del agua sea de 25-30 °C.
Según el método de producción anterior, 15 bloques de trufa* * * cosechan 37,25 kg de cuerpos fructíferos de Armillaria.
Los cuerpos fructíferos de Armillaria se pueden producir en primavera y otoño. Solo se necesitan entre 45 y 50 días desde la siembra hasta la recolección de 5 lotes.
6. Cosecha y elaboración
Cuando la copa alcanza el 80%, llega el momento de cosechar. Primero déle la vuelta al sol, espere hasta que el cuerpo de la fruta esté ligeramente seco, hornee a 60-65 ℃ y déle la vuelta con frecuencia hasta que los tallos y la cubierta estén secos, luego colóquelo en una bolsa de plástico y luego colóquelo. En una caja de cartón (o caja de madera), guárdelo en un lugar fresco y seco.
Además, también existe un método para cultivar cuerpos fructíferos utilizando material de desecho de hongos que se ha cultivado durante 2 a 4 años.
(2) Fermentación y producción de micelio de Armillaria
En la década de 1970, el Instituto de Materia Médica de la Academia China de Ciencias Médicas fermentó y produjo con éxito preparaciones de Armillaria. El método de producción de Armillaria por fermentación se puede dividir en fermentación líquida y fermentación sólida.
1. Fermentación líquida
(1) Proceso de producción de fermentación líquida
(2) Preparación del medio de cultivo
① Medio de cultivo en pendiente : Se puede utilizar medio de cultivo PDA. (2) Disuelva 50 g de jugo de salvado de trigo del medio de semilla S, 20 g de glucosa, 1,5 g de dihidrogenofosfato de potasio, 0,75 g de sulfato de magnesio y 1100 mg de vitamina B1 (o sin agregar), luego agregue agua del grifo hasta 1000 ml, con un pH natural (6-6,2). Matraz Erlenmeyer de 500 ml, agregue 0,5 g de pupa de gusano de seda en polvo a cada botella, 100 ml del medio de cultivo anterior es el medio de cultivo de semillas de primer nivel o 1000 ml de medio de cultivo en un matraz Erlenmeyer de 5000 ml, 5 g de pupa de gusano de seda en polvo es el medio de cultivo de semillas de segundo nivel. ③ Medio de fermentación: 1% glucosa, 2% sacarosa, 1% torta de soja en polvo, 1% crisálida de gusano de seda en polvo, 0,15% dihidrógenofosfato de potasio, 0,075% sulfato de magnesio, agua del grifo, pH natural, el medio anterior ha sido esterilizado con vapor a 121 °C 30 minutos.
(3) Cultivo ① Cultivo inclinado: la inclinación del tubo recién transferido crecerá bien después de ser cultivado a 25-26°C durante 15-20 días y estará listo para su uso. En este momento, el micelio es de color marrón rojizo con bordes blancos, fluorescente en la oscuridad, arrugado en la superficie y, a veces, hifas aéreas de color camello ligeramente rizadas. En la parte posterior se pueden ver hongos blancos y amarillos que crecen en el medio de cultivo. Los hongos que crecen fuera del medio de cultivo se vuelven de color marrón oscuro después del envejecimiento. (2) Cultivo de semillas: el cultivo de semillas de primer nivel, la cepa inclinada se conecta a una botella de medio de cultivo de semillas y se cultiva en un matraz agitado a 25-26 °C durante 5-6 días. Cultivo de semillas secundarias: Inocular una botella de semillas primarias en el medio de cultivo de semillas secundarias y cultivar agitando durante 3-4 días. Las semillas terciarias son cultivos de semillas expandidos en frascos de semillas. Generalmente, se ponen 25-30 litros en un frasco de 40 litros, se esteriliza a 121°C durante media hora, se enfría, se inocula con 5-10%, se agita y se ventila a 26-28°C, velocidad de agitación 150-180 rpm, tasa de ventilación. . ③ Cultivo de fermentación: aireación y agitación del cultivo en el tanque de fermentación. La cantidad de inoculación fue del 10% y las condiciones de fermentación fueron las mismas que las del cultivo de semillas en tanques de semillas. Después de cultivar durante 7 a 9 días, el líquido de fermentación se vuelve marrón y el micelio es denso y está listo para sacarlo del tanque. (4) Cosecha: Después de la fermentación, use una centrífuga o placa y marco para filtrar, y el filtrado se concentra a presión reducida hasta obtener una pasta, se mezcla con bacterias, se seca a 65-75 °C, se tritura, se controla la calidad y se comprime.
(4) Conservación de la cepa
Armillaria se puede almacenar durante 8 meses a 1 año a una temperatura baja de 4-5°C. Pero debes volver a convertirlo cuando lo uses.
2. Cultivo de fermentación sólida
Los métodos y condiciones del cultivo inclinado y del cultivo de semillas son los mismos que los de la fermentación líquida.
(1) Preparación del medio de fermentación sólido
Poner 20 gramos de harina de maíz, 20 gramos de salvado de trigo y 90 ml de agua del grifo en una botella (o lata) de nitrógeno Kjeldahl de 500 ml. botella), agitar bien, esterilizar a 1 kg/cm2 durante 30 minutos y luego esparcir en caliente.
(2) Cultivo de fermentación sólida
Inocular las semillas secundarias en el medio sólido, con un volumen de inoculación de 10-20ml por botella, dependiendo de la superficie. Después de agitar, Armillaria comienza a crecer en aproximadamente 3 días a 25-27°C. El micelio crece en la superficie del medio de cultivo en 8-10 días y se expande por todo el medio de cultivo en 15-20 días, formando bacterias.
(3) Cosecha
Cuando esté maduro, sácalo de la botella y sécalo antes de hornear. Las temperaturas de secado y otros procedimientos son los mismos que para los métodos de producción de fermentación líquida.
En la actualidad existen 10 fábricas farmacéuticas en el país. El tanque de fermentación mínimo es de 3t y el máximo de 20t. Hay dos fábricas farmacéuticas dedicadas a la fermentación sólida. Además de comprimidos, también produce gránulos y líquidos orales. Además de satisfacer la demanda interna, algunos también se exportan.