Cultivo de tejidos de fresa

1. Procedimientos de cultivo y medios de cultivo

De mayo a junio, tome puntas de brotes de 0,3 a 0,4 mm de estolones frescos de fresas sanas y libres de enfermedades para el cultivo de tejidos. explantes.

El medio básico para inducir la diferenciación de yemas en el cultivo de puntas de brotes de fresa es MS, suplementado con 6-BA 0,5 mg/L, NAA 0,2 mg/L, sacarosa 30 g/L y agar en polvo 6,5 g/L. y ajustado. El valor del pH es 5,8-6,0.

En la etapa de propagación de las puntas del tallo de la fresa, agregue 6-BA 0,5 mg/L y NAA 0,01 mg/L al medio MS. El método principal de expansión de la propagación es dividir las plántulas agrupadas en bloques. es decir, cada 5-7. La cepa se cortó en una sola pieza y se transfirió a medio de subcultivo. Durante el proceso de transferencia de plántulas, la eliminación de las hojas primarias favorece la diferenciación de nuevas plántulas, y la eliminación de callos en cualquier momento durante el proceso de expansión favorece la proliferación y el crecimiento de nuevas plántulas.

Se agregaron diferentes concentraciones de IBA 1/2 ms al medio de enraizamiento. Los resultados mostraron que cuando la concentración de IBA fue de 0,1 mg/L, la tasa de enraizamiento fue la más alta, que fue de 100, y la media. El número de raíces fue 2,4. Sin la adición de IBA y una concentración de IBA superior a 0,2 mg/L, la mayoría de las plántulas producen callos en la base de la plántula, y luego se diferencian y echan raíces en el callo, lo que reduce en gran medida la tasa de supervivencia.

2. Puntos técnicos de funcionamiento y condiciones de cultivo

(1) Esterilización e inoculación

Pretratamiento Para lograr una esterilización completa, los materiales inoculados suelen humedecerse primero. para que el esterilizante pueda penetrar suavemente en el material. Se puede utilizar una variedad de agentes humectantes. Usamos alcohol al 75% y el tiempo de mojado es de medio minuto a 1 minuto.

Existen muchos desinfectantes comúnmente utilizados en el cultivo de tejidos de fresa. Remojamos el inóculo con una solución acuosa de hipoclorito de sodio al 10% (que contiene 0,4-0,5 de cloro disponible) durante 10-15 minutos; utilizamos hipoclorito de calcio (polvo blanqueador) para remojar el inóculo con su sobrenadante saturado durante 15-30 minutos; 10-12 Remojar en solución acuosa durante 10-20 minutos; Remojar en solución acuosa 5-10 de Xinjiazhuang durante 10-15 minutos; Remojar en solución acuosa de cloruro de mercurio 0,1 durante 8-10 minutos. Entre ellos, los primeros cuatro desinfectantes son relativamente seguros para los materiales inoculados, pero debido al largo tiempo de esterilización, la capa exterior de los materiales inoculados a menudo se oxida y se dora, lo que afecta el efecto del cultivo. El cloruro de mercurio tiene una fuerte capacidad bactericida, pero un tiempo de remojo más prolongado puede provocar envenenamiento del inóculo. Por lo tanto, en el cultivo de tejidos de fresa, si se sincroniza correctamente, el cloruro de mercurio es un esterilizante ampliamente utilizado. El inóculo esterilizado debe enjuagarse completamente con agua esterilizada y, por lo general, el agua debe cambiarse de 3 a 5 veces.

El objetivo principal es inocular el cultivo de tejido de fresa con vacunas libres de virus. Hay muy poco material de la punta del tallo para inocular. Es necesario pelar con precisión y habilidad los puntos de crecimiento de la punta del tallo. Es más apropiado utilizar medio sólido y prestar atención al momento de la inoculación. No entierre toda la punta del tallo en el medio. El medio de cultivo debe esterilizarse en autoclave a 1-1,1 atmósferas durante 20 minutos.

Desde el momento de la inoculación de los materiales hasta el crecimiento de las plántulas enraizadas, la temperatura del cultivo generalmente debe ser estable en 25±2°C. 12 horas de luz solar, intensidad lumínica 2000Lx. Cuando la temperatura en la sala de cultivo está dentro del rango de 18-26°C, las plántulas en botella pueden crecer y echar raíces normalmente. Sin embargo, cuando la temperatura es superior a 28°C, las plántulas verdes generalmente se vuelven amarillas y la tasa de enraizamiento disminuye. , las puntas de las raíces se vuelven amarillas y envejecen, y las plántulas son propensas a la vitrificación.

Tecnología de trasplante de plántulas de cultivo de tejidos

1. Tecnología de trasplante

Las plántulas de tubo de ensayo tienen 15 días y una longitud de raíz principal de aproximadamente 1,5 cm. las plántulas no necesitan raíces. La tasa de supervivencia del trasplante puede llegar a 90-100.

Antes del trasplante, se debe sacar el frasco de cultivo de la sala de cultivo, colocarlo en condiciones naturales y abrir la tapa del frasco para ventilar. Después de 24 horas, saque las plántulas de la botella, retire el medio de las raíces y el cuello y plántelas en un vivero o en un pozo para aclimatarse.

El sustrato puede ser serrín o humus descompuesto esterilizado, o una mezcla esterilizada de vermiculita y perlita con una proporción de volumen de 1:1, o una mezcla de tierra de jardín y cenizas con una proporción de volumen de 2:1. .

2. La clave para mejorar la tasa de supervivencia del trasplante

La tasa de supervivencia de plántulas enraizadas con raíces adventicias provenientes directamente de la base del tallo, muchas y raíces gruesas, más que 3 hojas, hojas grandes, gruesas y de color verde oscuro. Generalmente más altas.

Los sustratos de cultivo deben aclararse con agua limpia o desinfectarse con una mezcla de carbendazima o tiofanato-metilo. Cuando utilice ceniza como sustrato, neutralícela con ácido acético glacial al 0,2% para reducir la alcalinidad.

Al trasplantar, adopte "plantación profunda y entierro poco profundo". La plantación profunda significa que las raíces deben plantarse profundamente al trasplantar. El estándar para la plantación poco profunda es hacer que el cuello de la raíz de las plántulas esté al ras de la superficie del suelo o ligeramente por encima de la superficie del suelo.

Presta atención al control de la luz, la temperatura y la humedad. Las plántulas trasplantadas deben cultivarse en un invernadero o cobertizo de plástico, con la temperatura controlada entre 15 y 20 °C y la humedad mantenida en torno a 80 °C. Al mismo tiempo, debido a que los tallos de las plántulas recién trasplantadas son relativamente frágiles, rocíe tanto como sea posible sin demasiada agua. Déjelos secar antes de rociar. Sombree el 50%, la luz del sol puede aumentar gradualmente después de una semana.