¡Hola! ¿Dónde estás? ¿Cuánto cuesta cultivar anomatis? ¿Del tipo amable?
El cultivo de tejidos ha demostrado ser un método eficaz para producir y conservar muchas plantas en peligro de extinción. Este experimento tiene como objetivo encontrar un método de producción a gran escala eficiente, de bajo costo y respetuoso con el medio ambiente, y esforzarse por brindar apoyo técnico para la industrialización de Anomatis.
1 Materiales y métodos
1.1 Materiales de prueba
Fujian Anomatis (variante) es una plántula de cultivo de tejidos de Zhangzhou, Fujian. Anoectochilus de la provincia de Taiwán (variante B) adopta cultivares locales y plántulas de cultivo de tejidos en la provincia de Taiwán.
1.2 Método
Este experimento se realizó en el laboratorio de cultivo de tejidos de nuestro instituto. El medio básico para inducir la proliferación es MS + 15 g/L de sacarosa + 8 g/L de agar, y el medio básico para el enraizamiento es 1/2 MS + 15 g/L de sacarosa + 8 g/L de agar, con un valor de pH de 5,8. La temperatura se controla a (25 1) ℃, el tiempo de luz es de 8 ~ 10 h/día y la intensidad de la luz es de 1500 ~ 2000 Lx.
1.2.1 Inducción de yemas agrupadas. Tome Anomatis que crezca vigorosamente, retire las raíces y las hojas, córtelos en segmentos de tallo con 1 o 2 nudos de yemas axilares y luego cultívelos en medio MS con diferentes niveles hormonales (Tabla 1). Hubo 20 botellas por tratamiento por variedad, y cada botella tenía 3 segmentos de tallo.
1.2.2 Proliferación de yemas agrupadas. Los brotes agrupados diferenciados de dos especies de Anoectochilae se dividieron y se transfirieron a un medio de subcultivo suplementado con diferentes concentraciones de 6BA y NAA. Cada grupo se configuró con 6 tratamientos (Cuadro 3), y cada tratamiento recibió 30 yemas en racimo. Después de 20 días, se observó el efecto de proliferación. Al comparar sus efectos sobre la proliferación, se selecciona la mejor fórmula hormonal.
1.2.3 Inducción de enraizamiento. Cuando las yemas adventicias alcanzan entre 3 y 4 cm, se cortan desde la base y se inoculan en medios de enraizamiento con diferentes proporciones hormonales. Se establecen un total de 6 tratamientos (Tabla 4). Después de 25 días observar la situación de enraizamiento. Selecciona las mejores condiciones de crecimiento.
1.2.4 Trasplante de campo. Las plántulas se cultivan en el medio de enraizamiento durante 35 a 50 días. Cuando las raíces crecen hasta 3 a 4 cm, las plántulas en botella se trasladan a un invernadero de endurecimiento de plántulas o a un lugar fresco y ventilado. Se necesitan aproximadamente 7 días para endurecer las plántulas para que se adapten, luego lavarlas y trasplantarlas. La máquina trasplantadora está hecha de tierra de humus, arena de río y loess en una proporción de 6:2:2, y se rocía con una solución de carbendazim o permanganato de potasio del 1% al 2% para su desinfección.
2 Resultados y análisis
2.1 Experimento de inducción de yemas en racimo
Mediante la inducción de segmentos de tallo, las yemas axilares de Anomatis pueden reproducir rápidamente nuevas yemas en racimo. Después de 15 días de cultivo, se observaron yemas adventicias de color blanco lechoso que comenzaron a diferenciarse en las axilas de los segmentos del tallo y en la base de los segmentos del tallo. Después de 30 días, se pueden ver racimos de cogollos evidentes. Los resultados mostraron (Tabla 1) que diferentes concentraciones de hormonas tuvieron diferentes efectos en la inducción de yemas del tallo de las dos especies de Anomatis de Fujian y Taiwán, y las tasas de proliferación de yemas agrupadas también fueron significativamente diferentes.
Para la variedad A, la combinación hormonal de 6BA y NAA es mejor que la hormona KT, lo cual es especialmente obvio en el germoplasma. Los cogollos que induce suelen ser fuertes y verdes. Entre ellos, la tasa de germinación de los cogollos tratados con 6BA4,0 mg/L+NAA0,1 mg/L fue la más alta, alcanzando el 66,7 %, y la calidad de los cogollos fue mejor. Del análisis de diferentes niveles de concentración de KT, 6BA y NNA, se puede ver que el tratamiento hormonal de concentración media tiene un mejor efecto de inducción en las yemas del racimo de la variedad A
Para la variedad B, el efecto de inducción de la combinación hormonal de 6BA y NAA también es buena. Mejor que la hormona KT, el número de germinación y la calidad de los cogollos mejoran. Según el análisis, entre los seis tratamientos hormonales probados, la tasa de germinación de los cogollos del tratamiento 6BA5,0 mg/L + NAA0,1 mg/L alcanzó el 86,7% y la calidad de los cogollos fue mejor. Según el análisis de concentración de gradiente de KT o 6BA-NAA, a la variedad B le gustan las concentraciones altas de ambas hormonas, y la concentración más alta es la mejor para ambos tipos de hormonas de cultivo. Sin embargo, se necesita más investigación para determinar a qué alto nivel de concentración la variedad B puede lograr el mejor efecto de inducción.
La prueba también mostró que los resultados de la selección hormonal de las razas A y B eran similares. Sin embargo, desde la perspectiva de los efectos específicos, el número y la calidad de los cogollos de la variedad B son mejores que los de la variedad A. Esto puede estar relacionado con las características de las dos variedades, porque la variedad silvestre Anomatis en Taiwán es grande y tiene fuertes vitalidad.
2.2 Prueba de proliferación de yemas en racimo
Como se puede observar en la Tabla 2, diferentes niveles de tratamiento hormonal tienen diferentes efectos sobre la proliferación de yemas en racimo de las dos especies de Anoectochilus. Para la variedad A, la proliferación de 6BA 2,0 mg mg/L + NAA 0,1 mg/L, 6ba 1,0 mg/L + NAA0,5 mg/L y 6BA 3,0 mg/L + NAA0 .1 mg/L Los múltiplos se acercan a más de 5 veces, entre los cuales 6BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L alcanza 6.07 veces, lo cual es mucho mayor que otros tratamientos. Al comparar los resultados de seis tratamientos con 6BA y NAA, se puede ver que la proporción de concentración de 6BA y NAA es de 20 a 30 veces, y los múltiplos de proliferación son cercanos a 5 veces. Una proporción de concentración demasiado baja o demasiado alta reducirá su efecto de proliferación. La variedad B solo tiene un coeficiente de proliferación de 4 en los tratamientos 6BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L y 6BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L, y la diferencia entre ambos tratamientos no es significativa. Se puede ver a partir de las concentraciones y los efectos de proliferación de diferentes tratamientos que 6BA tiene un mayor impacto en la proliferación de la variedad B, y el efecto de proliferación se fortalecerá a medida que aumente la concentración de 6BA. Debido a las limitaciones de las condiciones experimentales, es imposible analizar más a fondo el efecto de proliferación en concentraciones más altas, y la investigación relacionada debería continuar en el futuro. Con base en el análisis anterior, se puede ver que la fórmula de proliferación óptima para la variedad A es MS+6BA 2,0 mg/L+NAA0,1 mg/L, y la fórmula de proliferación óptima para la variedad B es MS+6BA 3,0 mg/L+. NAA0.1mg/L o 6Ba3 .0mg/L+NAA0.5.
mg/L.
Comparando las dos variedades A y B, se puede observar que la variedad B prefiere altas concentraciones de 6BA, y su tasa de proliferación no es tan rápida como la de variedad A, sólo 2 veces mayor que la variedad A. /3, pero la calidad de los cogollos es mejor que la de la variedad A, y los individuos son más grandes y más sanos.
2.3 Experimento de promoción de raíces y fortalecimiento de plántulas
A través de los resultados de promoción de raíces de cinco niveles hormonales de la variedad A y la variedad B (Tabla 3), se puede observar que IBA1.0mg/ L y NAA0 0,5 mg/L tienen buenos efectos promotores de raíces y tanto la cantidad como la calidad han alcanzado un alto nivel. En términos generales, la variedad A es más fácil de enraizar. Su tasa de enraizamiento, número de raíces y longitud de raíces son mejores que los de la variedad B, pero la calidad de las raíces es peor que la de la variedad B. Aunque la variedad B tiene menos raíces al trasplantar, tiene mejores. calidad y es más fácil de sobrevivir.
2.4 Trasplante de campo
Las plántulas se cultivan en el medio de enraizamiento durante 35-50 días. Cuando crecen hasta 3-4 cm, las plántulas en botella se trasladan a un lugar de endurecimiento de plántulas. invernadero o un lugar fresco y ventilado. Se necesitan aproximadamente 7 días para endurecer las plántulas para que se adapten, luego lavarlas y trasplantarlas. Los resultados experimentales muestran que la tasa de supervivencia en campo de Anomatis generalmente puede alcanzar más del 60%. Combinado con instalaciones de cultivo, como cortinas de agua, equipos de filtración y otras instalaciones modernas para el cultivo de flores, la tasa de supervivencia se puede mejorar considerablemente. Si se utilizan instalaciones de cultivo de Phalaenopsis para el trasplante, la tasa de supervivencia puede alcanzar más del 98%, pero el costo aumentará considerablemente.
Según experimentos de cultivo de campo, Anomatis en Taiwán crece rápidamente, tiene plantas altas y es altamente resistente al estrés. Su rendimiento es aproximadamente 65.438±0,5 veces mayor que el de Anomatis nativo en Fujian. Aunque la Anomatis taiwanesa tiene poca capacidad de macollamiento, crece prolijamente y es adecuada para la producción industrial. Los cogollos de Fujian Anomatis son fáciles de germinar, pero tienen un mayor impacto en la planta principal y producen de forma irregular. Si se clasifica según los requisitos de calidad de exportación, Fujian Anomatis pertenece a la categoría más pobre.
3 Conclusión y Discusión
Agregar diferentes tipos y concentraciones de hormonas al medio de cultivo básico tiene diferentes efectos sobre la inducción y proliferación de yemas de explantes de Anomatis. En este experimento, la combinación de 6BA y NAA tuvo un efecto más obvio en las dos especies de Anomatis que KT. Entre ellos, 6BA4,0 mg/L+NAA.
El tratamiento de 0,1 mg/L tuvo el mejor efecto de inducción de yemas de Anoectochilus fujian, alcanzando un 66,7%. El tratamiento de 6BA5,0 mg/L+NAA0,1 mg/L tuvo el mejor efecto de inducción de yemas de Anomatis Taiwan, alcanzando el 86,7%. El tratamiento con 6BA2,0 mg/L+NAA0,1 mg/L tiene el mejor efecto sobre la proliferación de yemas en racimo de Anomatis fujian, con una tasa de proliferación de más de 6 veces. Los tratamientos de 6BA3,0 mg/L+NAA0,1 mg/L y 6BA3,0 mg/L+NAA 0,5 mg/L tienen el mejor efecto sobre la proliferación de yemas de Anomatis formosana, con una tasa de proliferación de aproximadamente 4 veces. En general, la tasa de inducción de yemas de A. formosan es mayor que la de A. fujian, mientras que la tasa de proliferación de yemas agrupadas de A. fujian es mayor que la de A. formosan. La prueba también mostró que la calidad individual de los cogollos agrupados de Taiwan Anomatis era mejor que la de Fujian Anoectochilus, y el crecimiento fue más vigoroso.
El cultivo de inducción y proliferación de Anoectochilus Taiwan necesita más investigación. Este experimento demostró que A. formosan mostraba preferencia por altas concentraciones de las hormonas KT y 6BA durante el cultivo de inducción y proliferación. Sin embargo, debido a las limitaciones de las condiciones experimentales, no se ha estudiado su rendimiento en concentraciones más altas. Por lo tanto, el siguiente paso será estudiar los efectos de Anoectochilus Taiwan en el cultivo de inducción y proliferación en condiciones de alta concentración de 6BA.
En el cultivo de enraizamiento, los efectos promotores de raíces de diferentes tratamientos hormonales en diferentes especies de Anomatis son básicamente los mismos, entre los cuales IBA 1,0 mg/L y NAA 0,5 mg/L tienen los mejores efectos promotores de raíces. El número promedio de raíces de Anomatis en Taiwán es menor que el de Anomatis en Fujian, y las raíces son más gruesas y más cortas. Cuando se cultiva en el campo, Taiwan Anomatis tiene una vitalidad más fuerte y una mayor tasa de supervivencia.
En este experimento también se estudió el efecto del carbón activado sobre el enraizamiento. Los resultados muestran que el carbón activado puede promover el enraizamiento, mejorar la tasa de enraizamiento y la calidad de las raíces. Agregar un 0,1% de carbón activado puede acortar el tiempo de enraizamiento de Anoectochilus de 3 a 5 días, aumentar la tasa de enraizamiento en aproximadamente un 10% y ralentizar eficazmente el envejecimiento de las raíces. El mecanismo específico aún debe estudiarse más a fondo.
En la etapa inicial del endurecimiento y trasplante de las plántulas, se debe prestar atención a mantener el ambiente ventilado y fresco. Especialmente la temperatura al mediodía no debería ser demasiado alta. Al trasplantar, preste atención a la desinfección del suelo y de las propias plantas. La desinfección por pulverización suele utilizar carbendazim o una solución de permanganato de potasio. Los experimentos han demostrado que el cultivo protector puede mejorar la tasa de supervivencia de los trasplantes de Anomatis. En un entorno con cortinas de agua e instalaciones de filtración, la tasa de supervivencia se puede aumentar hasta aproximadamente el 98%. En campos con una desinfección normal, la plaga se produce gravemente y la tasa de supervivencia es sólo del 60%. Por tanto, es particularmente importante mejorar el seguimiento de los patógenos ambientales de las plantas y fortalecer la gestión del proceso de cultivo.