¿Qué es el adenovirus?
Es un virus que puede infectar el tracto respiratorio, el tracto gastrointestinal, el tracto urinario y la vejiga, los ojos y el hígado.
¿Qué es el adenovirus?
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Composición del adenovirus
El adenovirus tiene una estructura esférica y no está envuelto. Sus partículas virales suelen estar dispuestas en forma de celosía en el núcleo de las células infectadas. Cada partícula viral contiene un ADN bicatenario lineal de 36 kb con un extremo invertido (TITR) de 100 a 600 pb en ambos extremos. Dentro del ITR se encuentra la señal de empaquetado del virus, que es un elemento de acción cis necesario para el empaquetado del virus. El genoma contiene genes tempranos E1~E4 relacionados con la replicación de adenovirus y genes tardíos L1~L5 relacionados con el ensamblaje de partículas de adenovirus. El ADN lineal de doble cadena y la proteína central forman una médula con un diámetro de 60 a 65 nm, que está envuelta por una cápside. La cápside es un icosaedro, compuesto por 252 partículas de capa, con un diámetro de 8 a 10 nm. Las partículas de capa están dispuestas en una superficie triangular con 6 en cada lado, 240 de los cuales son hexágonos (partículas de capa sin vértice) y los otros 12 son pentágonos (partículas de capa de vértice). Cada hexón es un homotrímero de proteínas hexónicas, y la molécula hexónica del trímero tiene una hélice triangular y una base pentaédrica. El área de la torre consta de cuatro bucles, bucle1, bucle2, bucle3 y bucle4, y la base incluye dos áreas, p1 y p2 [3]. El epítopo del hexón es el estándar para diagnosticar diferentes serotipos. Incluye los componentes antigénicos del adenovirus de mamíferos y es la parte más sensible del virión a la presión de selección inmune. 65, 438+0 prolongaciones de fibras (adenovirus de mamíferos) o 2 prolongaciones de fibras (adenovirus aviar), longitud 9-77. Cada base de pentón se une a 5 nm. Estas fibras sobresalen de la superficie de la cápside basada en proteína pentona, y las puntas de las fibras forman la región de la cabeza. Los procesos fibrosos son específicos del suero y contienen epítopos específicos de especies responsables de la hemaglutinación in vitro. El adenovirus contiene un 13% de ADN y un 87% de proteínas, con un peso molecular de aproximadamente 175×106. El genoma viral es ADN lineal bicatenario que contiene aproximadamente entre 35 y 36 kb. Entre las composiciones de ADN de los tipos de adenovirus 12, 18 y 31, el % molar de G+C es el más bajo (48% ~ 49%), que es un genotipo con alta carcinogenicidad para los animales. Los adenovirus tipos 1, 2, 4, 5 y 8 tienen un % molar de G+C más alto (61%), pero tienen una carcinogenicidad baja o nula. Este es el criterio para agrupar los aislados de adenovirus humanos. Según la homología genética, el adenovirus humano se puede dividir en 6 grupos, como A ~ F, etc. El genoma del adenovirus existe en forma de ADN lineal de doble cadena, que está estrechamente rodeado por la proteína VII y una pequeña proteína llamada mu, que desempeña un papel similar al de las histonas. Otra proteína, V, se une a este complejo ADN-proteína y lo conecta con la cápside viral a través de la proteína VI. En los extremos 5' de las dos cadenas, hay una estructura especializada llamada complejo de proteína terminal de ADN (pTP) (ADN-TPC) que está unida por enlaces de valencia. Esta estructura está estrechamente relacionada con la replicación de los adenovirus. Hay una secuencia de repetición terminal invertida (ITR) de 100 pb en ambos extremos del genoma del adenovirus, que es el sitio de inicio de la replicación. En el extremo 3' de la ITR izquierda, hay una señal de empaquetamiento (ψ) de aproximadamente 300 pb de longitud, que media el empaquetamiento del genoma del adenovirus en la cápside viral. Para los adenovirus, sólo la secuencia de aproximadamente 0,5 kb en ambos extremos, incluida la ITR y la señal de empaquetamiento (ψ), es un elemento que actúa en cis, lo que significa que debe ser transportada por el propio vector de adenovirus, mientras que las otras 30 proteínas pueden ser transportadas por el propio vector de adenovirus. transportado por transcomplementación auxiliar viral (o celular). Hay alrededor de 11 tipos de proteínas virales (TP y P1 ~ Pⅹ), cuatro de las cuales (polipéptidos virales Pⅴ, Pⅶ, proteína terminal TP y proteína enzimática Pⅹ) y genes virales constituyen el núcleo del virus. El polipéptido Pⅶ es el núcleo principal. proteína, envolviendo el ADN genético viral como histonas. Hay alrededor de 7 tipos de cápsides virales en la proteína. El polipéptido p ⅱ es el componente principal más abundante en la cápside del virus y el hexón está compuesto por tres moléculas p ⅱ estrechamente conectadas. Los polipéptidos pⅵ y pⅷ forman un puente entre el hexón y el núcleo del virus y, junto con el polipéptido pⅸ, estabilizan la disposición reticular de la molécula del hexón. Cinco polipéptidos moleculares Pⅲ están conectados entre sí para formar la proteína básica de la pentona. Pⅲa es la proteína periférica de la pentona y también participa en la composición de la cápside. La pentona está conectada al núcleo viral a través de P ⅴ. El polipéptido PIV constituye principalmente fibrillas trímeras del virus y está relacionado con la actividad de hemaglutinación del virus.
Debido a la naturaleza específica del tipo de hemaglutininas (fibrillas), los aislados clínicos a menudo se clasifican mediante la prueba de inhibición de la hemaglutinación (HI).
¿Qué son los lentivirus, los adenovirus y los virus adenoasociados? ¿Cuáles son sus principales aplicaciones y características en la investigación científica?
Lentivirus:
① Puede integrarse de manera estable en el genoma del huésped y tiene sitios de integración aleatorios
② Puede infectar células mitóticas y no mitóticas
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③El fragmento de empaque máximo es de 8 kb y la potencia de concentración es de hasta 108-109TU/mL. Cuanto más grande es el fragmento, menor es la potencia.
④ Tet-on y otros sistemas de expresión inducibles se pueden utilizar para lograr altos niveles de expresión.
Adenovirus:
① no se puede integrar en el genoma del huésped y solo puede expresión transitoria
② Puede infectar células mitóticas y no mitóticas
③ El fragmento de empaquetamiento máximo es de 8 kb y el título de concentración es de hasta 1011-1012tu/ml; . Cuanto más grande es el fragmento, menor es la potencia.
④Alto nivel de expresión;
Virus adenoasociado:
①Puede integrarse de forma estable en el genoma del huésped y puede integrarse en presencia de productos genéticos específicos. A un sitio específico en el cromosoma humano 19;
② Puede infectar células mitóticas y no mitóticas
③ El fragmento de empaquetamiento máximo es de 8 kb y el título de concentración es de hasta 1011; -1013tu/ml. Cuanto más grande es el fragmento, menor es la potencia.
④ Se pueden utilizar Tet-on y otros sistemas de expresión inducibles para conseguir altos niveles de expresión.
¿Qué enfermedades suelen provocar los adenovirus en los humanos?
El adenovirus, por supuesto, se dirige a las glándulas humanas.
La más simple es la triquinelosis, comúnmente conocida como boca grande, lo que significa que la cara se hincha y se ve así. Este es el tipo más común y es causado por un adenovirus.
¿Qué es el adenovirus?
Desde el descubrimiento y aislamiento exitoso de los adenovirus en la década de 1950, se han descubierto más de 100 serotipos, 49 de los cuales son adenovirus humanos, divididos en seis categorías: A, B, C, D, E y F. Un subgrupo de adenovirus humanos tipos 2 y 5 comúnmente utilizados en terapia génica pertenecen al subgrupo C en la clasificación serológica y tienen un 95% de homología en las secuencias de ADN. Su capacidad proliferativa es muy fuerte, con títulos que normalmente alcanzan 109 ufp (unidades formadoras de placa)/ml, y el número de copias de su genoma en una sola célula puede llegar a 104 (que representa aproximadamente el 10 % del ADN total de la célula). Las partículas de virus son relativamente estables y pueden alcanzar 1010 ~ 1011 ufp/ml mediante centrifugación en gradiente de CsCl, que cumple con los requisitos de los experimentos con animales.