¡La primera vez que dono sangre, la sangre está calificada! La segunda vez, obtuve un falso positivo de VIH. ¿Por qué sucede esto? ¿Afectará esto a futuras donaciones de sangre?
Los resultados falsos positivos en las pruebas anti-VIH son habituales en las enfermedades reumáticas, pero menos habituales en la tuberculosis torácica. El paciente no tenía síntomas ni signos de infección por VIH y sólo fue descubierto durante el examen preoperatorio o el cribado previo a la transfusión. El autor encontró un ejemplo en el trabajo y ahora lo informa de la siguiente manera.
1 Resumen de Historia Clínica
El paciente es un varón de 14 años que ha sufrido dolor lumbar recurrente y pérdida de peso durante más de un año, y deformidad de la columna posterior durante más de un mes. El paciente estaba previamente sano y no tenía antecedentes de metalurgia, cirugía o transfusiones de sangre. La película CR de la columna torácica muestra que la octava vértebra torácica está en ángulo, el cuerpo vertebral T8 está obviamente aplanado y el tejido blando allí está hinchado. ¿Se considera que los cuerpos vertebrales torácicos T8 restantes se han convertido en tuberculosis T8? ¿Granuloma eosinofílico vertebral? VSG 35mm/1h, TB-Ab positivo. Punta de Ultrasonido Doppler Color: Masa hipoecoica subcutánea en cuello izquierdo. Después de 4 semanas de tratamiento antituberculoso, se planificó someterse a "resección de la lesión vertebral anterior T8 + injerto y fusión de hueso intervertebral + fijación con placa". El examen preoperatorio en nuestro hospital reveló que el paciente era VIH positivo y fue enviado a hospital. al hospital del condado para su revisión. Se le dijo al paciente que regresara a casa para recuperarse y esperar los resultados. Un mes después, el resultado de la nueva prueba del Centro Provincial para el Control y la Prevención de Enfermedades fue VIH negativo. Se recomendó nuevamente al paciente que se sometiera a resección de la lesión + fusión de implantes intervertebrales + fijación con placa. Después de la cirugía, la paciente se recuperó bien y sus síntomas mejoraron significativamente.
Resultados quirúrgicos: Las vértebras torácicas T8 presentaban necrosis tipo "tofu", el cuerpo vertebral estaba comprimido en forma de cuña, los bordes inferiores de los cuerpos vertebrales T7 y T8, y los bordes superiores de la T9. los cuerpos vertebrales eran osteoporóticos y los discos intervertebrales estaban degenerados.
2 Discusión
En septiembre de 1982, los Centros para el Control de Enfermedades (CDC) de Estados Unidos propusieron formalmente el concepto de síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). Investigaciones posteriores demostraron que se trataba de una nueva enfermedad infecciosa. enfermedades. En 1983, Montagnier et al. del Instituto Pasteur de Francia investigaron por primera vez un caso de SIDA. En 1983, Montagnier et al. aislaron por primera vez un virus, llamado virus asociado a linfadenopatía (LAV), de los ganglios linfáticos de un paciente con linfoma; a principios de 1984, Gallo et al. A principios de 1984, Gallo et al. aislaron un virus denominado virus linfotrópico de células T humanas tipo III (HTLV-III) a partir de células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de pacientes con SIDA. Ese mismo año, Levy et al. de la Universidad de California también aislaron un virus llamado virus relacionado con el SIDA (ARV) de linfocitos de sangre periférica de pacientes con SIDA. En 1986, el Comité Internacional de Taxonomía de Virus (ICTV) clasificó al LAV/HTPV como el virus más común en el mundo. En 1986, el Comité Internacional sobre Taxonomía de Virus (ICTV) nombró al LAV/HTLV-III/ARV como virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), también conocido como virus del SIDA.
La enfermedad causada por la infección por VIH se llama SIDA, el nombre completo es síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). La función inmune del paciente se pierde parcial o completamente, el número de células CD4+ se reduce y aparecen infecciones oportunistas secundarias. se producen, tumores, etc., con diversas manifestaciones clínicas. La enfermedad se propaga rápidamente, tiene una alta tasa de mortalidad y actualmente no tiene cura.
El VIH pertenece al género Lentivirus de la familia Retroviridae. Actualmente se han descubierto dos tipos de VIH, a saber, el VIH-1 y el VIH-2. Sus estructuras virales y vías de transmisión son similares. El VIH-2 se encuentra principalmente en África occidental, pero también se ha detectado en algunas personas infectadas en Europa y América. El VIH-2 es menos virulento y menos transmisible que el VIH-1, lo que da como resultado un curso más lento y leve del SIDA. El VIH-1 está ampliamente distribuido en todo el mundo y es el agente causante de la epidemia mundial de SIDA. El foco actual de la investigación sobre el SIDA es el VIH-1.
La epidemia de SIDA se distribuye por todo el mundo. África es el lugar de nacimiento y la zona más afectada del SIDA, Europa y América son las principales áreas epidémicas del SIDA, y la epidemia de SIDA en Asia se ha extendido. ha mostrado una tendencia de rápido crecimiento en los últimos años. Desde que se descubrió la primera infección por VIH en mi país en 1985, entre 600.000 y 800.000 personas han resultado infectadas. Los expertos estiman que si no se toman rápidamente medidas preventivas eficaces, a la actual tasa de crecimiento anual promedio del 30%, para 2010, mi país lo habrá hecho. El número de personas infectadas por el VIH superará los 10 millones. En algunos países africanos, la tasa de infección por VIH alcanza a más del 30% de la población total. Por lo tanto, la prevención y el tratamiento del SIDA no es sólo una cuestión de salvar vidas individuales, sino también una cuestión de supervivencia nacional [1~6].
2.1 Especificidad de la prueba del VIH La prueba del VIH es diferente de la prueba de otros microorganismos patógenos. Los requisitos son muy estrictos. Cualquier error de diagnóstico, incluidos falsos positivos o falsos negativos, tendrá consecuencias muy importantes para los sujetos. influencia. Por lo tanto, las pruebas de VIH deben realizarse en estricta conformidad con las "Medidas administrativas para las pruebas de VIH" y las "Especificaciones técnicas para las pruebas de VIH" (en adelante, las "Especificaciones") formuladas por los laboratorios de pruebas deben ser aprobadas por el estado. departamento administrativo de salud local y están involucrados en pruebas de VIH. Los técnicos deben recibir capacitación técnica especializada y tener certificados para trabajar. Los reactivos de diagnóstico deben usar reactivos con alta sensibilidad y fuerte especificidad. Las reacciones positivas detectadas mediante detección requieren reactivos específicos. Las reacciones positivas deben confirmarse mediante métodos más específicos (como las pruebas de transferencia Western) y debe existir un estricto sistema de garantía de calidad durante todo el proceso experimental.
2.2 Detección de anticuerpos contra el VIH Hay muchos métodos utilizados para la detección de anticuerpos contra el VIH en países extranjeros. Según diferentes principios de detección, se dividen en ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas, método de aglutinación y método de cromatografía, que se pueden utilizar. para sangre, saliva y orina. Análisis de rutina o rápidos de muestras. En la práctica se utilizan habitualmente el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), la prueba de aglutinación en gelatina y diversos reactivos de diagnóstico rápido. Desde la llegada de la primera generación de reactivos ELISA en 1985, con el rápido desarrollo de la tecnología médica, los antígenos encapsulados se han desarrollado desde una generación de lisados de virus completos hasta las tres generaciones actuales de antígenos recombinantes de doble propósito y marcadores de encapsulación de antígenos peptídicos con buena sensibilidad y especificidad El reactivo sándwich de antígeno detecta subtipos que incluyen VIH-1, VIH-2 y VIH-1 subtipo 0, y el período de ventana se acorta de 10 semanas a 3 a 4 semanas. Para evitar la transmisión durante el período ventana, los Países Bajos, Francia y otros países han desarrollado kits sándwich de doble antígeno de cuarta generación recubiertos con antígenos peptídicos recombinantes y anticuerpos anti-P24, que pueden detectar antígenos y anticuerpos al mismo tiempo. El período de ventana se acorta de 2 a 3 semanas, pero su valor clínico aún no se ha evaluado. De acuerdo con los requisitos de los "Estándares", las instituciones de recolección y suministro de sangre de mi país deben utilizar el método ELISA para el análisis de sangre. Todas las instituciones médicas y de salud deben utilizar el método ELISA para las pruebas de detección de rutina. Las pruebas de anticuerpos no pueden establecerse en áreas remotas antes de una cirugía de emergencia en hospitales grandes con pruebas de laboratorio, técnicos capacitados pueden realizar pruebas de sangre utilizando reactivos rápidos en lugares designados. Utilice reactivos ELISA o reactivos de diagnóstico rápido para la detección. Si la reacción es negativa, el anticuerpo contra el VIH se informa como negativo para las muestras con reacciones positivas, el laboratorio de detección debe repetir el reactivo original y otro reactivo con un principio diferente o una prueba de fabricante diferente. , si ambos reactivos son negativos, el anticuerpo contra el VIH se informa como negativo, si ambos reactivos son positivos, o uno es negativo y el otro es positivo, debe enviarse al laboratorio de confirmación del SIDA para su confirmación. Si ambos reactivos son negativos, la prueba se informa como VIH negativa. Los reactivos de detección deben ser reactivos mixtos de VIH-1/2, registrados y aprobados por la Administración Estatal de Medicamentos (SDA), aprobados para pruebas por lotes, evaluación de calidad clínica y dentro del período de validez.
Debido a la posibilidad de falsos positivos, las muestras que resulten positivas para anticuerpos contra el VIH deben someterse a pruebas de confirmación. Existen tres métodos de detección confirmatoria en el mundo, incluida la transferencia Western, el inmunoensayo en tira y la inmunofluorescencia, de los cuales el más utilizado es la transferencia Western. Los reactivos de confirmación deben estar registrados y aprobados por la SDA. Los reactivos de inmunotransferencia incluyen tipos VIH-1/2 mixtos y únicos. De acuerdo con los requisitos del "Código", generalmente se utilizan primero los reactivos mixtos de VIH-1/2 y los resultados de la prueba de inmunotransferencia se determinan de acuerdo con los principios básicos del "Código" y las instrucciones de los reactivos utilizados. Los resultados de las pruebas se basan en los principios básicos del "Código" y determinan las instrucciones para los reactivos utilizados.
Si no hay una banda específica de anticuerpos contra el VIH, se informa como anticuerpos negativos contra el VIH; si hay una banda específica de anticuerpos contra el VIH que cumple con los criterios de anticuerpos contra el VIH-1, se informa como positiva para anticuerpos contra el VIH-1. Si hay bandas específicas del VIH-2, se debe realizar una prueba de confirmación de anticuerpos contra el VIH-2 utilizando reactivos de inmunotransferencia del VIH-2. Una reacción negativa se informará como VIH-2 negativo; una reacción positiva se informará como seropositividad para VIH-2 y se debe realizar una secuenciación de ácidos nucleicos para su identificación. Si hay bandas específicas de anticuerpos contra el VIH, pero el tipo de banda no es suficiente para determinar la positividad, se considera que la persona tiene anticuerpos contra el VIH indeterminados. Las personas con anticuerpos contra el VIH inciertos deben ser sometidas a un seguimiento de acuerdo con los requisitos de los "Estándares", si es necesario se pueden realizar pruebas del antígeno VIH-1P24 o del ácido nucleico, pero los resultados sólo pueden utilizarse como base de diagnóstico auxiliar y confirmarse. El informe debe basarse en los resultados del seguimiento serológico.
Dado que la sensibilidad de los reactivos de prueba de saliva y la especificidad de los reactivos de prueba de orina son significativamente menores que los reactivos de prueba de sangre, los reactivos de detección y confirmación de anticuerpos contra el VIH aprobados por el registro SDA en mi país solo se pueden usar para la detección de muestras de sangre. [7, 8].
2.3 Control de calidad de la detección de anticuerpos contra el VIH Todos los experimentos deben incluir suero de control interno y suero de control externo.
El suero de control de calidad de control interno se refiere al suero de control positivo y negativo proporcionado en el kit. Los controles internos son la base del control de calidad y deben usarse para cada prueba y solo pueden usarse para kits del mismo lote.
El suero de control de calidad de control externo es un control positivo débil establecido por el laboratorio, que generalmente es de 2 a 3 veces el umbral del kit (Cutoff). El suero puede adquirirse en unidades profesionales o prepararse en el laboratorio. El método de preparación es: recolectar suero positivo y negativo para anticuerpos contra el VIH, inactivarlo a 56 °C durante 30 minutos y centrifugar a 3000 rpm durante 15 minutos. El control positivo débil se puede obtener mediante dilución en gradiente de suero positivo fuerte para anticuerpos contra VIH y negativo para anticuerpos contra VIH. suero humano sano, o se puede combinar con el kit. Los sueros de control positivo y negativo proporcionados se mezclan y calibran, y generalmente se preparan según un año de uso. Se filtran con un filtro de 0,2 μm para eliminar la contaminación y se preparan de acuerdo con. un año de uso. Después de filtrar y esterilizar el suero con un filtro de 0,2 μm, se envasa, clasifica, etiqueta y sella según la dosis experimental durante una semana y se congela a -20°C. El suero no debe congelarse ni descongelarse repetidamente. Después de descongelarlo, debe almacenarse entre 2 ℃ y 8 ℃ y usarse dentro de 1 semana. En principio, se debe utilizar suero de control de calidad externo en cada experimento para monitorear la reproducibilidad y estabilidad del experimento, al mismo tiempo que se comprenden las diferencias entre lotes entre cada lote de kits y se elaboran gráficos de control de calidad [9-12].