¿Existe algún libro como "Ingeniería de separación biológica" editado por Sun Yan con respuestas o análisis de los ejercicios extraescolares?

P8 Preguntas: 1, 5, 6

1. Ingeniería de separación biológica: se refiere a la separación y purificación a partir de caldo de fermentación, solución de reacción enzimática o cultivo de células animales y vegetales. Procesos de productos biológicos fluidos. P1

2. ¿En cuántas partes se puede dividir el proceso general de separación y purificación biológica? ¿Qué operaciones unitarias están incluidas? I. Pretratamiento del caldo de fermentación (separación sólido-líquido): operaciones unitarias: filtración y centrifugación;

II. Extracción del producto (purificación primaria): operaciones unitarias: precipitación, adsorción, extracción, ultrafiltración;

p>

III. Refinamiento del producto (alta purificación): operaciones unitarias: cromatografía (incluidas cromatografía en columna y cromatografía en capa fina), intercambio iónico, cromatografía de afinidad, cromatografía de adsorción y electrocromatografía;

4. Procesamiento de productos terminados: operaciones unitarias: concentración, cristalización, secado;

3. ¿Cuáles son las características de la ingeniería de separación biológica? P6

Respuesta: ① El sistema líquido de materia prima es muy complejo, tiene un alto contenido de impurezas y es difícil de separar ② La materia prima es generalmente una solución acuosa con una baja concentración de producto; generalmente tiene poca resistencia a los cambios ambientales y es volátil. Poca capacidad para resistir los cambios ambientales y la inactivación volátil; ④ La actividad biológica de la sustancia objetivo debe mantenerse durante el proceso de separación; ⑤ La pureza del producto crudo separado es baja y los requisitos de pureza del producto terminado son extremadamente altos. la calidad de los productos biológicos estrechamente relacionados con la vida humana debe cumplir con los estándares nacionales pertinentes. A menudo no existen métodos operativos fijos a seguir; ⑦ Hay muchos pasos de operación de separación y es difícil obtener altos rendimientos; ⑧ Para los productos de ingeniería genética, es difícil generalmente se requiere operar en un ambiente cerrado. Para los productos de ingeniería genética, generalmente se requiere operar en un ambiente cerrado. ⑨ Proceso de separación y purificación El costo es alto y la tasa de recuperación del producto es baja;

Capítulo 2 Pretratamiento del caldo de fermentación

1. Método de pretratamiento del caldo de fermentación: P11

Según la finalidad del pretratamiento, se divide en: mejorar la velocidad de filtración Métodos, métodos para cambiar las propiedades del caldo de fermentación y métodos para eliminar impurezas

Los métodos específicos incluyen: aglomeración y floculación, calentamiento, ajuste de pH, dilución con agua, auxiliares de filtración, sal y método adsorbente. Método adsorbente o método de adición de sal, método de eliminación de iones inorgánicos de alto precio, método de eliminación de proteínas de impurezas solubles, pigmentos y otros métodos de eliminación de impurezas.

2. Coagulación: se refiere a la adición de sustancias químicas (como coagulante hidrolizado, sal de aluminio, sal de hierro o cal, etc.) para desestabilizar los coloides en el caldo de fermentación y hacer que las partículas interactúen. entre sí. El proceso de coagulación en flóculos de 1 mm de tamaño. p11

3. Floculación: se refiere a la capacidad de ciertos floculantes poliméricos para crear un efecto puente entre las partículas suspendidas, haciendo que las partículas coloidales formen flóculos gruesos. P12

4. Reactivos de materiales comúnmente utilizados en métodos específicos: P14～15

Método de ajuste del PH: generalmente usa ácidos orgánicos como el ácido oxálico o ciertos ácidos y bases inorgánicos;

Método de eliminación de iones inorgánicos de alto precio:

①. Eliminación de Ca2+: el agente acidificante comúnmente utilizado es el ácido oxálico;

② Eliminación de Mg2+: se agrega fosfato. se utiliza para generar el método de precipitación de fosfato de magnesio Mg+;

③, eliminación de Fe3+: adopte el método de agregar sal de sangre amarilla para generar precipitación de azul de Prusia.

5. Factores que afectan a la filtración del caldo de fermentación: P17

1. Bacterias: determinar el tamaño y forma de diversas partículas suspendidas en el caldo de fermentación;

II. Viscosidad del caldo de fermentación: generalmente, cuanto mayor es la viscosidad del caldo de fermentación, más lenta es la velocidad de separación;

Factores que influyen:

①Viscosidad del caldo de fermentación;

②Viscosidad del caldo de fermentación

③Viscosidad del caldo de fermentación: filtración de flujo cruzado: filtración en la que la dirección del flujo del material líquido es paralela al medio filtrante. El medio filtrante comúnmente utilizado es una membrana microporosa o una membrana de ultrafiltración, que es principalmente adecuada. para caldo de fermentación bacteriana y otras partículas suspendidas. Filtración de caldo de fermentación fino. P18

7. Equipo de filtración para caldo de fermentación:

Según la fuerza impulsora de la filtración, se puede dividir en filtro de gravedad, filtro de presión, filtro de vacío y filtro centrífugo. . Filtro centrífugo.

P23

Capítulo 3 Tecnología de separación celular

1. Método de disrupción celular: P34 Según los diferentes mecanismos de disrupción, se puede dividir en:

(1) Mecánico Trituración: molino de perlas, homogeneización a alta presión, trituración ultrasónica y otras trituraciones mecánicas;

(2) Trituración física: congelación-descongelación, vitrificación a baja temperatura;

(3) Química Trituración: Hielo-descongelación, vitrificación a baja temperatura;

(4) Fragmentación química. p>

(3) Método de penetración química: método ácido-base, método de sal, método de tratamiento con surfactante, método de solvente orgánico, método desnaturalizante, método de tratamiento con penetrante químico suave;

(4 ) Hidrólisis enzimática: degradar la pared celular.

2. El papel del desnaturalizante: agregar desnaturalizante (como clorhidrato de guanidina y urea) puede debilitar el efecto de los enlaces de hidrógeno, debilitar la interacción entre los productos intracelulares y facilitar su liberación. P38

3.Cuerpos de inclusión: son partículas densas formadas por agregación de proteínas (la densidad puede alcanzar 1,3 mg/ml), que se pueden observar al microscopio óptico, el diámetro puede alcanzar el nivel de μm y son amorfos o amorfos. cristalino.

4. Replegamiento de proteínas: también conocido como replegamiento, significa que las proteínas desnaturalizadas se transformarán espontáneamente de un estado desnaturalizado térmicamente inestable a un estado térmicamente estable después de que se elimine el desnaturalizante o se reduzca la concentración, formando una proteína biológicamente estable. Proteína activa. Estructura natural funcional.

Métodos de replegamiento: ① método de replegamiento por diálisis por dilución; ② método de replegamiento por extracción cromatográfica de micelas inversas.

Capítulo 4 Tecnología de precipitación

1. Método de precipitación: también conocido como método de precipitación, se agrega un precipitante a la solución para reducir la solubilidad del soluto, lo que hace que precipiten sólidos amorfos. la solución.P48

2. Método de precipitación de proteínas: P51

Método de precipitación de sal, método de precipitación de solvente orgánico, método de precipitación de punto isoeléctrico, método de precipitación de polimerización no iónica y generación de sal. método complejo, método de precipitación por desnaturalización selectiva, método de precipitación por afinidad y método de precipitación de polímero SIS más afinidad.

3. Saltación: La solubilidad de las proteínas en soluciones de alta fuerza iónica se reduce, por lo que precipitan de la solución.

4. Principio de sal: después de agregar una gran cantidad de sal neutra a la solución de proteína, los grupos hidrófilos de las moléculas de proteína se destruyen para formar una capa de hidratación con moléculas de agua, que elimina el agua. moléculas, destruye la película de agua y expone La región hidrofóbica simultáneamente neutraliza la carga, haciendo que las partículas pierdan la repulsión mutua. Al mismo tiempo, las cargas se neutralizan, lo que hace que las partículas pierdan la repulsión mutua y el movimiento browniano se intensifica, lo que hace que las moléculas de proteínas se combinen entre sí para formar agregados y precipitar. Factores que afectan la salinidad: P52

1) Especies de proteínas; 2) Especies de iones 3) Temperatura y pH 4) Cantidad de sal 5) Concentración de proteínas;

6. Métodos de tratamiento de desalación: diálisis, ultrafiltración y filtración en gel.

7. Principio de precipitación con disolventes orgánicos: P56

La visión tradicional es que añadir disolventes orgánicos como acetona o etanol a la solución proteica reducirá la actividad del agua y el grado de hidratación. en la superficie de las moléculas de proteína, es decir, destruyendo además la capa de hidratación en la superficie de la proteína; La constante dieléctrica de la solución disminuye y la atracción electrostática entre las moléculas de proteínas aumenta, lo que provoca agregación y precipitación.

El segundo nuevo punto de vista: los disolventes orgánicos pueden destruir algunos enlaces de la proteína y cambiar su estructura espacial hasta cierto punto, provocando que algunos grupos hidrofóbicos originalmente envueltos en el interior queden expuestos en la superficie e interactúen con la Proteína orgánica. Los grupos hidrofóbicos en el solvente forman una capa hidrofóbica, precipitando así la proteína. Cuando la estructura espacial de la proteína se deforma más allá de cierto nivel, se producirá una desnaturalización completa.

Capítulo 5 Tecnología de Extracción

1. Extracción: Se aprovecha las diferentes solubilidades de los solutos en solventes inmiscibles para utilizar un solvente para extraer el soluto y otro solvente para formar una solución ( materia prima). P64

2. Ley de distribución: A temperatura y presión constantes, un soluto se distribuye en dos fases inmiscibles. Después de alcanzar el equilibrio de distribución, si su masa molecular relativa en las dos fases es igual, entonces su masa molecular relativa. La masa en las dos fases será igual. La relación de concentraciones de equilibrio en la fase es una constante, que se llama constante de distribución A, A=c1/c2 P64

3. Cuando se utiliza la constante de distribución, se debe prestar atención al cumplimiento de tres condiciones: P65

① Debe ser una solución diluida ② El soluto no tiene ningún efecto sobre la solubilidad mutua del disolvente ③ Los solutos en las dos fases deben ser del mismo; mismo subtipo y no se produce disociación de pareja.

4. El proceso básico de extracción líquido-líquido industrial incluye varios pasos: P67

① Mezclado: El proceso de mezclar completamente el líquido de alimentación y el agente de extracción para formar una emulsión, equipo: Mezclador;

②Separación: El proceso de separar la emulsión para formar la fase de extracción y la fase de residuo de extracción, equipo: separador: separador

③Recuperación de solvente: de la extracción; proceso de recuperación de solvente de fase o fase de refinado, equipo: extractor

③Proceso de agente de extracción, equipo: recuperador.

5. Según el proceso operativo, la extracción líquido-líquido se puede dividir en: P67

① Extracción de una sola etapa ② Extracción de múltiples etapas: flujo cruzado de múltiples etapas; Extracción y extracción a contracorriente multietapa.

6. Factores que afectan la extracción con disolventes orgánicos: P73

1. Condiciones de la fase acuosa: Los principales factores que afectan la operación de extracción son: PH, temperatura, sales inorgánicas, etc.

①PH②Temperatura ③Salación ④Disolvente

2. Selección de disolventes orgánicos

3. Fenómeno de emulsificación: la emulsificación es la dispersión de un líquido en otro fenómeno en líquidos sin mezclar. P75

7. Hay dos tipos de demulsificantes: ① Tensioactivo catiónico bromuro de pentadecilpiridina, adecuado para destruir emulsiones tipo W/O

② Tensioactivo aniónico El dodecilsulfonato de sodio es fácilmente soluble en agua; y ligeramente soluble en disolventes orgánicos. Es adecuado para destruir emulsiones W/O. P75

8. Insolubilidad del polímero: Si existe repulsión mutua entre dos moléculas de polímero. Si existe repulsión mutua entre las moléculas de polímero, es decir, una determinada molécula se reunirá alrededor del mismo tipo de moléculas en lugar de diferentes tipos de moléculas. Cuando se alcance el equilibrio, se puede dividir en dos fases y los dos polímeros forman una fase. . p80

9. Los sistemas de agua bifásicos ampliamente utilizados en ingeniería bioquímica incluyen: sistema de polietilenglicol-dextrano y sistema de polietilenglicol-sal inorgánica. P80

10. Composición de la fase de membrana del sistema de separación de membrana líquida: generalmente compuesta por disolvente de membrana, tensioactivo, portador de flujo y potenciador de membrana. P87

11. Clasificación de película líquida: se puede dividir en tres tipos según su estructura P87

① película emulsionada; ② película líquida soportada; p>12. Mecanismo de extracción de membrana líquida: Según los diferentes tipos de solutos a separar, se puede dividir en los siguientes tipos. P89

1. Migración simple:

2. Migración promovida:

3. Migración de operador:

13. Principios: solubilidad, complejación, estabilidad. P92

14. Hinchazón: se refiere al agua en la fase externa que ingresa a la película líquida en la fase interna a través de la membrana, aumentando así el volumen de la película líquida. p94

15. Micelas inversas: Si el tensioactivo se disuelve en un disolvente orgánico no polar y su concentración supera la concentración micelar crítica, se formarán agregados en el disolvente orgánico. Dichos agregados se denominan micelas inversas. p99

16. Ventajas de los tensioactivos: ① solubilidad; ② propiedad complejante; ③ estabilidad. 16. Ventajas del anticoagulante: P99

(1) El "núcleo de agua" polar tiene una gran solubilidad;

(2) Debido a la fuerte polaridad de las macromoléculas biológicas, puede ser disuelto en un núcleo de agua polar para evitar el contacto con solventes orgánicos externos y reducir la desnaturalización;

(3) Debido al "núcleo de agua", se puede disolver en un núcleo de agua polar para evitar el contacto con solventes orgánicos externos, reducir la desnaturalización;

(3) Debido al efecto de escala del "núcleo de agua", se puede estabilizar la estructura tridimensional de la proteína, se puede aumentar su rigidez estructural y se puede mejorar el rendimiento de la reacción. .

17. El poder de extracción de proteínas mediante micelas inversas: el proceso de extracción es el resultado del efecto sinérgico de la fuerza electrostática, la fuerza hidrofóbica, la fuerza estérica, la afinidad o varias fuerzas, entre las que se encuentra la interacción electrostática entre proteínas. y la cabeza de surfactante es la principal fuerza impulsora.

P100

18. El proceso de extracción líquido-sólido: incluyendo humectación, solubilización, difusión y reposición, entre los que se encuentra la lixiviación en reposición P103

19. /p>

(1) Cerca del punto crítico, las líneas de densidad se juntan alrededor del punto crítico, y pequeños cambios en la presión o la temperatura causarán grandes cambios en la densidad del fluido;

(2 ) Fluido supercrítico La densidad y la solubilidad del fluido son cercanas a las del líquido, y la viscosidad y el coeficiente de difusión son cercanos a los del gas. Las propiedades físicas y químicas del fluido cerca del punto crítico son extremadamente sensibles a los cambios de temperatura y presión. del fluido se puede ajustar mediante presión siempre que la composición química no cambie;

3) En fluidos cerca del punto crítico, las propiedades físicas de todos los fluidos, como densidad, viscosidad, solubilidad y capacidad calorífica. , y la constante dieléctrica cambiará drásticamente.

20. Principio de extracción con fluido supercrítico: P107

Utiliza fluido supercrítico (SCF), es decir, la temperatura y presión son ligeramente superiores o cercanas a la temperatura crítica (Tc). ) y presión crítica (Pc), un fluido entre gas y líquido, se utiliza como agente de extracción para extraer ciertos componentes de alto punto de ebullición o sensibles al calor de sólidos o líquidos para lograr el propósito de separación y purificación.

21. Los procesos típicos para la extracción con fluidos supercríticos incluyen: método isotérmico, método isobárico y método de adsorción. p113

Capítulo 6 Proceso de separación por membrana

1. Proceso de separación por membrana: utiliza una membrana natural o sintética selectivamente permeable como medio de separación y la fuerza impulsora en ambos lados de la membrana. (Como diferencia de presión, diferencia de concentración, diferencia de potencial, diferencia de temperatura, etc.), se separa el líquido de la materia prima. P120

2. Funciones de las membranas: ① Identificación y transferencia de sustancias; ② Interfaz de fase; ③ Campo de reacción.

3. Polarización de la concentración: una mayor presión y concentración de sustancias, así como un lento flujo de la membrana, pueden hacer que la concentración de soluto en la superficie de la membrana sea mayor que la concentración del cuerpo principal, formando una capa límite de alta concentración. Al aumentar la presión osmótica en el lado de la sustancia de la membrana, la diferencia de presión efectiva disminuye. p127

4. Polarización en gel: se refiere al hecho de que durante el proceso de separación de la membrana, el soluto no puede penetrar completamente la membrana debido al efecto de interceptación de la membrana, y el soluto permanece cerca de la superficie de la membrana. En la membrana, la concentración de soluto cerca de la superficie de la membrana aumenta, lo que resulta en una disminución en la diferencia de presión efectiva en ambos lados de la membrana y una disminución en la permeabilidad de la membrana cuando la concentración cerca de la superficie de la membrana excede la solubilidad de. El soluto, el soluto precipita y se forma en la superficie de la membrana. Proceso de capa de gel.

5. Ultrafiltración y microfiltración: la diferencia de presión en ambos lados de la membrana se utiliza como fuerza impulsora y la membrana microporosa se utiliza como medio de filtración cuando la solución fluye a través de la superficie de la membrana. El principio de tamizado se utiliza principalmente para eliminar las partículas en la solución. Las partículas suspendidas o macromoléculas se interceptan y se permite que los solventes y las moléculas pequeñas pasen a través de la membrana, logrando así un proceso de separación de membrana de purificación, separación y concentración. p132

Membrana de microfiltración: Generalmente es una membrana homogénea, la resistencia de la membrana está determinada por el espesor total de la membrana. La resistencia está determinada por el espesor total de la membrana. En comparación con las membranas de ultrafiltración, las membranas de microfiltración tienen tamaños de poro más grandes y una distribución del tamaño de poro más uniforme. El tamaño de los poros de la membrana es de 0,05 a 10 µm y el objetivo son las partículas suspendidas, como las bacterias. , coloides y aerosoles; membranas de ultrafiltración: generalmente es una estructura asimétrica. La resistencia a la transferencia de masa de la membrana se encuentra principalmente en la capa epitelial. El espesor es solo inferior a 1 µm. La mayoría de los diámetros de los poros son de 0,005 a 0,05 µ. m El objetivo es interceptar solutos con una masa molecular relativa de 10?~10^6.

6. Factores que afectan la tasa de rechazo:

①Peso molecular del soluto

②Propiedades moleculares: moléculas esféricas>ramificadas>lineales;

②Para membranas cargadas y moléculas de membrana con cargas opuestas, la tasa de rechazo es baja. Si hay un soluto adsorbido en la membrana, la tasa de rechazo es alta;

3) La presencia de otras macromoléculas en el soluto. La tasa de rechazo aumenta;

4) Condiciones de operación: La presencia de otros polímeros aumenta la tasa de rechazo;.

④Condiciones de funcionamiento: cuando PH = PI, la tasa de retención de proteínas Ro es alta a medida que aumenta la temperatura, Ro disminuye;

7. Principios básicos de la electrodiálisis: P139

Nota: Lea el libro usted mismo y resúmalo con tablas

Capítulo 7 Adsorción e intercambio iónico

1. Adsorción: se refiere al fenómeno de transferencia de soluto de la fase líquida o gaseosa a la fase sólida. P154

2. Carbón activado: Es un adsorbente apolar, y su capacidad de adsorción en agua es mayor que la de los disolventes orgánicos.

Para diferentes tipos de sustancias, existen ciertas regularidades: ① La capacidad de adsorción de compuestos con grupos más polares es mayor que la capacidad de adsorción de compuestos con grupos menos polares ② La capacidad de adsorción de compuestos aromáticos es mayor que la capacidad de adsorción de compuestos alifáticos; ③La capacidad de adsorción de compuestos con masa molecular relativa grande es mayor que la capacidad de adsorción de compuestos con masa molecular relativa pequeña. P156

3. Adsorbente de red macroporosa: Es un polímero no iónico, es un polímero no iónico, es un adsorbente no polar. *Los polímeros adsorben diversos químicos orgánicos de soluciones con la ayuda de fuerzas de van der Waals. Tiene las ventajas de buena selectividad, fácil análisis, alta resistencia mecánica, larga vida útil, pequeña resistencia a los fluidos, fácil desorción de adsorbentes y rápida velocidad de adsorción. P157

4. La composición del intercambiador de iones: esqueleto de red (que tiene una estructura tridimensional), grupos activos e iones intercambiables (con carga opuesta al esqueleto de red). p158

5. Capacidad de intercambio Es el principal parámetro que caracteriza la capacidad de intercambio de los intercambiadores de iones. Se refiere al milímetro de iones monovalentes que pueden ser adsorbidos por unidad de masa de intercambiador de iones seco o por unidad de volumen de ion húmedo. intercambiador. Número de moles (mmol). Factores que afectan el tipo de cambio: P164

1) Tamaño de partícula: Reducir el tamaño de partícula es beneficioso para mejorar el tipo de cambio independientemente del control de difusión interno o del control de difusión externo. Es propicio para mejorar el tipo de cambio;

(2) Grado de reticulación: cuanto menor es el grado de reticulación, más fácil se expande la resina y más fácil es difundir dentro de la resina. Cuando se controla la difusión interna, se reduce el grado de reticulación de la resina. El enlace puede aumentar el tipo de cambio. La resina tiene un alto grado de reticulación, un tamaño de poro de resina pequeño, una gran resistencia al movimiento de iones y un tipo de intercambio lento;

(3) Temperatura: a medida que aumenta la temperatura de la solución, la velocidad de difusión se acelera y el tipo de cambio también se acelera;

(4) Valencia de los iones: cuanto mayor es la valencia de los iones, mayor es la fuerza de Coulomb entre los iones y el esqueleto de resina, y menor es la tasa de difusión;

(5) Tamaño de los iones: iones pequeños El tipo de intercambio es relativamente rápido;

(6) Velocidad de agitación: durante el control de la película líquida, aumentar la velocidad de agitación aumentará el tipo de cambio, pero si se aumenta hasta un cierto nivel y luego se continúa aumentando la velocidad, el efecto será relativamente pequeño;

(7) Concentración de la solución: cuando la concentración de la solución es 0,001 mol/L, la difusión externa es generalmente controlado. Cuando la concentración de la solución aumenta, el tipo de cambio también aumenta proporcionalmente. Cuando la concentración alcanza aproximadamente 0,01 mol/L, la concentración aumenta nuevamente y el tipo de cambio aumenta más lentamente. En este momento, la difusión interna y externa avanza al mismo tiempo. Cuando la concentración continúa aumentando, el tipo de cambio alcanza el límite y deja de aumentar. En este momento, se ha transformado en control de difusión interna.

7. Factores que afectan la selectividad del intercambio iónico: P165

(1) Radio del ion hidratado: cuanto menor es el radio, mayor es la afinidad; Valencia de iones: los iones de alta valencia son fáciles de adsorber;

(3) pH de la solución: afecta el grado de disociación entre los grupos de intercambio y los iones de intercambio, pero no afecta la capacidad de intercambio;

(4) Fuerza de los iones: cuanto más baja, mejor;

(4) Fuerza iónica: cuanto más baja, mejor. Cuanto mejor;

(5) Disolvente orgánico: no favorece la adsorción;

(6) Grado de reticulación, tasa de expansión, tamiz molecular: alto grado de reticulación, pequeña expansión velocidad, tamizado Mayor capacidad; pequeño grado de reticulación, gran velocidad de expansión y capacidad de adsorción reducida;

(7) Fuerza auxiliar entre la resina y las partículas: además de la fuerza electrostática, también existen fuerzas auxiliares como como fuerza los enlaces de hidrógeno y las fuerzas de van der Waals.

Capítulo 8 Tecnología de Separación Cromatográfica

1. Factor de retardo: también conocido como movilidad, se refiere a la cantidad de tiempo que un componente se mueve en la fase estacionaria bajo ciertas condiciones y dentro del mismo tiempo. La relación entre la distancia recorrida por la fase móvil y la distancia recorrida por la propia fase móvil se expresa comúnmente como Rf (Rf ≤ 1). p177

2. Cromatografía positiva: significa que la polaridad de la fase estacionaria es mayor que la polaridad de la fase móvil. En este proceso de cromatografía, las moléculas no polares o moléculas polares pequeñas son más polares que las moléculas polares. . Las moléculas se mueven más rápido y salen primero de la columna.

Cromatografía de fase reversa: La polaridad de la fase estacionaria es menor que la de la fase móvil. En este proceso de cromatografía, las moléculas con mayor polaridad se mueven más rápido que las moléculas con menor polaridad y salen de la columna cromatográfica. primero. Clasificación de la cromatografía: Según diferentes clasificaciones de los principios de separación P181

Se puede dividir en: cromatografía de adsorción, cromatografía de distribución, cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de filtración en gel, cromatografía de afinidad, etc.

4. Método de desarrollo del color: P189

(1) Método de desarrollo del color con vapor de yodo; (2) Método de desarrollo del color mediante pulverización;

5. Según los diferentes tipos de polisacáridos portadores, los intercambiadores de iones a base de polisacáridos se pueden dividir en: P197

①Celulosa de intercambio iónico; ②Dextrano de intercambio iónico;

6. Principio de la cromatografía de afinidad: P206

Un lado de un par de macromoléculas biológicas que pueden unirse y disociarse de forma reversible actúa como un ligando, y tiene un gran tamaño de poro y afinidad. El portador de fase sólida acuosa se acopla para formar un adsorbente de afinidad especial, y luego este adsorbente de afinidad se usa para llenar la columna cromatográfica. Durante la separación, las sustancias contenidas fluyen a través de la columna cromatográfica con la fase móvil. Cuando la mezcla fluye a través de la columna cromatográfica con la fase móvil, los ligandos del adsorbente de afinidad adsorben selectivamente las sustancias que pueden unirse a él, mientras que otras proteínas e impurezas no se adsorben y salen de la columna cromatográfica con los tampones adecuados. Las sustancias y ligandos separados se pueden obtener mediante desorción líquida para obtener productos purificados. Ligando de afinidad por deshidrogenasas y quinasas. Activación: los grupos químicos del portador están inactivos y no pueden acoplarse directamente con los ligandos. Los grupos químicos del medio se activan mediante reacciones químicas. Métodos de elución: 1) Elución específica; 2) Elución no específica. P219

Capítulo 9 Tecnología de centrifugación

1. Tipos de rotores de centrífuga: rotor horizontal de tipo lanzamiento, rotor angular, rotor vertical (rotor de zonificación, rotor de elución celular, rotor de análisis)esperar . P237

2. Cálculo:

① Fórmula de cálculo de la velocidad de asentamiento por gravedad Vg de partículas suspendidas en el campo gravitatorio: P233 9-4

② Ejemplo 9- 1

③ Fórmula de cálculo del caudal de alimentación Q: P244 9-19

④ Ejemplo 9-3

⑤ Nota: ω=2πn/60

Capítulo 10 Concentración, Cristalización y Secado

1. Concentración por evaporación: Es una operación que utiliza calor para vaporizar y eliminar parte del solvente (generalmente agua) de la solución para obtener una mayor proceso de concentración de solutos. P267

2. Cristalización: Es un proceso en el que los solutos en una solución se combinan para formar cristales debido a la disposición regular de las moléculas bajo ciertas condiciones. Es un método de purificación de solutos para obtener partículas sólidas.

3. Pasos generales de la cristalización:

① Formación de solución sobresaturada; ② Generación de núcleos cristalinos;

4. Nucleación secundaria: Siempre se ha considerado como la principal fuente de núcleos cristalinos. Los dos mecanismos decisivos son: la nucleación por esfuerzo de corte líquido y la nucleación por contacto.

5. Secado por aspersión: utiliza un atomizador para rociar el material líquido (solución, suspensión, lodo, etc. que contiene más del 50 % de agua) en gotas de niebla. ) se rocía en gotas de niebla y se dispersa en el flujo de aire caliente, lo que hace que el agua se evapore rápidamente y se convierta en polvo granular seco P302

6. Liofilización: también conocido como secado por sublimación, se refiere a la congelación rápida de el material a secar. Un método de secado que sublima el hielo en vapor de agua y lo elimina en condiciones de alto vacío. Dado que la sublimación del hielo elimina calor, todo el proceso de liofilización permanece en un estado de congelación a baja temperatura, lo que resulta beneficioso para conservar la actividad de determinadas muestras biológicas (como las proteínas).