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- ¿Cuáles son las aplicaciones del cultivo primario en la investigación de las ciencias biológicas? ¿Cuáles son sus ventajas? El cultivo primario, también conocido como cultivo primario, es el primer cultivo después de que se obtienen las células del tejido del donante. Su característica es que las células o tejidos acaban de salir del cuerpo y sus características biológicas no han cambiado significativamente. Hasta cierto punto, reflejan su estado en el cuerpo y muestran las características de los tejidos o células originales. El cultivo primario es una buena técnica experimental para la investigación de fármacos experimentales. Debido a que los tejidos cultivados primarios contienen una variedad de componentes celulares, incluso si se cultivan células del mismo tipo, existen grandes diferencias entre las células. Si el donante es diferente, las diferencias individuales pueden reflejarse en las células incluso si el tipo y la ubicación del tejido son los mismos. Por lo tanto, algunas propiedades biológicas de las células cultivadas primarias no son lo suficientemente estables y es necesario pasar las células durante un corto período de tiempo antes de poder realizar estudios experimentales comparativos rigurosos. En los últimos años, la tecnología de cultivo primario se ha utilizado ampliamente en la investigación de la medicina tradicional china, especialmente en la investigación de la medicina tradicional china. 1 Tecnología de cultivo primario 1.1 Método de cultivo en bloque de tejido, que consiste en cortar el tejido en trozos pequeños e inocularlo en una botella de cultivo. Es simple y fácil de implementar y tiene una alta tasa de éxito. Sin embargo, debido a que los procesos repetidos de corte y siembra pueden dañar fácilmente las piezas de tejido, no todas las piezas pequeñas pueden desarrollar células. Este método es adecuado para el cultivo primario de pequeñas cantidades de células, como el cultivo de células de pulpa dental. 1.2 El método de cultivo por digestión utiliza preparaciones enzimáticas (la más comúnmente utilizada es la tripsina) para tratar bloques de tejido para eliminar sustancias intercelulares y separar las células entre sí para formar una suspensión de células individuales, a menudo formando un modo de crecimiento celular en monocapa. La ventaja de este método es que una sola capa de células absorbe nutrientes y excreta metabolitos más fácilmente y, por tanto, crece más rápido. Sin embargo, una operación descuidada puede causar fácilmente contaminación y el proceso de digestión debe ser correcto, de lo contrario causará ciertos daños a las células. Con la mejora de la tecnología experimental, este método se ha utilizado ampliamente en la investigación [1]. 2 Aplicación de la tecnología de cultivo primario en la investigación de la medicina tradicional china A juzgar por los informes bibliográficos de la última década, la tecnología de cultivo primario de células somáticas, células sanguíneas y células tumorales está relativamente madura y se ha utilizado en la investigación de la medicina tradicional china, especialmente las células hepáticas y nerviosas. células El cultivo primario es el más utilizado. 2.1 Para la investigación farmacológica de la medicina tradicional china. La investigación farmacológica de la medicina tradicional china es actualmente el campo más utilizado de la tecnología de cultivo primario. Se denomina investigación sobre los efectos biológicos de la medicina tradicional china y se utiliza para comprender los efectos farmacológicos y toxicológicos celulares de la medicina tradicional china. En comparación con los experimentos in vivo en general, los experimentos in vitro tienen las ventajas de ser simples, rápidos, fáciles de controlar y tener objetivos y vínculos farmacológicos claros. 2.1.1 Para investigación farmacodinámica. Es un medio importante para utilizar la tecnología de cultivo primario para estudiar los efectos y mecanismos de los ingredientes activos de la medicina tradicional china y las fórmulas compuestas. Zhu Lingqun et al. [2] encontraron que la hipoxia y la privación de glucosa de neuronas primarias del hipocampo de rata cultivadas durante 5 horas, seguidas de oxigenación, pueden inducir apoptosis neuronal y necrosis celular, y aumentar significativamente la concentración de Ca2+ intracelular y la liberación de lactato deshidrogenasa. aumenta con la prolongación del tiempo de reoxigenación; las saponinas totales de Panax notoginseng pueden reducir el porcentaje de apoptosis y necrosis de las células nerviosas, reducir la concentración de Ca2+ intracelular y reducir la liberación de lactato deshidrogenasa, y su efecto aumenta con el aumento de la dosis. Shih et al. [3] descubrieron que la ligustrazina, un extracto de Ligusticum chuanxiong, podría proteger las mitocondrias de las neuronas primarias del hipocampo de rata cultivadas, reducir la producción de radicales libres y ayudar a eliminar los radicales libres, desempeñando así un papel protector contra el daño celular causado. por ácido kaínico. Liu Xiaoling et al. [4] cultivaron células sinoviales de rata primarias y descubrieron que la sinomenina puede bloquear la progresión de la sinovitis al inhibir la proliferación maligna de las células sinoviales y la expresión del gen del ARNm de la interleucina-6. Oi Wah Lam et al [5] informaron que la tetrandrina puede inhibir significativamente la actividad de proliferación de las células del músculo liso de las vías respiratorias. La tetrandrina tiene un efecto inhibidor significativo sobre el aumento de [Ca2+]I causado por la histamina. Se especula que el efecto inhibidor de la tetrandrina sobre la actividad de proliferación de células cultivadas del músculo liso de las vías respiratorias se puede lograr bloqueando los canales de Ca2+ en la membrana celular y reduciendo la [Ca2+]. I. Bickmeyer et al [6] informaron que la tetrandrina puede bloquear la actividad primaria. Los canales de calcio dependientes de voltaje en células cromafines bovinas cultivadas promueven la liberación de catecolaminas y aumentan los niveles de calcio intracelular. Cui Yunhua et al. [7] cultivaron células estrelladas hepáticas de rata en cultivo primario y descubrieron que el ácido salvianólico B podría reducir el grado de oxidación de las células estrelladas hepáticas activadas y estimuladas por malondialdehído e inhibir la expresión del antígeno nuclear de las células proliferantes, lo que puede estar relacionado con antioxidante y antioxidación relacionado con la proliferación. Li et al. [8] cultivaron neuronas del mesencéfalo y células gliales primarias y descubrieron que la triptolida extraída de Tripterygium wilfordii puede resistir la reducción de la absorción de dopamina intracelular y la pérdida de la actividad inmune de la tirosina hidroxilasa causada por el lipopolisacárido. producción de factor de necrosis tumoral α y óxido nítrico. La triptolida también puede proteger las neuronas dopaminérgicas del daño de los lipopolisacáridos, posiblemente al inhibir la actividad de la microglía.
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