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- Qué medio se debe utilizar para el cultivo primario de células de embrión de polloI. Condiciones y requisitos del cultivo celular 1. Todos los equipos, dispositivos y soluciones en contacto con las células deben mantenerse absolutamente estériles para evitar microorganismos extracelulares. de la contaminación. El método de esterilización más fiable y utilizado actualmente es el autoclave. Por ejemplo: productos de vidrio, tela, productos metálicos: productos de caucho: 6,8 kg20 min: solución de cultivo, como solución de Hanks, proteína de leche hidrolizada: 3,4,5 kg10 min Artículos de infección experimental y cadáveres de animales, etc.: 6,8 kg20 min. pipetas, etc. Se puede utilizar la esterilización por calor seco; todos los líquidos que no sean adecuados para la esterilización por calor, como fluidos de cultivo sintéticos, cadáveres de animales pequeños, etc. Todos los líquidos que no sean aptos para la esterilización térmica, como medio de cultivo sintético, suero de ternera, tripsina, etc., pueden esterilizarse mediante filtración. Concentraciones de desinfectantes de uso común para cultivo celular y cómo utilizarlos 2. Debe haber un aporte adecuado de nutrientes y no debe haber sustancias nocivas, incluida una cantidad muy pequeña de iones nocivos mezclados. Por esta razón, debemos pagar Atención a la limpieza del equipo y la calidad del agua utilizada para preparar el líquido. La calidad del agua es muy importante para el cultivo celular (ver Tratamiento del agua). 3. Asegure un suministro adecuado de oxígeno. El metabolismo celular requiere aire; de lo contrario, las células morirán. Cuando se utiliza un tanque de cultivo para cultivo estático o un matraz giratorio para cultivo rotacional, siempre que el volumen del líquido de cultivo no supere el 30 % del volumen total, se puede garantizar un suministro adecuado de oxígeno a las células mediante el intercambio de aire con el líquido. superficie. Cuando se utiliza un tanque para cultivo profundo, generalmente se requiere ventilación que contenga 5CO2, o se mezclan CO2, N2, O2 y aire en diferentes proporciones según sea necesario. El exceso de oxígeno tampoco favorece el crecimiento celular. 4. Los productos nocivos del metabolismo celular deben eliminarse en cualquier momento. Las células producirán una gran cantidad de desechos metabólicos durante su metabolismo, como CO2, ácido láctico, amoniaco, urea, indol, etc. Estos productos son perjudiciales para la supervivencia de las células y deben eliminarse a tiempo. Cuando se cultiva en una pequeña cantidad, el indicador rojo de fenol en el medio se vuelve amarillo, lo que indica que se produce una gran cantidad de ácido láctico y que el medio debe reemplazarse con medio nuevo a tiempo. En el caso de cultivos a gran escala, los contenidos de glucosa y ácido láctico deben medirse en cualquier momento y debe ajustarse la velocidad de perfusión para mantener los metabolitos por debajo de niveles inofensivos. 5. Un buen ambiente externo adecuado para su supervivencia, incluyendo temperatura, valor de pH, presión osmótica y concentración de iones, etc. Diferentes células tienen diferentes requisitos de pH. Las diferentes células tienen diferentes requisitos en cuanto al valor del pH. En términos generales, el valor del pH adecuado para el crecimiento celular es de alrededor de 6,7,4. Como se mencionó anteriormente, las células producen grandes cantidades de ácido láctico durante el metabolismo, lo que reduce el pH del medio de cultivo. Para mantener el valor de pH de la solución de cultivo, generalmente se agregan varios sistemas tampón a la solución de cultivo, como Na2HPO4/Na2HPO4, NaHCO3/H2CO3 (CO2), tricineglicina y la solución tampón de Hepes (las concentraciones comunes son 10-50 prostituta). 6. Siembre semillas a tiempo y mantenga la densidad celular adecuada (ver pasaje celular) 2. Separación celular 1. Separación de leucocitos humanos. Los leucocitos humanos son células comúnmente utilizadas para preparar IFN-α y γ, principalmente a partir de sangre venosa de donantes de sangre, pero también de sangre que queda en la circulación extracorpórea durante la cirugía, sangre del cordón umbilical durante el parto y tejidos como el bazo y las amígdalas. 2. Aislar cardiomiocitos embrionarios humanos. Para la preparación de IFN-β. III.Cálculo de la edad celular en cultivo in vitro El método de cálculo de la edad de las células diploides es la duplicación de la población celular, en función del número de células en cada población de células del contenedor de cultivo. Cada duplicación es una generación, es decir, 1 botella de células. frente a 2 botellas (la tasa de siembra es 1:2), y luego una botella de células es la primera generación de 1 botella a 4 botellas (1:4) son las células de 1 botella a 8 botellas; (1:8) son la tercera generación. La edad de las células utilizadas para la producción se limita a los primeros 2/3 de su vida útil. Las líneas celulares se pasan según una determinada dilución y cada pase se considera una generación. El límite final de generación de células para la producción se determina en función de datos empíricos para cada línea celular para garantizar la calidad y seguridad de las células.
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- Lista de capítulos de El romance del dragón y la serpienteEl primer capítulo está lleno de altibajos, en cuclillas como un caballo al galope, vacío. Capítulo 2 Date la vuelta y junta las manos y los ojos, los codos como lanzas. Capítulo 3: La columna se derrumbó como un dragón y el centro de gravedad cayó. Capítulo 4: Date la vuelta y golpea a la gente como si fuera un cuadro, tus habilidades no le temen a las armas. El capítulo 5 trata sobre los cambios del templo. Capítulo 6 ¡Artes marciales! ¡Una docena es ilegal! Capítulo 7 La víctima del robo Capítulo 8 La brecha entre el maestro y el ladrón Capítulo 9 Tang Zhizhen Capítulo 10 El Kung Fu avanzado en Tai Chi Empujar Capítulo 12 Técnicas de piernas tan poderosas Capítulo 12 Encontrar fuerza en el movimiento. Capítulo 13 Crecimiento rápido Capítulo 14 Enfrentamiento entre Dragón y Serpiente Capítulo 15 ¡A remar! ! ! ! ! Capítulo 16: Ganar dinero denunciando un secuestro Capítulo 17: Ganar dinero denunciando un secuestro Capítulo 18: Ganar dinero denunciando un secuestro Capítulo 19: Quién mató al Capitán Cao y prendió fuego al libro Capítulo 20: Autoinforme de Tang Capítulo 21: Introducción al trabajo Capítulo 22 ¿Cuál es más rentable, realizar o matar enemigos? Capítulo 23: Entrar por primera vez al mundo de las artes marciales; Capítulo 24: Hacer llorar a la gente; Capítulo 25: El método de lucha más clásico; Capítulo 26: Tratar a los demás con los puños. Capítulo 27 ¡Practica duro! ! ! Capítulo 28: Lado a lado, el porte del maestro Capítulo 29: Las pistas traídas por Zhang Tong Capítulo 30: Buenas artes marciales pero también miedo al trabajo duro Capítulo 31: Tai Chi usa estacas de madera para ganar fuerza Capítulo 32: Maestros costeros Capítulo 33 Capítulo 34 : Cooperación tácita Capítulo 34: Comienza a desarrollar tu propia fuerza Capítulo 35: Participa en acciones peligrosas Capítulo 36: Participa en acciones peligrosas Capítulo 37: Wing Chun Crane, Ou y Gun Capítulo 38: Controla las emociones Capítulo 3 Capítulo Diecinueve De la noche a la mañana... Capítulo 40 Prestigio oficial, vigor y testimonio Capítulo 41 Conciencia del escudo Capítulo 42 Equipo asesino profesional Capítulo 43 Usando un palo de transporte como arma, una batalla sangrienta en el largo callejón Capítulo 1 Capítulo 44: Usando un palo de hombro como arma, Capítulo 45: El consecuencias de una sangrienta batalla entre un sapo y un cisne en un largo callejón, Capítulo 46: Manejo de la espada en la Escuela Central de Artes Marciales, Capítulo 47: Los artilugios de la secta Bagua, Capítulo 48: Músculos y huesos Para aflojarse, para atacar la piel Capítulo 49: Escuchar pero no ver las debilidades de las personas Capítulo 50: Comparte tus sentimientos Capítulo 51: Corazón puro como un niño, es decir, corazón tan puro como un niño Capítulo 52: Acero. El capítulo 53 de Steel es como un niño, el capítulo 54 de Steel está al alcance de la mano y la gente está haciendo todo lo posible para luchar contra el enemigo. Capítulo 56: Juegos de azar en Liangshan. Capítulo 57: Indicadores de invalidez e indicadores de muerte. Capítulo 58: Fuerza cortante en forma de tigre. Capítulo 59: Preparativos secretos. El capítulo 60 está a punto de ingresar al mundo de las artes marciales del sudeste asiático. Capítulo 61: No se puede agregar ni una pluma. La mosca no puede posarse. Capítulo 62 Si estás organizado, no tienes nada que temer. Capítulo 63 Hazte famoso en una pelea Capítulo 64 Hazte famoso en una pelea Capítulo 65 ¿Cómo pueden los miembros del grupo tener miedo del inframundo? Capítulo 66 El poder de las armas de fuego Capítulo 67 La persistencia de Wang Chao Capítulo 68 Práctica hasta el punto de “fácil hablar” Capítulo 69 La sorpresa del principito Capítulo 70 Wang Chao fue malinterpretado como un espía Capítulo 71 El gran concurso en el Estrecho Capítulo 69 Capítulo 72 La gran batalla en el estrecho Capítulo 73 ¡Saltar al mar! Capítulo 74 La batalla acaba de comenzar Capítulo 75 El Kung Fu de Chen Aiyang Capítulo 76 Fuerza de captura de sapo y fuerza de toro imprudente Capítulo 77 Hábil en la práctica de las seis sectas Capítulo 78 De tigre a águila, de serpiente a dragón Capítulo 79: Fortalecimiento diario Capítulo 80: ¡Garras de águila, poder oscuro, sangre en la orina! Capítulo 81: Teniente comandante Capítulo 82: ¡Quiero que te conviertas en Wu Qingyuan en el mundo de las artes marciales! Capítulo 83: Los tres tigres de Guangdong de Dai Jun Capítulo 84: Kungfu avanza a pasos agigantados Capítulo 85: Bofetada en la cara con la cabeza Capítulo 86: ¡Ataca la ciudad! Capítulo 87 Construcción del poder oscuro n Capítulo 88 Adiós Jia Zhu Capítulo 89 Tang VS Chen Aiyang Capítulo 90 Tang VS Chen Aiyang Capítulo 91 Tang VS Chen Aiyang Capítulo 92 Relajación de músculos y huesos, ataque de piel, alma vacía Capítulo 93 La organización quiere que lo mates ! Capítulo 94: Matar al chico genio Capítulo 95: Matar al chico genio Capítulo 96: Odio total Capítulo 97: El equilibrio entre matar y actuar Capítulo 98: El sonido del trueno penetra en los órganos internos Capítulo 99: Capítulo de artes marciales populares Capítulo 100: ¡Tienes muy poca experiencia práctica! Capítulo 101: Respirar y practicar boxeo Capítulo 102: Guardar rencor Capítulo 103: Las buenas intenciones no son recompensadas Capítulo 104: La distancia es tan corta que el arma es inútil Capítulo 105: Su apellido es Tang Capítulo 106: ¡Pegaso pisa la golondrina! ¡El arte del ataque combinado! Capítulo 107: ¿Es posible no luchar por lo mejor? Capítulo 108 La tormenta se está levantando. Capítulo 109 La tormenta se está levantando. Capítulo 110 Los rumores son feroces. El capítulo 111 es el duelo de Wang Chao. Capítulo 112 Surfeando con la serpiente dragón. Capítulo 113 La gente corriente es inocente. El capítulo 114 es directamente inválido. 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