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La tinción in situ de núcleos celulares apoptóticos individuales completos o cuerpos apoptóticos puede reflejar con precisión las características bioquímicas y morfológicas más típicas de la apoptosis. Puede usarse para detectar apoptosis en secciones de tejido incluidas en parafina, secciones de tejido congeladas, células cultivadas y células aisladas de tejidos, y puede detectar cantidades muy pequeñas de células apoptóticas. Su sensibilidad es mucho mayor que la de los métodos histoquímicos y bioquímicos habituales, por lo que se utiliza ampliamente en el estudio de la apoptosis. (5) Resuspender las células en PBS que contenga 100 ug/ml de RNasa A y 50 ug/ml de PI, e incubar a temperatura ambiente durante 30 minutos (6) Después de la tinción con PI y la digestión con RNasa A, filtrar las células con una membrana de nailon de malla 300; suspensión, y luego utilizó citometría de flujo para analizar cuantitativamente la distribución del ciclo celular y las células apoptóticas. 5. Pregunta: Quiero hacer un análisis del flujo del ciclo celular. Recogí unos 10 metros cúbicos de células, pero después de fijarlas con etanol, todavía encontré precipitación celular. Sin embargo, después de lavar dos veces con PBS, casi no hubo precipitación celular y las células no se pudieron encontrar en la computadora. 10. Pregunta: ¿Cómo preparar muestras para citometría de flujo para observar el ciclo celular? Apoptosis: definición del término técnico apoptosis. ¿Cómo regulan las células la apoptosis de forma precisa y precisa? Uno de los oncogenes pertenece a la familia de los factores de crecimiento y el otro a la familia de los receptores de factores de crecimiento. La activación y expresión de estos genes estimulan directamente el crecimiento de células tumorales, y estos oncogenes y sus productos de expresión también son importantes reguladores de la apoptosis. Después de la expresión de diversos oncogenes, se bloquea el proceso de apoptosis de las células tumorales y aumenta el número de células tumorales. Por tanto, comprender el mecanismo de la tumorigénesis desde la perspectiva de la apoptosis se debe al mecanismo apoptótico de las células tumorales y a la obstrucción de la reducción de las células tumorales. Kit de detección de apoptosis con anexina V-FITC/Apoptosis con anexina V-FITC... El kit de detección de apoptosis con anexina V-FITC es un método que utiliza anexina V humana recombinante marcada con FITC para detectar el kit de detección de apoptosis para el fosfato de fosfatidilserina que aparece en la célula. superficie de la membrana durante el proceso. La anexina V marcada con la sonda fluorescente verde FITC, es decir, anexina V-FITC, se puede utilizar para detectar el recambio de fosfatidilserina, un factor importante en la apoptosis, de forma muy sencilla y directa mediante citometría de flujo o microscopía de fluorescencia. Inmunotinción celular. 1. Lave las células tres veces con PBS. 2. Utilice 100 ul de tampón de unión de anticuerpos para suspender las células. Opere en un tubo EP. Agregue la concentración adecuada de anticuerpo primario tres veces con tampón de unión de anticuerpos. eliminar el sobrenadante 4. Resuspender las células usando 100 ul de tampón de unión de anticuerpos, agregar la concentración adecuada de anticuerpo secundario, lavar las células tres veces con tampón de unión de anticuerpos en hielo a 1 hora y 5 horas y eliminar el sobrenadante por completo 6. Si se detectan células aguas arriba, se pueden suspender directamente en 500 ulPBS. Si utiliza un microscopio de fluorescencia para observar, puede agregarlo directamente a una placa de 12 pocillos o a una placa de 6 pocillos y observar después de que las células se asienten. ¿La resonancia magnética in vitro muestra USPIO? ¿Señal de RM de CTGFP incubada con células Bel7402 en T2? En comparación con el grupo USPIO, la WI se redujo significativamente, mientras que la señal de RM del grupo de competencia estaba en T2? WI fue ligeramente menor que el del grupo USPIO (Fig. 3). ¿Tinción con azul de Prusia que muestra células Bel7402 con USPIO? CTGFP está significativamente más unida que USPIO, y después de la preincubación de células Bel7402 con péptido libre, las células están unidas a USPIO? La unión de CTGFP se reduce significativamente, por lo que se puede inferir que las nanopartículas modificadas con CTGFP mejoran en gran medida la unión entre las células y las nanopartículas. Las nanopartículas modificadas con péptidos son selectivas, logrando así la función de dirección del sistema de administración de CTGFP/avb3.
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El tiempo medio de supervivencia de los animales alcanza más de 100 días. Tiene una citotoxicidad obvia para las células tumorales de ascitis de Ehrlich cultivadas in vitro. También se descubrió que después de que a los ratones se les inyectara rubescensina A, la parte insoluble de timidilato (ADN) inyectada en las células tumorales humanas disminuyó, mientras que la parte soluble en ácido del núcleo de timidina aumentó, especialmente el trifosfato de timidina, lo que indicó que la oridonina A de Rubescens A puede bloquear la polimerización de sustratos de desoxirribonucleótidos para formar ADN sin afectar la fosforilación de timidina. La combinación de oridonina y bleomicina A5 puede inhibir significativamente la síntesis de ADN de las células cancerosas de leucemia P388 y ascitis de Ehrlich in vivo e in vitro, y el efecto inhibidor sobre la síntesis de ADN tumoral es más fuerte que el de las células de la médula ósea. Si se utilizan en combinación oridonina A, bleomicina A5 y mostaza oncocida, la tasa de prolongación de la vida de ratones con tumores trasplantados, la inhibición de la proliferación de células de sarcoma 180 in vivo y el efecto letal sobre las células cancerosas de ascitis de Ehrlich in vitro son los mejores. . 【Aplicación moderna】1. El Grupo Colaborativo de Investigación Rubesia Rubescens de la provincia de Henan informó que el jarabe de Rubesia rubescens se usó para tratar el cáncer de esófago en etapa temprana, y 74 casos lo usaron durante más de 3 años. Después del seguimiento, 14 casos mejoraron, 51 casos se estabilizaron, 7 casos progresaron y 2 casos fallecieron. Desde el inicio del tratamiento, 72 de 74 casos estaban vivos. 17 casos fueron tratados durante más de 5 años y todos sobrevivieron. Al mismo tiempo, se dividieron en tres grupos: grupo de tratamiento quirúrgico, grupo de radioterapia y grupo sin tratamiento. Las tasas de supervivencia a tres años fueron 77,2, 53,8 y 36,3 respectivamente. Se trataron otros 35 casos de cáncer de esófago avanzado, con una tasa efectiva total de 28,6. La oridonina A se utilizó para tratar 17 casos de cáncer de esófago, con una tasa efectiva total de 23,5. Desde la perspectiva de la eficacia, Rubescens oridopsis no es tan eficaz como la pingyangmicina, la eritromicina y la vinblastina amida, pero desde la perspectiva del período de remisión y el tiempo de supervivencia, Rubescens oridopsis es significativamente mejor que los fármacos anteriores. El tiempo de supervivencia promedio de Rubesia rubescens es de más de 14 meses, entre los cuales 10 pacientes sobrevivieron más de 2 años y 1 paciente sobrevivió más de 65 meses. La mayoría de los medicamentos antitumorales mencionados anteriormente sobrevivieron más de 65 meses. . Puede mejorar la eficacia de Rubesia rubescens combinada con medicamentos de quimioterapia en el tratamiento del cáncer de esófago avanzado en el Departamento de Oncología del Primer Hospital Afiliado de la Facultad de Medicina de Henan. Se trataron 97 casos de cáncer de esófago avanzado con Rubescens orifolia, ciclofosfamida y eritromicina, de los cuales 5 casos tuvieron remisión completa, 12 casos tuvieron remisión parcial y 26 casos fueron efectivos, con una tasa efectiva total de 44,3. Siete casos fueron tratados con Rubescens rubescens, Pingyangmicina y mostaza Tutu, todos los cuales fueron efectivos. Después de combinarlo con los medicamentos anteriores, sus efectos secundarios también se reducen. 2. Cáncer de hígado Según las estadísticas del Departamento de Oncología del Primer Hospital Afiliado de la Facultad de Medicina de Henan, 31 casos de cáncer de hígado primario fueron tratados con jarabe y tabletas de oridopsis u oridonina A. Aproximadamente el 80% de los pacientes tenían síntomas evidentes como dolor. en la zona del hígado y mejora la pérdida de apetito. La tasa de supervivencia seis meses después del tratamiento fue de 29,6, la tasa de supervivencia a tres años fue de 12 y la tasa de supervivencia a dos años fue de 10. El tipo simple tiene un buen efecto curativo, mientras que el tipo esclerótico tiene un efecto curativo deficiente. Desde la perspectiva de la tasa de supervivencia a medio año, la eficacia de Rubescens oridopsis es menor que la de la suspensión de camptotecina y la zilomicina, pero similar a la del fluorouracilo y la tiotepa. A juzgar por la tasa de supervivencia a un año, Rubesia rubescens no es peor que los fármacos mencionados anteriormente. Tiene pocos efectos secundarios y puede mejorar los síntomas de la mayoría de los pacientes con cáncer de hígado. Es uno de los fármacos más seguros y eficaces para el tratamiento. de cáncer de hígado. 3. Tumores malignos Tome jarabe de Rubesia rubescens (1: 100), de 20 a 50 ml cada vez, o tabletas de Rubesia rubescens (cada tableta contiene 3 g de fármaco crudo), 5 tabletas cada vez, 3 veces al día por vía oral. Hubo 5 casos en el grupo de preparación espesante de oridonina. El uso de la preparación cruda fue el mismo que el anterior, con 75 a 100 mg de oridonina y 500 ml de solución de glucosa, infundidos por vía intravenosa una vez en días alternos. La duración mínima de la medicación es de 1 mes y la duración máxima es de 15 meses. Resultados: En el grupo de preparación cruda, 3 casos se aliviaron parcialmente, 11 casos fueron notablemente efectivos, 16 casos se mantuvieron estables y 10 casos fueron ineficaces.
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