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- ¿Cómo perder peso rápidamente? Por favor, gracias. Para moldear unas piernas bonitas en la vida diaria, levante los talones al subir escaleras y utilice las piernas para soportar peso, lo que puede eliminar la grasa de la parte interna de los muslos y las nalgas. 2. Cuando esté sentado en una silla, cubra las dos pantorrillas juntas y cuente del uno al ocho antes de cambiar de pierna. Repite este movimiento sin dejar de respirar. Esto puede ejercitar las líneas de la pantorrilla. 3. Siéntate en una silla y mira televisión. No dobles las rodillas. Levante una pierna y luego bájela. Repita esta acción de 8 a 10 veces y luego cambie a la otra pierna para eliminar la grasa de ambos lados del muslo. 4. Al caminar, camine más rápido y dé pasos lo más largos posible para ejercitar los músculos de las piernas. En pocas palabras, camina con energía. Esta forma de caminar debe ser un hábito que desarrolles habitualmente. Método de elevación de piernas de pie: Sostenga la mesa con ambas manos para ayudar a equilibrar el cuerpo, párese con las piernas juntas de forma natural, levante los talones durante dos o tres segundos y luego bájelos. Hacerlo de 5 a 6 veces al día puede tensar las pantorrillas, hacer que los músculos sean más elásticos y las líneas más bellas. Sentado y elevación de piernas: Sentado en una posición natural, coloque las piernas planas en un ángulo de 90 grados. Intente levantar los talones durante más de diez segundos y luego bájelos. Repita hasta que sus pantorrillas se sientan cansadas. Esta acción puede tensar las nalgas y los muslos y hacer que los músculos sean elásticos sin engrosar las nalgas, los muslos y las pantorrillas. Siéntese erguido y levante los talones: primero siéntese erguido, sostenga ambos lados de la silla con ambas manos, levante las piernas y estire los dedos de los pies, contraiga los músculos abdominales al mismo tiempo y levante lentamente los dedos de los pies y bájelos. Esta acción puede tensar eficazmente las pantorrillas, los muslos, las posiciones de los brazos y los músculos abdominales. De hecho, si desea adelgazar las pantorrillas, primero debe comprobar si los músculos de las pantorrillas están flojos o tensos. Si tus músculos están tensos, será más difícil perder peso. Por lo tanto, el plan de reducción de la primera pierna debe comenzar aflojando la fuerte grasa de la pantorrilla. Método 1: Puede sentarse en el suelo entre semana, levantar un pie en ángulo recto y golpearse la pantorrilla con el puño durante 5 minutos de cada lado. Método 2: Cuando esté de vacaciones, también puede poner sales de baño comerciales en la bañera, dejar las pantorrillas en remojo un rato y relajar los músculos. Dé palmaditas en las pantorrillas después del baño para acelerar la circulación sanguínea. Paso 2: Fortalecer los ejercicios de reducción y tonificación de grasa Cuando las pantorrillas comiencen a ablandarse (o estén naturalmente flojas), la siguiente ronda de trabajo de pérdida de peso es fortalecer los efectos de reducción y tonificación de grasa. día. Movimiento (1) 1. Coloque la parte delantera de su pie sobre una plataforma elevada y presione su pie hacia abajo lo más que pueda. 2. Luego ponte de puntillas con las pantorrillas y levanta todo el cuerpo con fuerza. Repita este conjunto de movimientos rítmicamente, hágalo de 20 a 30 veces, levántese lo más que pueda y presione hacia abajo lo más fuerte posible para no sentir un poco de dolor. Puede colocar una mano en el soporte para mantener el equilibrio. Ejercicio (2)1. Acuéstese en el suelo, estire los pies hacia arriba a 90 grados con respecto a su cuerpo, cruce los empeines con una toalla larga, estire las manos y párese de puntillas. 2. Presione firmemente la toalla con ambas manos y presione las plantas de los pies al mismo tiempo para mantener las manos y los pies rectos. Repita este conjunto de acciones 40 veces para tensar las pantorrillas y adelgazar las líneas. Paso 3: Sprint final para adelgazar las piernas y entrar a la etapa final. Por supuesto, para acelerar el efecto de adelgazamiento. ¡También puedes comprar algunas cremas y productos para adelgazar las piernas que te ayudarán, que pueden hidratar tus piernas y hacerlas radiantes! Además del masaje, la terapia dietética para eliminar el edema y los hábitos alimentarios adecuados también pueden crear unas piernas hermosas. 1. La vitamina E ayuda a eliminar el edema. La mala circulación sanguínea puede provocar fácilmente la hinchazón de los pies. Los alimentos que contienen vitamina E ayudan a acelerar la circulación sanguínea y previenen la flacidez de los músculos de las piernas. Los alimentos ricos en vitamina E incluyen las almendras, el maní y el germen de trigo. 2. La vitamina B acelera el metabolismo. La vitamina B1 puede convertir el azúcar en energía, mientras que la B2 puede acelerar el metabolismo de las grasas. Consuma más alimentos ricos en vitamina B, como champiñones, semillas de sésamo, tofu, maní, espinacas, etc. 3. Consuma menos sal para reducir el edema. Comer alimentos salados con regularidad puede provocar fácilmente una acumulación excesiva de agua en el cuerpo, provocando edema, que puede acumularse fácilmente en las pantorrillas. Además de reducir la absorción de sal, también puedes comer más alimentos que contengan potasio, porque el potasio ayuda a eliminar el exceso de sal del organismo. Los alimentos que contienen potasio incluyen tomates, plátanos, patatas, apio, etc. ¿Cómo puedes hacer que tus piernas sean más delgadas y tonificadas comiendo estos 14 alimentos que hacen que tus piernas sean más delgadas y hermosas? ¡Creo que te interesará saberlo! De hecho, hay muchos alimentos disponibles en cereales integrales que contienen muchos nutrientes necesarios para unas piernas bonitas, pero a menudo se omiten debido a la preferencia por unas piernas bonitas. No solo le diremos qué nutrientes son indispensables para las mujeres hermosas, sino que también le brindaremos 14 alimentos para piernas estrictamente seleccionados. Estos alimentos no sólo son baratos, sino que también están ampliamente disponibles. Todo contiene nutrientes para que tus piernas luzcan atractivas y con estilo. ¡Coge tu cesta de comida y prepárate para buscar estos alimentos que embellecerán tus piernas! Primero, echemos un vistazo a los “elementos adelgazantes” 1 en la sección de nutrición. Sin vitamina A, las funciones de las glándulas sebáceas y sudoríparas se debilitarán, el estrato córneo se espesará gradualmente y la piel comenzará a secarse.
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Principales síntomas de intoxicación por flema y tipo de estancamiento: dolor de cabeza, mareos, entumecimiento de las extremidades, fatiga, lengua fuerte, náuseas y vómitos, visión borrosa, flema excesiva y opresión en el pecho, lengua grasa con marcas de dientes, capa blanca espesa, resbaladiza o fibrosa. legumbres. Método de tratamiento: resolver la flema y disipar el estancamiento, desintoxicar y reanimar. Prescripción: Sumar y restar Decocción de Ditan. Dan Nanxing 10 g, Pinellia ternata 10 g, Citrus aurantium 10 g, Bamboo Ru 10 g, Cáscara de mandarina 10 g, Atractylodes 10 g, Poria 30 g, Acorus calamus 15 g, Escorpión entero 5 g, Ciempiés 2 y Hongo Shanzi 65438. 2. Principales síntomas de estancamiento de qi y sangre. Tipo de estasis: dolor de cabeza, hinchazón de la cabeza, tez apagada, visión borrosa, labios morados, lengua morada o equimosis, pulso fino o fibroso. Tratamiento: activación de la circulación sanguínea y eliminación de la estasis sanguínea, dispersión del estancamiento y reanimación. Receta: Decocción de Tongqiao Huoxue. 10 g de semilla de melocotón, 10 g de cártamo, 10 g de raíz de peonía roja, 10 g de lombriz de tierra, 10 g de chuanxiong, 30 g de raíz de peonía blanca, 5 g de muda de cigarra, 10 g de tribulus terrestris, 10 g de escorpión entero, Wangbuliuxing 65438. 3. Los principales síntomas del viento endógeno del hígado: dolor de cabeza y mareos, vértigo, irritabilidad, convulsiones y temblores, afasia fuerte, coma fuerte, náuseas y vómitos, lengua roja con menos saburra y pulso filiforme y rápido. 0 Tratamiento: nutrir el yin y dominar el yang, extinguir el viento y eliminar el calor. Receta: Pastillas Qiju Dihuang con sabor añadido. 10 g de baya de goji, 10 g de crisantemo, 15 g de Rehmannia glutinosa, 10 g de Cornus officinalis, 15 g de Alisma, 10 g de corteza de peonía, Poria cocos, Ligustrum lucidum 15 g, ostra 65438. 4. Los principales síntomas del exceso de calor en el hígado y la vesícula biliar: dolor de cabeza, hinchazón de la cabeza, como Conos para picar, vómitos en spray, lengua seca y roja, lengua roja oscura o carmesí, saburra amarilla, pulso rápido. Método de tratamiento: quitar el calor y purgar el fuego, desintoxicar y limpiar los intestinos. Receta: Decocción de Longdan Xiegan. 5 gramos de genciana, 10 gramos de escutelaria, 10 gramos de gardenia, 10 gramos de rehmannia cruda, 10 gramos de raíz de peonía roja, 5 gramos de sal de Glauber, 10 gramos de casia, 30 gramos de Hedyotis diffusa y 5 gramos de sophora semillas. 5. Los principales síntomas de la deficiencia de yang del bazo y el riñón y de la deficiencia de sangre del hígado son: mareos, tinnitus, sordera, disminución de la visión, dolor de cintura y rodillas, extremidades frías, dificultad para respirar, pereza, heces blandas o garganta seca y sed. , pómulos rojos, sudores nocturnos y cinco malestares estomacales, el pulso es profundo y débil. Tratamiento: Para aquellos con deficiencia de yang, el bazo, los riñones y el cerebro se calientan; para aquellos con deficiencia de sangre, el bazo, los riñones, el hígado, el cerebro y los nervios se fortalecen. Receta: Dihuang Yinzi más o menos. Rehmannia glutinosa 30g, Cornus officinale 10g, Dendrobium 10g, Ophiopogon japonicus 10g, Schisandra chinensis 5g, Acorus 15g, Cistanche deserticola 30g, Morinda citrifolia 10g, Canela 5g, Polygala 10g, Poria cocos 15g, Pao. Para aquellos con deficiencia parcial de yang, retire 10 gramos de dendrobium, Ophiopogon japonicus, epimedium, 15 gramos de ñame, acónito, canela, morinda, 30 gramos de langosta, 10 gramos de angélica y 15 gramos de astrágalo. Si la presión intracraneal aumenta significativamente en las líneas anteriores, se pueden agregar diuréticos y medicamentos repelentes de agua, como el coñac Imperata. (3) Tome 1,30 g de konjac unilateralmente, hiérvalo en agua todos los días y tome 20 parches como un tratamiento. 2. 30 gramos de Snake Liugu, 30 gramos de corteza de Xanthium, 30 gramos de Guanzhong, 20 gramos de Puhuang y 20 gramos de Aesculus aesculata. Primero hierva Sheliu Gu durante 2 horas, luego agregue otros medicamentos, filtre el jugo claro y tómelo. 3. Piedra cerebral Xian Nao Fang Yu 10 g, casia 15 g, ostra cruda 15 g, panal 10 g, piel de cigarra 5 g, clemátide 15 g, escorpión entero 10 g. Eficaz contra tumores cerebrales y dolores de cabeza. 4. La sopa de crisantemo y gusano de seda contiene 30 gramos de casia, 10 gramos de gusano de seda, 10 gramos de lombriz de tierra, 5 gramos de muda de cigarra, 10 gramos de cola de caballo, 10 gramos de caparazón de tortuga cruda, 10 gramos de panal, 30 gramos de ostras, 10 gramos de esponja vegetal, 5 gramos de excremento entero de escorpión y gusano de seda. Esta receta es eficaz para los tumores cerebrales acompañados de dolor de cabeza intenso, vómitos y pérdida de la visión. (4) Medicina patentada china 1. Tome las píldoras Huangxi 3 g cada vez, dos veces al día. Tiene los efectos de eliminar el calor y resolver la flema, disipar la estasis sanguínea y reanimar las ideas, disipar el estancamiento y aliviar el dolor. Se utiliza para pacientes con tumores cerebrales, dolores de cabeza, irritabilidad, fiebre, náuseas y pulso entumecido. 2. Pastillas de Niuhuang Qingxin: 6 g por pastilla. 1 cápsula cada vez. Tres veces al día. 3. Cada pastilla de pastillas reconstituidas antitrombosis pesa 9 gramos. 1-3 veces cada vez, 2 veces al día, 1 mes es un curso de tratamiento. Tiene las funciones de promover la circulación sanguínea, aliviar el dolor y reanimar a personas con estasis sanguínea. 4. Cada pastilla de Guilun Ningshen Pills pesa 5,6 gramos. 1 pastilla, dos veces al día con agua tibia.
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Miel, jarabe de azufaifa, la miel tiene el efecto de tonificar el medio y reponer el qi, calmar los cinco órganos internos, reconciliar varios medicamentos y tiene un efecto significativo sobre el insomnio. Tome de 1 a 3 cucharaditas de miel, agregue dátiles y azúcar al agua y beba una taza antes de acostarse. Beber una pequeña cantidad de leche y azúcar antes de acostarse contiene triptófano en la leche, que puede inhibir la excitabilidad de la corteza cerebral. Algunos pacientes con insomnio están de mal humor y no contienen suficiente serotonina en el cerebro. El agua azucarada puede producir serotonina en el cuerpo y reponer las necesidades del cerebro a tiempo. Por supuesto, también debes prestar atención a tus hábitos alimenticios diarios: demasiada comida picante, como el chile, puede excitar los nervios y agravar la neurastenia y el insomnio. Comer en exceso alimentos que no son fáciles de digerir, como alimentos fritos, carnes grasas, arroz glutinoso, fideos pegajosos, etc., permanecen en el estómago durante demasiado tiempo y afectan el sueño. Alimentos excitantes como el vino, el café, el té y el cacao. La mayoría de estos elementos tienen un efecto bidireccional, estimulando a las personas en un corto período de tiempo, pero pronto causarán inhibición del sistema nervioso, provocando insomnio y acelerando la aparición de neurastenia. La medicina tradicional china cree que "la falta de armonía en el estómago provoca inquietud", así que asegúrese de llevar una dieta razonable y moderada y no comer demasiado antes de acostarse. El insomnio puede ocurrir de varias maneras. Algunas personas tienen dificultades para dormir, otras se despiertan y otras se despiertan muy temprano. Sin embargo, no importa qué tipo de insomnio sea, las personas con insomnio se sentirán muy cansadas, perezosas y sin energía durante el día, y algunas pueden tener dificultades para concentrarse y parecer irritables. Según las estadísticas, entre 30 y 40 adultos padecen en cierta medida el llamado insomnio. Sin embargo, entre las personas con insomnio, solo alrededor de 65,438 00 ~ 65,438 05 personas tienen insomnio verdaderamente grave o frecuente, y esta situación es más probable que ocurra con la edad, y esta situación es más común en mujeres que en hombres graves. De hecho, el sueño humano se puede dividir en período de vigilia, período de movimientos oculares rápidos, período de movimientos oculares no rápidos, etc. Al dormir, el ciclo del sueño progresa gradualmente desde el sueño REM, luego al sueño no REM y finalmente llega a la cuarta etapa del sueño más profundo y luego se queda dormido repetidamente. Tomando como ejemplo a los jóvenes, el ciclo de sueño es de aproximadamente 90 minutos. Luego, a medida que aumenta el tiempo de sueño, el tiempo del ciclo se alargará gradualmente y finalmente no habrá una cuarta etapa. Pero es diferente para los mayores. Las personas mayores cambian sus ciclos con más frecuencia, lo que dificulta conciliar el sueño y entrar en la tercera y cuarta etapa del sueño profundo. Hay muchas razones para el insomnio, como encías hinchadas y dolorosas, volar, etc. , puede causar insomnio temporal. En cuanto al uso de algunos fármacos, también puede provocar insomnio a largo plazo. Además, un mal ambiente para dormir, una temperatura ambiente demasiado fría o demasiado caliente en la habitación y el ruido también son causas de insomnio. Mentalmente, ansiedad, depresión, estrés vital, trastorno bipolar, etc. También puede causar insomnio. Si muchas personas tienen insomnio lo primero que piensan es en tomar pastillas para dormir, pero esta no es la única opción, pues si tomas pastillas para dormir por mucho tiempo es probable que te vuelvas adicto por lo tanto, es recomendable que si; Hay causas del insomnio, estas causas deben eliminarse primero para resolver completamente el problema del insomnio. Además, hay que tener buenos hábitos de sueño, como no beber té o café de 4 a 6 horas antes de acostarse. También se dice que beber un poco de vino antes de acostarse puede ayudar a conciliar el sueño. De hecho, es más fácil conciliar el sueño después de beber un poco de vino, pero también es más fácil despertarse. Además, lo mejor es no ingerir una comida abundante antes de acostarse. Una pequeña cantidad de comida puede ayudar a conciliar el sueño, aunque el ejercicio moderado por la tarde puede ayudar a conciliar el sueño, el ejercicio extenuante tres o cuatro horas antes de acostarse interferirá con el sueño; Por último, no duermas demasiado durante el día y establece una hora fija para levantarte cada día. Es aún más inapropiado hacer otras cosas además de dormir y tener relaciones sexuales en la cama. En cuanto a su cama, evite el tic-tac del despertador. El insomnio es un trastorno fisiológico caracterizado por una calidad y/o cantidad insatisfactoria del sueño continuo. La ansiedad o el miedo al insomnio es el factor psicológico causante de esta enfermedad. El insomnio es un trastorno del sueño común. Puede ser secundario a factores físicos, factores ambientales, enfermedades neuropsiquiátricas, etc.
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- ¿Cómo entender que la alimentación es la primera prioridad para las personas y la seguridad alimentaria es la primera prioridad? En la actualidad, existen algunos malentendidos en la supervisión integral. En primer lugar, se considera un órgano "práctico" y deliberante del gobierno. Realiza todo por teléfono, implementa documentos con documentos y funciona sin problemas; en segundo lugar, carece de comunicación y coordinación efectiva con los departamentos funcionales y no puede darse aires de coordinación específica, no puede unificar sus pensamientos y buscar comprensión; No está activo en el trabajo y no se atreve a tomar la iniciativa, prevarica cuando suceden cosas y no hace nada en el trabajo. Cuarto, el trabajo está fuera de lugar y todo es “todo incluido”. No es una supervisión macro, sino estar ocupado con asuntos específicos, provocando desalineamiento, frenando el entusiasmo de otros departamentos y siendo desfavorable para el trabajo. 1. Comprender con precisión y comprender plenamente la connotación de la supervisión integral de la seguridad alimentaria: "Los alimentos son la primera prioridad para la gente y la seguridad alimentaria es la primera prioridad". Con la mejora del nivel de vida de la gente, el interés de toda la sociedad en la alimentación ha pasado de resolver el problema de la alimentación y la vestimenta en el pasado a la salud y la seguridad del consumo de alimentos. La seguridad alimentaria se ha convertido en un tema importante relacionado con la salud y la seguridad de la vida de las personas, la imagen del partido y del país, el desarrollo económico y la estabilidad social. En este sentido, el Comité Central del Partido y el Consejo de Estado han puesto la seguridad alimentaria como el foco de rectificación y normalización del orden económico del mercado, basándose en las condiciones nacionales de mi país, y nos han asignado tres funciones principales: "supervisión, organización y coordinación integrales". , e investigación y tratamiento de accidentes mayores de acuerdo con la ley". Este es un gran desafío para nosotros. Confianza y expectativa. En primer lugar, debemos comprender profundamente el significado de estas tres oraciones para encontrar el posicionamiento correcto de la obra, comprender con precisión y comprender de manera integral la obra específica y realizar la obra de manera creativa para aprovechar al máximo el papel del "agarre". Las tres frases de "supervisión integral, organización y coordinación, e investigación y tratamiento de accidentes mayores de conformidad con la ley" no sólo son un resumen de alto nivel de las funciones desempeñadas por las autoridades reguladoras de alimentos y medicamentos, sino que también incluyen el alcance , contenido y método de desempeño de las funciones. "Supervisión integral" se refiere a la supervisión de los departamentos de supervisión de alimentos y medicamentos sobre el desempeño de las funciones de supervisión de la seguridad alimentaria y la macrosupervisión integral de la seguridad alimentaria, incluida la supervisión en todos los aspectos, incluida principalmente la supervisión de los departamentos pertinentes sobre la implementación de las normas alimentarias. responsabilidades de supervisión del mercado, situación de las tendencias de seguridad alimentaria, la implementación de opiniones y sugerencias de la gente sobre la supervisión de la seguridad alimentaria, la ocurrencia y manejo de accidentes importantes de seguridad alimentaria dentro de la jurisdicción, la implementación de instrucciones, decisiones y políticas y medidas importantes sobre el trabajo de seguridad alimentaria de niveles superiores y equivalentes de gobierno, y sistemas regulatorios de inocuidad de los alimentos. La "organización y coordinación" es la principal forma para que las autoridades reguladoras de alimentos y medicamentos cumplan con sus responsabilidades regulatorias en materia de inocuidad de los alimentos. "Organizar la investigación y el manejo de accidentes graves de conformidad con la ley" se refiere al proceso mediante el cual las autoridades reguladoras de alimentos y medicamentos organizan la investigación y el manejo de accidentes graves de inocuidad de los alimentos en sus jurisdicciones de acuerdo con las responsabilidades asignadas por las leyes y Es una parte importante de la supervisión, organización y coordinación integral de las autoridades reguladoras de alimentos y medicamentos. El segundo es ser un buen "manipulador" y desempeñar plenamente las responsabilidades de supervisión integral de la seguridad alimentaria. En la supervisión integral de la seguridad alimentaria, el departamento de supervisión de alimentos y medicamentos debe "tomar la iniciativa, coordinar activamente y realizar tareas sin sobrepasarse" de manera efectiva y adherirse al principio de "tres supervisiones y tres no interferencias", es decir, supervisar que cada departamento cumpla con sus responsabilidades de supervisión de la seguridad alimentaria sin interferir con sus acciones específicas de aplicación de la ley; supervisar la implementación de los planes de trabajo de varios departamentos, sin interferir con la asignación específica de mano de obra y el despliegue de trabajo para supervisar las empresas de producción y operación de alimentos; implementar normas de calidad, higiene y otras normas de seguridad de los alimentos, sin interferir con las operaciones específicas y el desarrollo de las empresas. En el trabajo de coordinación, es necesario "fijar la posición, resaltar el método, encontrar la posición correcta y cooperar estrechamente" y desempeñar los siguientes "cuatro" roles en la práctica específica. (1) Dar pleno juego al papel de guía de políticas. Las autoridades reguladoras de alimentos y medicamentos deben comprender plenamente el espíritu y los requisitos laborales de sus superiores, aclarar objetivos laborales específicos y coordinarse de acuerdo con la idea de "qué hacer, cómo hacerlo y quién lo hará" para formar un integración efectiva de los recursos regulatorios y garantizar que todo el trabajo se lleve a cabo de manera ordenada, esforzarse por crear una nueva situación en el trabajo. (2) Desempeñar un buen papel en la comunicación y coordinación. Las autoridades reguladoras de alimentos y medicamentos deberían tomar la iniciativa de fortalecer la comunicación regular con los distintos departamentos. A través de reuniones de trabajo, reuniones conjuntas, inspecciones conjuntas de aplicación de la ley y otras oportunidades, aprovecharemos la oportunidad para intercambiar información, conectarnos, apoyarnos y alentarnos mutuamente para mantener mejor la unidad y armonía del Comité Coordinador de Seguridad Alimentaria. , acortar la distancia y mejorar la amistad. Al mismo tiempo, debemos respetar las opiniones y sugerencias de los departamentos funcionales sobre la rectificación y estandarización del orden del mercado de alimentos, y aprovechar al máximo las ventajas de los departamentos funcionales que están familiarizados con la situación, comprenden las leyes y reglamentos regulatorios de la industria, y tener sólidos conocimientos profesionales.
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- Cómo seleccionar un gen informador para ratones transgénicosA los investigadores que estudian el desarrollo embrionario de ratones generalmente les gusta usar LacZ, lo que significa colocar LacZ bajo el control de un promotor. LacZ se puede utilizar para la tinción de embriones de todo el cuerpo, de modo que podamos conocer el perfil de expresión completo de un gen en el cuerpo. Si está realizando un seguimiento de células, como células inmunitarias, células nerviosas, etc. , generalmente se prefiere utilizar proteínas fluorescentes. Esto facilita aislar células y analizarlas in vitro (p. ej., FACS) y rastrear células aisladas in vivo (p. ej., transferencia adoptiva). Los más utilizados al principio eran EGFP y EYFP. A veces necesitamos aparear dos ratones reporteros diferentes para estudiar la relación entre dos genes. En este momento, podemos utilizar diferentes proteínas fluorescentes para marcar estos dos genes, lo que significa que podemos crear dos modelos de ratones diferentes. Debido a que la mayoría de las personas usaban EGFP en los primeros días, ahora podemos fabricar más ratones reporteros con otras proteínas fluorescentes para realizar estudios junto con ratones EGFP desarrollados previamente. ZsGreen, EGFP y EYFP son todos verdes fluorescentes. EGFP y EYFP son difíciles de distinguir. ZsGreen es una proteína fluorescente verde relativamente estable. Tanto DsRed como TdTomato son de color rojo fluorescente. Se han descrito ambas proteínas fluorescentes en ratones. TdTomato es una proteína fluorescente con una señal muy fuerte. En la actualidad, el gen informador se ha publicado en ratones y no tiene ninguna toxicidad evidente para las células o el ratón. Creo que cada vez más ratones utilizarán TdTomato como gen informador en el futuro. Aunque mRFP y mCherry son dos proteínas fluorescentes muy buenas, los instrumentos FACS ordinarios no pueden detectar señales porque requieren luz de excitación de 584 nm. Se requiere un instrumento como LSRII, pero es posible que muchos laboratorios no tengan dicho instrumento. ECFP EBFP también se utilizan en experimentos con células, pero rara vez se utilizan en ratones. Por ejemplo, se requiere luz ultravioleta para la excitación. Si desea expresar dos proteínas fluorescentes en un ratón, lo mejor es utilizar dos proteínas fluorescentes relativamente independientes. Por ejemplo, es mejor no utilizar EGFP y EYFP al mismo tiempo. HuCD2 y Thy1.1 son receptores de superficie celular. HuCD2 pierde su función de transducción de señales porque elimina la secuencia C-$TERM. ¿Cuándo se utilizan estas dos moléculas? Por ejemplo, si queremos estudiar la función de un gen de proteína intracelular (como un factor de transcripción), a menudo necesitamos aislar y purificar las células que expresan la proteína. En este momento, el gen indicador HuCD2 o Thy1.1 se puede colocar debajo del promotor del gen de la proteína intracelular (como agregar un IRES-Thy1.1), de modo que todas las células que expresen la proteína intracelular expresarán Thy1.1 en el superficie celular. De esta forma, se podrá aislar este grupo de células utilizando anticuerpos anti-Thy1.1 para estudios posteriores. Por supuesto, los anticuerpos anti-Thy1.1 también se pueden utilizar para la detección por inmunofluorescencia de secciones de tejido. HA, BANDERA, biotina, etc. Es un péptido o proteína marcado de uso común en experimentos celulares y bioquímicos. Se utiliza comúnmente en transferencias Western, inmunoprecipitación y otros experimentos debido a sus anticuerpos HA y Flag muy específicos. La biotina se puede conjugar directamente con biotina para la inmunoprecipitación. En ratones modelo, estos péptidos o proteínas etiqueta se pueden convertir en proteínas de fusión con la proteína que se va a estudiar. Los experimentos chip-on-chip son el modelo de ratón más utilizado. Por ejemplo, para estudiar la función de un factor de transcripción, es necesario conocer la ubicación y la secuencia de unión del factor de transcripción al ADN genómico cromosómico en la célula (en condiciones normales o estimulantes). Sabemos que los anticuerpos contra factores de transcripción con buena especificidad y alta afinidad son muy difíciles de obtener o preparar. En este momento, el péptido etiqueta (como FLAG) se puede colocar en el C-$TERM del factor de transcripción para producir una proteína de fusión. Después de estimular las células, se entrecruzan químicamente para fragmentar el ADN celular y genómico y luego se inmunoprecipitan con anticuerpos anti-FLAG para precipitar los factores de transcripción. Finalmente, se analizan las secuencias de fragmentos de ADN que se unen a estos factores de transcripción para encontrar las secuencias de reconocimiento de los factores de transcripción en el genoma y los genes sobre los que actúan los factores de transcripción. La luciferasa se utiliza como modelo de gen informador de ratón, a menudo para experimentos de imágenes in vivo. Por ejemplo, el gen de la luciferasa se coloca debajo de un promotor de citocina. Después de inmunizar a los ratones, algunas células u órganos expresaron esta citocina y luciferasa. Al inyectar sustrato de luciferasa, se puede detectar la distribución de fluorescencia en ratones para obtener la expresión de la citocina en diferentes condiciones inmunes. La luciferasa también se utiliza frecuentemente en la investigación del cáncer. La iniciación y la metástasis de las células tumorales se pueden estudiar mediante imágenes de fluorescencia in vivo.
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